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文献和实验Nature 重磅：林圣彩院士团队七年攻坚！首次破解「神药」二甲双胍作用靶点之谜
）处于中心位置，其同时也作为机体代谢稳态的主要调控因子。目前，二甲双胍通过抑制线粒体电子传递链的复合物 I 而激活 AMPK 已被广泛接受。然而，在他们的研究中却发现能量水平的下降只存在小鼠服用高剂量二甲双胍的个体，也就是说，低剂量的二甲双胍不会引起线粒体呼吸链复合体 I 的抑制以及 AMP/ATP 比值的升高。 因此，有必要深入探讨临床相关剂量的二甲双胍是如何激活 AMPK 的。通过一系列的生化实验和观察，他们发现临床剂量的二甲双胍能充分抑制溶酶体的空泡 H+-ATPase（v-ATPase
ATP酶与线粒体内膜的固有蛋白质（F0 ）组分结合形成完整的F0 F1 －ATP酶复合物后，ATP水解时释出能量就能驱动质子从线粒体内膜的一侧到达另一侧产生质子梯度。这一反应是可逆的。在线粒体内膜两侧质子梯度足够大时，也可以消耗质子梯度合成ATP，这一反应就是正常生理条件下的氧化磷酸化作用，因此可以称这个ATP酶为ATP合成酶。 F0 本身没有酶活力，细菌与叶绿体的F0 含三种亚基而线粒体F0 含四种以上亚基，其中分子量为 8000左右的亚基可能在膜内作为质子通道，当抑制剂二
， 5~10min/次？→ECL显影或NBT/BCIP显色。结果：2、荧光分光光度计分析原理：活化的Caspase-3能够特异切割D1E2V3D4-X底物，水解D4-X肽键。根据这一特点，设计出荧光物质偶联的短肽Ac-DEVD-AMC.在共价偶联时，AMC不能被激发荧光，短肽被水解后释放出AMC，自由的AMC才能被激发发射荧光。根据释放的AMC荧光强度的大小，可以测定caspase-3的活性，从而反映Caspase-3被活化的程度。 方法：收获细胞正常或凋亡细胞，PBS洗涤，制备细胞裂解液，加Ac
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