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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 英文名:
AMJ2-C8
- 库存:
现货库存
- 供应商:
ATCC、DSMZ、ECACC、sciencell
- 肿瘤类型:
见细胞说明
- 细胞类型:
科研细胞
- 品系:
AMJ2-C8小鼠巨噬细胞
- 组织来源:
小鼠巨噬细胞
- 相关疾病:
请联系我们发送详细说明
- 物种来源:
小鼠
- 免疫类型:
见细胞资料
- 细胞形态:
请联系我们发送详细资料
- 是否是肿瘤细胞:
见细胞类型说明
- 器官来源:
小鼠巨噬细胞
- 运输方式:
常温或干冰冻存发货,空运快递
- 年限:
代数:三代内
- 生长状态:
悬浮
- 规格:
2X10^6 cells
| 细胞名称: | AMJ2-C8小鼠巨噬细胞 |
| 组织来源: | 巨噬细胞,C57BL/6J,小鼠巨噬细胞 |
| 培养基: | 89%1640+10%FBS+1%双抗 |
华拓生物科技有限公司(www.otwobiotech.com)
AMJ2-C8细胞产品介绍:
发货方式:
复苏后发货:我们复苏细胞后发货,货期一周左右,免运费。(气温较好建议复苏后发货)
冻存发货(干冰运输):需额外增加干冰运费,选择干冰运输的我们发两管细胞,为了保证客户接种可靠性多发一管。(气温低于0℃须冻存发货)
细胞发货采取专业的运输包装,并选择最快捷的运输方式(顺丰速运或其他空运快递)
本公司细胞引种来源:ATCC、DSMZ、ECACC、武大细胞库、上海生化细胞所、中国科学院典型培养物保藏委员会等
细胞处理方法:
一、贴壁细胞
1、 接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。
2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。
3、严格遵循无菌操作规范,打开细胞培养瓶。
4、37度平衡1-2小时。
5、用移液管吸取培养基,到50ml离心管中,剩下细胞密度达到80%至90%可以传代,如没有达到添加6ml新鲜培养基继续培养。
6、如果肉眼检查上清有细胞,对50ml上清进行离心收集细胞,如果细胞连片状态,弃掉上清对收集的细胞进行胰酶消化(1ml胰酶37度),接种培养。
二、悬浮细胞
1、接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞 100X,200X 各一张)。
2、用 75%的酒精消毒外包装,在超净工作台内打开外包装。
3、严格遵循无菌操作规范,打开细胞培养瓶。
4、细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒)。
5、1000rpm,5min 离心,用吸管小心吸出上清,加入培养基,重悬细胞。
6、将重悬好的细胞转入六孔板或者细胞培养瓶种,加入新鲜培养基,置于 37℃,5%CO2 培养(大部分细胞)。
AMJ2-C8细胞培养操作:华拓细胞培养操作指南
细胞常见问题分析:细胞培养常见问题分析
细胞在发货前进行质检:
1、细胞存种的活性检测
2、细菌、真菌、霉菌污染物镜检
3、衣原体、支原体检测(荧光法、培养法等)
产品质量保证及售后:
1、 细胞为三代以内,活体。运输过程中细胞出现污染和状态不好,我们完全免费重新发货。
2、 实验过程中若确定是客户问题,客户仅需支付物流和耗材费用,我们可重新发货。其他根据情况灵活处理。
3、 产品使用过程中,华拓生物可提供技术上的指导。
AMJ2-C8细胞培养常见注意事项:
