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文献和实验线粒体内膜的外侧。细胞色素C比较容易分离提纯,其结构已清楚。哺乳动物的Cyt c由104个氨基酸残基组成,并从进化的角度作了许多研究。Cyt c的辅基血红素(亚铁原卟啉)通过共价键(硫醚键)与酶蛋白相连(见图6-2),其余各种细胞色素中辅基与酶蛋白均通过非共价键结合。 图6-2 细胞色素C的辅基与酶蛋白的联接方式 细胞色素a和a3不易分开,统称为细胞色素aa3。和细胞色素P450、b、c1、c不同,细胞色素aa3的辅基不是血红素,而是血红素A(见图6?)。细胞色素aa
100 0 0 从表中可以看出,FP、Cyt b位于抗霉素A阻断部位之前,Cyt c、cl、aa3位于阻断部位之后。用不同的抑制剂作此实验,就可以确定呼吸链中各种传递体的排列顺序。 4.在体外实验中,将线粒体分成各种复合物,检测其各自催化的反应,再将其重组,检测其催化能力。 美国格林(Green)等实验室成功地将呼吸链分离成具有催化活性的四种复合物以及CoQ和Cytc.检测各个复合物的功能发现:
,因为能可逆地受到氧化还原,所以在呼吸中遇氧直接被氧化,起到从底物传递电子的作用。尤其是在线粒体中,各种细胞色素和醌、非血红素铁、铜一起构成有一定顺序的呼吸链来传递电子,与此共轭地从 ADP和磷酸生成 ATP(氧化磷酸化反应),另在光合系统中,参与由于光而产生的氧化物和还原物间的电子传递。并将电子供给内膜系中的加氧酶,在厌氧性呼吸中,将电子供给硝酸盐及硫酸盐的还原酶。并且,在某种由单一加氧酶所引起的羟基化反应中, P- 450作为自动氧化性的血红素蛋白质起到电子传递体的作用。
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