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上海恪敏生物科技有限公司
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文献和实验实验步骤 1. 清洗器具用品:清洗所有的干胶条套件,包括胶条槽、盖片、托盘等。用Ettan IPGphor胶条槽清洗剂(Amersham Biosciences.),并用大量去离子水冲洗,自然干燥备用。 2. 第一向等电聚焦电泳 1) 加样和IPG干胶条再水化:采用样品加在再水化液中方法进行加样。24cm IPG胶条(PH3 -10Non-line )。银染蛋白质上样量为40ug-50ug。根据上样量计算出样品
A protocol for cleaning and reusing the large 25 x 25 cm plates
We regularly reuse our large 25x25 cm plating trays; initially, however, we were plagued by gross microbiological contamination when reusing the trays. Various combinations of cleaning with a laboratory dishwasher, ethyl alcohol, and UV
电泳缓冲液4μl,甲醛 3.5μl,甲酰胺10μl,加入无菌离心管中混合,95℃水浴变性2min(或55℃,15min),取出后放入冰中冷却。2) 加入2μl无菌的DEPC处理的加样运载液。(使用加样运载液的目的有三: 增大样品密度, 以确保DNA均匀进入样品孔内; 使样品呈现颜色, 便于加样操作; 能明确显现样品在电泳胶上的泳动位置. 以 0.5 X TBE作电泳液时, 溴苯酚在琼脂糖中的泳动速率与长 300 bp 的双链线状DNA相同 , 而二甲苯氰FF 的泳动速率与长 4kb 的双链线状DNA相同
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