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COLO-824
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北京百奥创新科技有限公司
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良好
1 vial
产品名称:COLO-824产品简介:The cells do not tolerate DMSO; upon thawing, DMSO has to be removed by centrifugation.产品图片:
细胞培养流程:1、培养前准备(1)培养器具:推荐使用25 cm2培养瓶或60 mm培养皿(或更小)。(2)培养基:准备适合培养该细胞的培养基(具体咨询北京百奥创新科技有限公司客服推荐培养基),建议用量5 mL(或更少)。2、细胞解冻将包装中的冻存管取出后立即放在不高于37℃的水中,并在2分钟内摇晃解冻。3、细胞复苏(1)取10ml培养基置于离心管中,用70%酒精或阳离子洗涤剂渗透纱布消毒冻存管,用消毒纱布包裹管身,拧开管盖后,将细胞悬浮液转移到离心管中;(2)1000 rpm离心3分钟,弃掉上清液;(3)将细胞重新悬浮在5ml上述培养基中(不清洗细胞)。在25 cm2的培养瓶或60 mm的培养皿中进行培养。4、细胞传代在传代之前,确保细胞增殖,因为过度稀释可能导致细胞死亡,尤其是血细胞和淋巴细胞。5、细胞冻存待细胞生长状态良好时,尽早进行细胞冻存。
什么培养基中可以省去加酚红?
酚红在培养基中被用来作为 PH 值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不使用加有酚红的培养基。
细胞培养基的配制和储存应该注意什么?
细胞培养基配好后,要先抽取少许放入培养瓶内在37℃培养箱内放置24~48h,已检测培养液是否有污染,然后方可用于实验。配置培养基所需的血清要合格并且保持稳定。一个批号试用效果良好后,就可一次购入较多同一批号的血清,这样实验条件稳定,配液时调整pH值较容易。每次配液量以使用两周左右的量为宜,一次配液不要太多,一是短期内用不完造成营养成分损失需要补充,二是量大易造成污染。
细胞传代的方法都有哪些?
根据不同的细胞采取不同的方法。贴壁生长的细胞用消化法传代;部分贴壁生长的细胞用直接吹打即可传代;悬浮生长的细胞可以采用直接吹打或离心分离后传代,或用自然沉降法吸除上清后,再吹打。
原代培养的首次传代应注意的问题?
细胞没有生长到足以覆盖瓶底壁的大部分表面以前,不要急于传代;原代培养时细胞多为混杂生长,不同的细胞有不同的消化时间,因此要根据需要注意观察及时处理,并根据不同细胞对胰蛋白酶的耐受时间而分离和纯化所需要的细胞;
吹打细胞时动作要轻巧尽可能减少对细胞的损伤;首次传代时细胞接种数量要多一些,使细胞能尽快适应新环境而利于细胞生存和增值;随消化分离而脱落的组织块也可一并传入新的培养瓶。
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