DAB染色增强剂

案例分析： DAB染色后切片着色呈阴性结果

背景： 其实免疫组化在DAB染色后一般有四种情况：阳性染色效果很好、阴性染色、非特异性染色很深、阴阳脸（染色不均匀）。而阴性染色是许多初学者经常遇到的头疼问题。我身边有个研究生同学在我们实验室初次涉入免疫组化，听说步骤不难，跟我后面做了几次之后，就自己开始做了，连续做了三次，结果均是阴性染色。很扫兴，不知是什么原因导致的。 问题及其解答：免疫组化染色呈阴性结果的原因有哪些？ 1、抗体浓度和质量问题以及抗体来源选择错误。不知抗体是进口的还是国产的工作液，怎么这么高

案例分析： DAB染色后切片着色一片黄/背景深

来源的动物免疫血清封闭时间和适当增加浓度来加强封闭效果； 5、 DAB孵育时间过长或浓度过高； 6、 PBS冲洗不充分，残留抗体结果增强着色，在一抗/二抗/SP孵育后的浸洗尤为重要； 7、 标本染色过程中经常出现干片，这容易增强非特异性着色。 我的实际解决方案： 以上的分析可能对于初学者还是不容易的，下面我就把我的排除实验的具体过程与大家进行分享、交流和讨论。 1、首先排除抗体孵育条件。一般来说，着色效果的好坏与抗体的孵育条件是密不可分的，由于用SP法已经做出来过一次且效果不错

特染： 结缔组织染色

一、Mallory三色染色法 1. 试剂配制 （1）重铬酸钾液 重铬酸钾2.5g，醋酸5ml，蒸馏水95ml （2）苯胺蓝桔黄G液 苯胺蓝0.5g，桔黄G2g，磷钨酸1g，蒸馏水100ml （3）酸性复红液 酸性复红0.5g，蒸馏水100ml 2.染色步骤 （1）中性甲醛液固定组织，石蜡切片，常规脱蜡至水。 （2）重铬酸钾液10min。 （3）蒸馏水冲洗2min，蒸馏水2次。 （4）酸性复红液2min，蒸馏稍洗。 （5）苯胺蓝液20min，95