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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
冷藏
- 保质期:
长期
- 英文名:
PVDF Membrane(0.22μM)
- 库存:
304
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博供应的PVDF膜(0.22μM)现货价格用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多PVDF膜(0.22μM)等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:PVDF膜(0.22μM)现货价格
规格:1 sheet
品牌:百奥莱博
英文名:PVDF Membrane(0.22μM)
产地:国产|进口
编号:WE0300
欲咨询购买PVDF膜(0.22μM)现货价格,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·His标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白)
编号:WE0267
英文名称:His-Tagged Protein Purification Kit(Soluble Protein)
规格:5ml
本试剂盒包含Ni-Agarose填料、亲和柱空柱以及可溶性His融合蛋白纯化所需的全部试剂(细菌裂解液、蛋白酶抑制剂混合物、结合缓冲液和洗脱缓冲液组分),使用方便。该镍柱纯化系统对6×His-tag蛋白具有显著特异吸附能力,能够高效一步纯化带有6个组*酸亲和标签的蛋白。该系统具有4个Ni2+螯合位点,较只有3个螯合位点的Ni-IDA结合Ni2+更为牢固,有效防止纯化过程中Ni2+脱落且增强对His标签蛋白的结合能力,提高纯化效率。较高的基团密度,大大提高了蛋白载量。该系统在天然或变性条件下,对来源于各种表达系统(如杆状病毒,哺乳细胞,酵母以及细菌)中的His标签蛋白,均有很好的纯化效果。本产品已螯合镍离子,可直接用可溶性蛋白的纯化,使用方便,快捷。
镍柱参数:
支持物:CL-6B琼脂糖凝胶
载量:20-30 mg His标签蛋白/ml填料
粒径:50-160μM
试剂盒组成:
| 组份 | 5ml |
| Ni-Agarose Resin | 5ml |
| Bacterial Protein Extraction Reagent | 65ml |
| 1 M Tris-HCl(pH7.9) | 15ml |
| 1 M Imidazole | 65ml |
| 3 M NaCl | 120ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 700μl |
| 吸附柱(12ml) | 一套 |
保存条件:Protease Inhibitor Cocktail,-20℃;Ni-Agarose Resin,2~8℃,避免冷冻;其它组分,2~8℃
注意事项:
1、在纯化之前采用电泳检测蛋白的可溶性,本试剂盒只适合于可溶性蛋白的纯化,如需纯化包涵体蛋白,请选择我公司的包涵体蛋白纯化试剂盒,货号为WE0266。
2、缓冲液中不建议使用 β-巯基乙醇、DTT和EDTA。
3、整个纯化过程中切忌凝胶脱水变干。
4、为提高纯化效率,首先确定Binding Buffer和Elution Buffer中咪唑的最佳使用浓度。必要时可以使用线性或梯度浓度的咪唑浓度,Binding Buffer的范围为0-10 mM,洗脱缓冲液的范围为10-500 mM来进行。并通过SDS-PAGE或Western Blotting来检测目的蛋白的纯度。
5、请使用高纯度的试剂配制缓冲液,并通过0.22μM或者0.45μM过滤器过滤。为避免柱子被堵塞,建议将裂解液进行离心,或者使用0.22μM或者0.45μM过滤器过滤。
6、柱再生时,保证每步洗完后都要用足够的去离子水冲洗至中性。
使用方法:
I 缓冲液的准备
可溶性蛋白纯化缓冲液配方:
| 组份 | Tris-HCl(pH7.9) | Imidazole | NaCl |
| Soluble Binding Buffer | 20 mM | 10 mM | 0.5 M |
| Soluble Elution Buffer | 20 mM | 500 mM | 0.5 M |
II 组装层析柱
1、将Ni-Agarose Resin填料混匀后加入层析柱,室温静置10分钟,待凝胶与溶液分层后,把底部的出液口打开,让乙醇通过重力作用缓慢流出。
注意:
1)填料的上层是乙醇保护层,将填料和乙醇一起混匀,以每ml填料纯化20-30mg His标签蛋白计算,取需要的填料与乙醇的混合液加入层析柱。
2)如果乙醇不流出,可以给柱子一个外力,例如用大拇指对柱口轻轻按压一下,迫使乙醇流出。
3)本实验都是通过重力作用使溶液流出。
2、向装填好的柱中加入5倍柱体积的去离子水将乙醇冲洗干净后,再用10倍柱体积的Binding Buffer平衡柱子,平衡结束后即可上样。
注意:柱体积指的是填料的体积。
III 可溶性蛋白的纯化
1、收集菌体后,每100 mg菌体(湿重)加入1-5ml细菌裂解液(每1ml 细菌抽提试剂中已加入10μl 蛋白酶抑制剂混合物),超声裂解菌体。
注意:
1)当提取物粘度高或提取蛋白为包涵体时,建议加入DNase I和Lysozyme。每1ml 细菌抽提试剂中加入1μl DNase I(1000U/ml),2μl Lysozyme(50 mg/ml),DNase I和Lysozyme可单独从我公司购买,货号:Lysozyme(#WE0214)、 DNase I(#WE0213A),如使用其它公司产品,请按照相应说明书操作。
