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- 百奥莱博
- 北京
- QN1112-KFP
- 2025年07月12日
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- 英文名：
DTT
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797
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北京百奥莱博科技有限公司
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百奥莱博专业生产销*(代"售")二硫苏糖醇北京厂家，我公司是生物试剂、化学试剂专业供应商，立足北京，服务全国的高校、研究所、医院、企业科研部门，欢迎各位老师来电垂询订购。
名称：二硫苏糖醇北京厂家
编号：QN1112
英文名：DTT
规格：5g|25g|100g
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
本品是一种还原蛋白质S-S键的试剂;生化研究用作巯基保护剂;酶的专一性抑制剂;测定酶活力。SDS-PAGE上样缓冲液的配制等。
别名：DTT
CAS号：3483-12-3
分子式：C4H10O2S2
分子量：154.25
纯度：≥97%(滴定)
性状：白色针状或白色颗粒、粉末
储存条件：2～8℃
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二硫苏糖醇北京厂家关键词：DTT,3483-12-3,二硫苏糖醇
·甜菜碱盐*(代"酸")盐
编号：QN0731
英文名称：Betaine hydrochloride
规格：100g|500g
本品为高效甲基供体，可取代*化胆碱，减少蛋*酸的使用。
CAS号：590-46-5
分子式：C5H11NO2·HCL
分子量：153.6
储存条件：室温
性状：白色单斜结晶
纯度：＞98.0%
·羊抗人C3
编号：QN0270
英文名称：Goat anti-Human C3
规格：0.1ml
储存条件：-20℃
·离析酶R-10
编号：QN0480
英文名称：Macerozyme R-10
规格：1g
本品常用于从叶肉细胞和培养的植物细胞中分离单个细胞。
别名：分离酶
CAS号：9032-75-1
储存条件：2～8℃
酶活：3000u/g
性状：白色或者带黄色粉
·DAB法显色试剂盒(兔IgG)
编号：QN1161
英文名称：Western Blotting Rabbit IgG DAB Chromogenic Reagent Kit
规格：1盒
本试剂盒主要用于western blotting的DAB显色，含有抗兔IgG酶标二抗。
SDS-PAGE电泳后，蛋白质按照分子量大小分离，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）后，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，以固相载体上的蛋白质或多肽作为抗原，与对应的抗体起免疫反应，再与酶标记的第二抗体起反应，经过底物显色以检测电泳分离的特异性的蛋白。
试剂盒组分：
封闭试剂————————————30g
10倍浓缩抗体稀释液———————50ml
酶标二抗————————————0.5ml，效价1:500～3000
20倍DAB浓缩显色液-———————5mlA+5mlB。
常规电泳转膜后:
1) 清洗转印膜：将膜剥离下后，作好标记，一般在左上角剪一缺口。室温用TBS-T 漂洗3 次每次5min,以尽量洗去转印膜上的SDS，防止影响后面的抗体结合。
2) 按5g 封闭试剂加100ml 双蒸水计，配制膜封闭液，配好的膜封闭液为乳白色悬液，将漂洗过的转印膜，封闭液内，摇床震动，室温封闭30min。用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
3) 将10×抗体稀释液用双蒸水稀释成1×（10ml 10×抗体稀释液加入90ml 双蒸水，混匀，可4℃保存三个月）。此稀释液可作为一抗和二抗的稀释液。
4) 用1×的抗体稀释液稀释抗体。根据用量以及一抗的推荐稀释浓度来稀释一抗。将杂交膜放入杂交袋中，加入一抗工作液，封口，4℃孵育过夜或37℃摇动孵育2h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。注：如果所加一抗不同，可在此步将膜沿电泳方向剪成条，分别作好标记，分开孵育。
5) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次5min。
6) 用稀释好的抗体稀释液稀释抗体。根据用量，按10ml 抗体稀释液加入10ul HRP 标记二抗的比例，配制二抗工作液。将杂交膜放入杂交袋中，加入二抗工作液，封口， 37℃摇动孵育1h。此用过的抗体一般可回收第二天再使用一次。
7) 用TBS-T ，PH7.6 洗液，室温漂洗3 次每次10min。
8) 配制DAB 显色：根据用量，取TBS-T 4ml，加入DAB 显色液A、DAB 显色液B 各200ul，混匀，加在膜正面，室温下显色。在目标条带显出后，而且背景未出时，放入水中终止显色。
注意事项：
1. 请根据一抗来源选择试剂盒。
2. western blotting DAB显色法操作简单，但其敏感性与ECL发光发有一定的差距，一般只适用于丰度较高的蛋白。
3. 可以根据显色结果来优化实验反应时间。如背景过深，可延长膜封闭时间，加长最终漂洗次数与时间。如果条带过弱，可延长抗体孵育时间。
4. 如果完全没有条带，请检查前期蛋白处理及实验过程， 如果确认无误，反复两次依旧无结果，请换用ECL发光法显色。
5. TBS-T（0.01M）配制方法：称取NaCl 8.5g ，Tris 1.21g ，用800ml 的双蒸水溶解，用盐*(代"酸")调PH 到7.6，再加入0.5ml Tween－20，用双蒸水加至1000ml，混匀即可。（也可按照自己的配制习惯来配制）
储存条件：-20℃避光，有效期一年。
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