1、收货时,如不能在收到细胞后及时操作处理细胞,T25及离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜,干冰发货的可以在确认干冰未完全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰完全升华,需即刻复苏细胞;T25瓶及离心管发货的细胞收货后在37度培养箱平衡两小时以上,再开始处理细胞,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
2、贴壁细胞在消化时,因为每个客户用的胰酶活力及消化步骤、试剂都是不一样,不能完全规定消化时间,以科研人员经验为准。 对于消化这步,如果对该细胞经验不多,无法准确掌控胰酶作用时间,建议可以按照下述操作:胰酶首先复温到室温后加入细胞,然后每隔30秒,即吹打下细胞,如果能够吹打散细胞,加入完全培养基终止消化,把细胞打散后,离心去除胰酶加新的培养基重悬细胞接种 ,如果30秒吹打不下,再等30秒重复操作。注意消化时间,不要过度,细胞变圆可以吹下来即可终止。
3、传代比例建议1:2-1:3,长得比较快的细胞可以1:3,比较慢的按1:2传代;传代后,建议不要使用传代前培养所使用的培养基,会有大量细胞碎片甚至导致细胞死亡的风险;细胞状态不好或者生长比较慢时,可以通过增加血清浓度调整细胞状态及生长速度;细胞碎片较多、背景较脏时,贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心(900rpm,3min)能有效改善;建议不要随意更换培养基,因实验需要,可以逐步驯化,也可以联系咨询我们。
4、AMJ2-C8细胞冻存时,部分长得比较慢的细胞,冻存的细胞密度要稍微大点,以防止复苏后生长困难;冻存液中含的DMSO请使用细胞级DMSO,同时浓度不要太高,部分细胞在10%DMSO条件下冻存会死亡,所以DMSO浓度5%-8%是比较推荐的浓度;冻存时建议设置冻存检测,即取0.2-0.3mL的冻存液重悬的细胞于一个冻存管中,与正常体积冻存的细胞共同冻存,至液氮后复苏检查冻存结果,冻检合格前,留一部分细胞继续培养,以防万一;细胞冻存及复苏遵循慢冻快融的原则,即冻存时温度不能急剧下降,应控制温度缓慢下降,复苏时应快速融化,融化后尽快加入培养基中。
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文献和实验最近做了很多小鼠腹腔巨噬细胞, 有如下几个问题需要和大家讨论,望经验丰富的同志指点一二。 1. 关于是否注射淀粉肉汤或是别的刺激物, 是不是注射后有两大特点:第一,得到的细胞更多, 第二,得到的细胞都是炎性巨噬细胞, 而未注射则是非炎性细胞? 我做了十来次, 有时注射有时不注射(淀粉肉汤), 注射后细胞确实多一些。 至于炎性与非炎性,有待指教。 2. 关于分离的巨噬细胞的纯度问题。 我这里碰上一个严重的问题就是成纤维细胞的污染。 一开始纯化完铺板, 基本上看不到
目的要求 1.了解小鼠腹腔巨噬细胞吞噬现象的原理 2.熟悉细胞吞噬作用的基本过程 基本原理 细胞的吞噬作用在单细胞动物是摄取营养物质的方式,在高等动物内的巨噬细胞、单核细胞和中性粒细胞等具有吞噬功能,是机体非特异性免疫功能的重要组成部分。巨噬细胞是由骨髓干细胞分化生成,当病原微生物或其他异物侵入机体时,巨噬细胞由于具有趋化性,便向异物处聚集,巨噬细胞可将之内吞入胞质,形成吞噬泡,然后在胞内与溶酶体融合
RAW264.7因是单核巨噬细胞其生物学特性就是贴壁特别牢,普通的方法根本就不可能将它消化下来,这也是养这种细胞最头痛的问题。现将我的一点心得,简介如下:消化液:0.5%胰酶、0.2%EDTA,实验前加温到37度以50ml培养瓶为例:1、细胞贴壁生长,长满瓶底80%时,弃去培养液,加D-HANKS 漂洗 两次;2、 加入含胰酶和EDTA的消化液1-2ml,消化37℃约2-5min,镜下可见细胞基本圆形回缩即中止消化,弃消化液加D-HANKS 漂洗两次;3、加入新培养液10ml复吹打混悬细胞
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