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- 2025年07月08日
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上海研谨生物
人肾小球微血管内皮细胞(HRGEC)
货号：HUCL-029
细胞特性
细胞接受后的处理：
细胞用途：仅供科研使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
货号：HUCL-029
细胞特性
- 来源：肾小球血管
- 形态：内皮细胞，贴壁生长
- 含量：>1x106 个/mL
- 污染：支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
- 规格：T25瓶或者1mL冻存管包装
细胞接受后的处理：
- 收到细胞后，请检查是否漏液，如果漏液，请拍照片发给我们。
- 请先在显微镜下确认细胞生长状态，去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
- 弃去T25瓶中的培养基，添加6ml本公司附带的完全培养基。
- 如果细胞长满（90%以上）请及时进行细胞传代，传代培养用6ml本公司附带的完全培养基。
- 接到细胞次日，请检查细胞是否污染，若发现污染或疑似污染，请及时与我们取得联系。
细胞用途：仅供科研使用。
本公司的细胞培养操作规程，供参考
一．培养基及培养冻存条件准备：
- 准备ECM培养基(ECM: Endothelial Cell Medium,Sciencell,货号1001)。
- 培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
- 冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配。液氮储存。
- 细胞处理：
- 复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
- 细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
- 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
- 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于37℃培养箱中消化1-2分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加入3ml此细胞的培养基终止消化。
- 轻轻吹打后吸出，移入15ml离心管中，在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养液后吹匀。
- 移入到事先准备好的含有5ml培养基的T-25培养瓶中或含有14ml培养基的T-75培养瓶中培养。
注意事项：
1. 收到细胞后，若发现干冰已挥发干净、冻存管瓶盖脱落、破损及细胞有污染，请立即与我们联系。
2. 所有动物细胞均视为有潜在的生物危害性，必须在二级生物安全台内操作，并请注意防护，所有废液及接触过此细胞的器皿需要灭菌后方能丢弃。
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文献和实验相关实验
（pH=7.4）清洗若干次至无明显血细胞； 2. 剪取肺组织边缘微血管丰富的组织，用含双抗的1×PBS（pH=7.4）清洗两次； 3. 将剪取的肺边缘组织剪成2-3mm3 大小，加入含双抗的1×PBS（pH=7.4）清洗； 4. 用进行过灭菌处理的玻璃滴管将剪碎的组织块和清洗用的1×PBS（pH=7.4）一起转入15ml离心管中； 5. 250rpm/min离心2 min，小心倾去液体，再加入适量的含双抗的1×PBS（pH=7.4），用玻璃滴管吹吸液体以清洗组织块； 6. 继续
%明胶预处理的培养瓶中37度培养4小时，以去除未黏附细胞，更换含50mg/L肝素、10mg/L内皮细胞生长因子的DMEM完全培养基培养。 6.每3-4天换液一次，直至长成细胞单层，选3-4代传代内皮细胞，0.25%胰蛋白酶消化备用。
原代微血管内皮 细 胞（ Primary Microvascular Endothelial Cells ）的体外分离培养 微血管内皮细胞生长因子的应用和免疫磁珠技术的发展，使微血管内皮细胞的培养和纯化变得相对简化。 1、微血管内皮细胞培养简述人体主要器官和组织的微血管内皮细胞已经培养成功的有：骨骼肌、心、脑、胃、视网膜、肺、皮肤、脉络膜、小肠、脂肪、肝窦、肾、关节滑膜、胎盘、骨髓、胰岛、角膜及食道等器官组织的微血管内皮细胞。 2、微血管内皮细胞的分离目前分离内皮细胞的方法主要有三种
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