2)超声过程中保持菌液处于冰浴中,超声条件依赖于所使用的超声仪功率,探头种类,容器的大小形状,需实验中自己摸索,应避免连续超声导致的大量产热,可分成短时间,多次超声,通过一定的间隔时间避免溶液过热。最终菌液变清即可。
2、10000 rpm,4℃离心3分钟,收集上清中的可溶性蛋白。
3、用Binding Buffer将菌体裂解液等倍稀释后负载上柱,流速为10倍柱体积/小时,收集流穿液。
注意:
1)本试剂盒中附带有一块筛板,使用时先将筛板加至填料的上层,该筛板可用于杂质较多的蛋白的过滤,防止过多的杂蛋白堵塞柱子的作用。再将处理好的样品负载上柱,但是筛板放入柱子后就不易取出。
2)通过控制加入的菌体裂解液的速度来控制流速。
4、使用15倍柱体积的Soluble Binding Buffer冲洗柱子,洗去杂蛋白。
5、使用适量Soluble Elution Buffer洗脱,收集洗脱峰。
注意:洗脱峰可以分管收集,每1ml收集1管,并采用蛋白监测仪监测,收集洗脱峰。
6、洗脱后,依次使用10倍柱体积的去离子水洗涤柱子,再用3倍柱体积的20%乙醇平衡(乙醇要将填料浸没),封柱后2~8℃保存。
注意:如果是分段梯度洗脱,最大洗脱缓冲液中咪唑浓度未达到500 mM时,则使用浓度为500 mM的咪唑进行洗脱10倍柱体积后,再进行第6步的操作。
Ⅳ 柱再生
当填料使用多次后,结合效率会有所下降(表现为流速变慢或填料失去蓝绿色),可以用以下方法再生,提高填料的使用寿命和蛋白质的结合效率。
1、使用2倍柱体积的6 M盐*(代"酸")胍冲洗后,使用3倍柱体积的去离子水冲洗。
2、使用1倍柱体积的2% SDS冲洗。
3、依次使用1倍柱体积的25%、50%、75%和5倍柱体积的100%乙醇冲洗,再依次使用1倍柱体积的75%、50%和25%的乙醇冲洗。
4、使用1倍柱体积的去离子水冲洗。
5、使用5倍柱体积含50 mM EDTA缓冲液(PH8.0)冲洗。
6、使用3倍柱体积去离子水,3倍柱体积20%乙醇冲洗。
7、2~8℃保存。
8、再次使用前,需首先使用10倍柱体积去离子水冲洗,然后使用5个柱体积的50 mM NiSO4再生,3个柱体积的Binding Buffer平衡。
储存条件:-20℃
PVDF膜(0.22μM)现货价格关键词:PVDF膜(0.22μM),WE0300,PVDF Membrane(0.22μM)
·二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer1-12)
编号:WE0241
英文名称:NGS Multiplex Oligos for Illumina(Index Primers Set I)
规格:24次|96次
本试剂盒提供了二代测序建库中使用的adaptor与primer,专为illumina平台建库设计,index primer的设计可满足多重高通量测序时制备多个文库样本的需要,制备的文库可用于Illumina GAIIx,HiSacnSQ、HiSeq 2500/2000/1000和MiSeq sequencing等测序平台的测序。
试剂盒组成:
| 组份 | 24次 | 96次 |
| Adaptor for Illumina | 60μl | 240μl |
| Universal Primer for Illumina | 30μl | 120μl |
| Index 1– 12 Primers for Illumina | 12×10 μ l | 12×20 μ l |
自备仪器、试剂和耗材:
1、磁力架:建议使用DynaMagTM-2(货号: 12321D)。
2、DNA纯化回收试剂盒:建议使用百奥莱博磁珠法DNA纯化回收试剂盒(货号: WE0205)。
3、DNA建库试剂盒:建议使用百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(货号: WE0229)。
4、无水乙醇。
5、反应管:建议使用低吸附的PCR管与1.5ml离心管;枪头:建议使用高质量过滤枪头防止试剂盒、文库样本污染。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、Adaptor为双链结构,请勿将其置于室温温度以上,以免发生解链、影响使用。
2、Index primer开盖前请短暂离心,使液体收集到管底,以免不同引物间交叉污染。
使用流程

操作步骤:
百奥莱博二代测序多样本接头引物试剂盒使用方法请按照百奥莱博二代测序快速DNA建库试剂盒(Cat .No.WE0229)protocol进行。
Adaptor for Illumina:
5´-/5Phos/ GATCGGAAGAGCACACGTCTGAACTCCAGT*C -3´
5´-ACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T-3´
Universal Primer for Illumina:
5-AATGATACGGCGACCACCGAGATCTACACTCTTTCCCTACACGACGCTCTTCCGATC*T -3´
Index 1–12 Primers for Illumina:
| Index Primers for Illumina | Index | |
| Index 1 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCGTGATGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ATCACG |
| Index 2 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATACATCGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CGATGT |
