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文献和实验的沙门氏菌。由于该方法最小检出量只有1个细菌/25克样品,所以需要增菌培养。AOAC最近认可了Gene-Tark沙门氏菌比色分析法。这种探针标记物为异硫氰酸荧光素(FITC),再用辣根过氧化酶标记抗FITC的抗体结合放大探针,在多聚腺苷酸尾部和多聚胸腺嘧啶侵染棒固相薄膜上杂交,对239株沙门氏菌的特异性检出率为100%,假阳性率为0.8%(BAM/AOAC培养法假阳性率是2.2%.)2.2 李斯特杆菌1981年首次确定它是一种食源性病原菌,1985年加尼福利亚发生爆发性流行,现用检测方法大多采用冷
检测的正确性和准确性的第一步,下面简单介绍一下不同类型的样本的处理方法。 血清血清是最常用于ELISA检测的一类样本,处理也比较简单。用无热原、无内毒素的试管或离心管采集血液标本,将试管或离心管室温放置2小时或4℃过夜,使血清析出。(最好将试管或离心管倾斜放置,使液面横截面增大,能使血清更大程度的析出。)4℃1000×g离心20min,仔细收集上清。建议将血清分装多份,-20℃或-80℃保存,避免反复冻融。采血过程中应避免溶血,因为红细胞裂解时会释放具有过氧化酶活性的物质,在以HRP为标记的ELISA
酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(如辣根过氧化物酶,简称HRP)国内已有商品供应。高质量的抗体则可通过提取纯化而获得。在制备方法上,宜选用产率高、不影响结合物的活性和不混杂干扰性物质且操作简便易行的方法。
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