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20
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上海康朗生物科技有限公司
- 规格:
瓶
4%兔红细胞用于红细胞间接凝集实验、补体结合实验、T淋巴细胞E花环实验、制作致敏细胞、免疫注射抗原、制作血平板等实验。
来源:兔
浓度:4%(可订做其它浓度)
成分:红细胞
外观:红色悬液
保存:于4-8℃保存期3-4周
产品规格:100ml/瓶 (如需其它包装请与销售联系!)
用途:科研教学实验用、非临床使用
4%兔红细胞制备方法:
1、准备好试验所需的所有材料,包括离心管、低速离心机、试管架、PBS缓冲液(生理盐水)、注射器、100ml大青瓶及塞子等等。
2、抗凝血第一次离心。用注射器采集若干毫升抗凝鸡(鸭)血,根据需要确定。将抗凝血缓慢注入离心管内,盖好盖子后将离心管放入离心机,配平后1500r/min离心5min,离出抗凝剂及血浆等。
3、第一次离心结束后,将上层液体及白细胞层用注射器吸出,加入适量PBS缓冲液,配平后进行第二次离心,1500r/min离心5min,进一步清洗红细胞。
4、第二次离心结束后,同样吸出上层液体及白细胞层,再加入适量PBS缓冲液,配平后进行第三次离心,2000r/min离心10min,进一步清洗红细胞。
5、离心结束,最后一次吸出上层清液。量取99mlPBS缓冲液加入100ml大青瓶(或其他容器),用注射器(或其他,如吸管)吸取1ml洗净的红细胞,缓慢加入99mlPBS缓冲液中,塞紧瓶塞。
6、4%红细胞制备好后,一般置于4℃冰箱保存,用时充分混匀即可。
4%兔红细胞使用时常见问题及解决方法:
一、如何解冻血清才不会使产品质量受损?
将血清从冷冻箱取出后,先置于2-8℃冰箱使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均匀。
二、如何避免沉淀物的产生?
1.解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-2O℃至4℃至室温),若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。
2.解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生
3.请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。
4.血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
5.若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
4%兔红细胞相关红细胞列表:4%鸡红细胞 100ml/瓶
6%鸡红细胞 100ml/瓶
4%兔红细胞 100ml/瓶
6%兔红细胞 100ml/瓶
4%绵羊红细胞 100ml/瓶
6%绵羊红细胞 100ml/瓶
4%牛红细胞 100ml/瓶
6%牛红细胞 100ml/瓶
4%猪红细胞 100ml/瓶
6%猪红细胞 100ml/瓶
4%猫红细胞 100ml/瓶
6%猫红细胞 100ml/瓶
2%豚鼠红细胞 100ml/瓶
4%豚鼠红细胞 100ml/瓶
6%豚鼠红细胞 100ml/瓶
2%鸭红细胞 100ml/瓶
4%鸭红细胞 100ml/瓶
6%鸭红细胞 100ml/瓶
2%小鼠红细胞 100ml/瓶
4%小鼠红细胞 100ml/瓶
6%小鼠红细胞 100ml/瓶
4%乌鸡红细胞 100ml/瓶
6%乌鸡红细胞 100ml/瓶
2%鸽子红细胞 100ml/瓶
4%鸽子红细胞 100ml/瓶
1%鲤鱼红细胞 100ml/瓶
2%鲤鱼红细胞 100ml/瓶
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文献和实验1、原理兔红细胞不经致敏可激活人补体旁路途径,导致兔红细胞溶解。在反应系统中加入乙二醇双氨基四乙酸(ethyleneglycol-bis-aminotetracetate,EGTA)可和血浆Ca2+螯合,EGTA与Mg2+结合能力很弱,故经典途径被封闭。根据兔红细胞的溶血程度,可测定补体旁路途径的总补体活性。2、所需主要试剂(1)兔红细胞(rabbitredbloodcell,RRBC)悬液的制备 无菌采兔耳静脉或心脏血,用阿氏液抗凝,分装,4℃保存。可用1周左右。试验时取一定量的RRBC
玫瑰花环试验,又称为花结试验。是测定淋巴细胞数量和功能的一种方法。 人类T和B淋巴细胞表面具有不同的受体。由于人类T淋巴细胞表面具有与绵羊红细胞结合的受体,能与绵羊红细胞非特异性结合,形成E花环,因此,T细胞也成为红细胞花瓣形成细胞。根据E—玫瑰花环形成率,可以间接判断机体细胞免疫力。目前,已广泛应用于临床,作为测定人群免疫状态的一个指标。 材料: 1.肝素(100单位/毫升) 2.0.5%兔红细胞
的血清最小用量。以CH50单位/ml表示。 2、补体旁路途径活性测定 用于人和动物血清补体旁路途径活性的测定,其依据是未致敏的家兔红细胞可以激活B因子,引起补体旁路途径活化,导致兔红细胞溶解。此法是将一定浓度和容积的新鲜家兔红细胞悬液与不同量的待检血清混合,作用一定时间后观察溶血反应。根据引起50%溶血所需的最小补体量,计算出待检血清补体旁路途径的活性,以ACH50单位/ml表示。 3、补体组分测定 目前
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