| Index 3 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGCCTAAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
TTAGGC |
| Index 4 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTGGTCAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
TGACCA |
| Index 5 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCACTGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ACAGTG |
| Index 6 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATATTGGCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GCCAAT |
| Index 7 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGATCTGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CAGATC |
| Index 8 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTCAAGTGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
ACTTGA |
| Index 9 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATCTGATCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GATCAG |
| Index 10 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATAAGCTAGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
TAGCTT |
| Index 11 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATGTAGCCGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
GGCTAC |
| Index 12 Primerfor Illumina | 5-CAAGCAGAAGACGGCATACGAGATTACAAGGTGA CTGGAGTTCAGACGTGTGCTCTTCCGATC-s-T-3´ |
CTTGTA |
储存条件:-20℃
PVDF膜(0.22μM)现货价格关键词:PVDF膜(0.22μM),WE0300,PVDF Membrane(0.22μM)
DL-*丙*酸 Bis-pyrazolone 150-30-1
9041-37-6 Sephadex LH-20 (葡聚糖凝胶LH-20)
ARB13963 猪透明质酸(HA)elisa测定使用说明书 Porcine hyaluronic acid,ha ELISA KIT
ARB11992 大鼠NPC1L1 尿液中含量检测
DP341 磁珠法动物组织基因组DNA提取试剂盒
BTN131122 考马斯亮蓝R-250 Coomassie Blue R-250
曙红Y(水溶) CAMP,Na 17372-87-1
2,6-二*靛酚 TMPD 956-48-9
γ-*基丁酸 HVA 56-12-2
BTN130653 GpC 甲基转移酶(M.CviPI) GpC Methyltranferase(M.CviPI)
CYB168008 标准小牛血清 100ml/瓶
ARB10942 人低密度脂蛋白受体相关蛋白6(LRP-6)elisa检测说明书 Human low-density lipoprotein-receptor-related protein,lrp-6 ELISA KIT
ARB12650 大鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)尿液中含量检测 Rat eosinophil cationic protein,ecp ELISA KIT
L-赖*酸甲酯盐*(代"酸")盐 DDD 26348-70-9
BL0279 胰蛋白酶-EDTA含酚红
熬和树脂 xylo-oligosaccharides
我公司强烈推荐蛋白质研究系列产品,热情期待您的咨询选购PVDF膜(0.22μM)现货价格。
风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
文献和实验。但不适合荧光。PVDF膜特别注意的是需要100%甲醇预处理(不超过15秒)再用缓冲液平衡,才能用,而且适用过程中万一干了也要同样程序再处理(不过要真出现这种问题也是自己欠扁,谁要你不小心呢,转膜前处理也就罢了,转膜后再这样处理可能会影响后继的抗体识别呢)。PVDF膜同样分0.45um和0.2um的,后者孔径小,对小分子蛋白有较好的拦截吸附,背景可能会比前者稍高。 pvdf膜生产商: MILLIPORE 特价 常年 现货 IPVH00010 0.45
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