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- 百奥莱博
- 北京
- WE0258-GIE
- 2025年07月07日
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2～8℃
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长期
- 英文名：
RIPA Lysis Buffer(Strong)
- 库存：
332
- 供应商：
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产供应北京现货RIPA裂解液(强)优惠价，我公司销*(代"售")全品类的分子生物学试剂，价格优惠，欢迎广大科研工作者垂询订购。
北京百奥莱博科技有限公司专业生产供应北京现货RIPA裂解液(强)优惠价，产品信息：
类别：蛋白质研究
英文名：RIPA Lysis Buffer(Strong)
| 产品名 | 产品编号 | 包装规格 |
| RIPA裂解液(强) | WE0258 | 100ml |
英文名：RIPA Lysis Buffer(Strong)
产地：国产|进口
编号：WE0258
规格：100ml
品牌：百奥莱博
RIPA裂解液是一种传统的组织以及细胞快速裂解液，主要用于从动物组织和哺乳动物细胞中抽取可溶性蛋白，可用于裂解贴壁细胞和悬浮细胞。按照其裂解液的强度可以分为强、中、弱三类，具体特点和差异请参考附表2，可根据实验需求选择相应产品。RIPA裂解液(强)可以有效提取细胞核、细胞膜和胞浆蛋白，提取的蛋白可应用于蛋白定量、Western Blot、IP等检测分析。
RIPA裂解液(强)的主要成分为50mM Tris(pH 7.4)，150mM NaCl，1%Triton X-100，1% sodiu*(代"m") deoxycholate，0.1% SDS以及sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等。
注意事项：
1、为防止蛋白降解，所有的操作尽量在冰上进行。
2、使用RIPA裂解液得到的蛋白样品，可采用BCA法进行蛋白定量，以测定蛋白浓度。产品可单独向本公司订购，如：WE0276 BCA蛋白定量试剂盒。本品含有高浓度的去垢剂，不能用Bradford法进行蛋白定量。
3、建议在使用RIPA裂解液前，向溶液中加入蛋白酶抑制剂或磷酸酶抑制剂，以防止蛋白降解，或保持蛋白的磷酸化状态。产品可单独向本公司订购，如：WE0259 蛋白酶抑制剂混合物，WE0256 磷酸酶抑制剂混合物。
4、若需获得更高浓度的蛋白，应减少哺乳动物蛋白抽提试剂的使用量。
5、对于培养瓶中的贴壁细胞，推荐先使用常规方法消化细胞，再参考悬浮细胞蛋白提取步骤操作。
6、对于离心获得的细胞，若不确定细胞体积，可根据细胞数量计算RIPA裂解液的使用量。如5×106个Hela细胞约需加入500μl RIPA裂解液，以此类推。
使用方法：
一、细胞样品
贴壁细胞蛋白抽提
1、小心倾去贴壁细胞的培养液。
2、可选步骤：若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质，请先使用预冷的PBS漂洗细胞。
3．加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶抑制剂)，试剂使用量请参考附表1，在冰上用枪头吹打贴壁细胞。
表1 贴壁细胞RIPA 裂解液使用量推荐表
| 细胞培养板类型或培养面积 | RIPA 裂解液使用量 |
| 100 mm | 500-1000μl |
| 60 mm | 250-500μl |
| 6孔培养板 | 200-400μl /孔 |
| 24孔培养板 | 100-200μl /孔 |
| 96孔培养板 | 50-100μl /孔 |
4、将裂解液转移至新的离心管中，冰上孵育20分钟，使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中，进行下一步分析。
悬浮细胞蛋白提取
1、悬浮细胞，2,500×g离心5分钟，弃去上清。
2、可选步骤：若培养基中含有酚红或其他可能影响实验结果的物质，请使用PBS漂洗细胞。漂洗后的细胞悬浮液2,500×g离心5分钟，弃去上清。
3、加入适量RIPA Lysis Buffer(Strong)(使用前2-3分钟内加入蛋白酶抑制剂)，每5×106细胞加入约200-500μl RIPA Lysis Buffer(Strong)，吹打均匀。
4、冰上放置20分钟，使细胞充分裂解。
5、14000×g离心10分钟。转移上清液至新管中，进行下一步分析。
二、组织样品
1、取适当的RIPA Lysis Buffer(Strong)，在使用前2-3分钟内加入蛋白酶抑制剂。
2、称量实验组织的重量，按照1:10(g/ml)的比例加入RIPA Lysis Buffer(Strong)后将组织剪成细小碎片，用电动匀浆器匀浆处理。若需要浓缩的蛋白提取物，可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
3、冰上孵育20分钟，使细胞充分裂解。
4、14000×g 离心10分钟。转移上清液至新管中，进行下一步分析。
注：RIPA裂解液的裂解产物中可能会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为基因组。
表2 蛋白裂解液性能、参数比较
| 目录号 | WE0258 | WE0257 | ||
| 名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) | SDS裂解液 |
| 裂解强度 | 强 | 中 | 温和 | 强 |
| 有效裂解成分 | 1%Triton X-100， 1%脱氧胆酸*, 0.1% SDS |
1% NP-40， 0.5%脱氧胆酸* , 0.1% SDS |
1% NP-40， 0.25%脱氧胆酸* |
1%SDS |
| 膜蛋白提取 | 很好 | 较好 | 一般 | 很好 |
| 胞浆蛋白提取 | 很好 | 很好 | 很好 | 很好 |
| 核蛋白提取 | 很好 | 较好 | 较好 | 很好 |
| 主要用途 | WB，IP | WB，IP | WB，IP，CO-IP | WB，CHIP |
储存条件：2～8℃
北京现货RIPA裂解液(强)优惠价专业优质供应商：北京百奥莱博科技有限公司
关键词：RIPA裂解液(强),RIPA Lysis Buffer(Strong),WE0258
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| 编号 | 类别 | 名称 |
| WE0159 | 核酸扩增(PCR) | dNTP混合溶液(10 mM) |
| WE0292 | 蛋白质研究 | Western中分子量蛋白Marker |
| WE0281 | 蛋白质研究 | 蛋白银染试剂盒 |
| WE0196 | RNA纯化 | 固定组织RNA提取试剂盒 |
| WE0396 | DNA纯化 | 游离DNA样本保存管(5ml) |
| WE0129 | 核酸扩增(PCR) | 一步法RT-PCR试剂盒 |
| WE0106 | 核酸扩增(PCR) | 2×BAmp MasterMix(含染料) |
| WE0219 | 其他分子生物学试剂 | IPTG溶液(50mg/ml) |
| WE0210 | 核酸电泳和回收 | UltraStain核酸染料 |
| WE0278 | 蛋白质研究 | 蛋白快速染色液 |
| WE0136 | 核酸扩增(PCR) | SuperSYBR Mixture(不含ROX校正染料) |
| WE0316 | 蛋白质研究 | 通用型免疫组化试剂盒(鼠兔源一抗) |
| WE0268 | 蛋白质研究 | Protein A+G琼脂糖凝胶 |
| WE0330 | 免疫检测 | 抗His标签抗体琼脂糖介质 |
| WE0328 | 细胞凋亡与增殖 | Annexin V-PE/7-AAD凋亡流式检测试剂盒 |
| WE0304 | 蛋白质研究 | 蛋白印迹膜再生液 |
| WE0359 | FITC标记抗体 | FITC标记兔抗人IgG(H+L) |
| WE0277 | 蛋白质研究 | SDS-PAGE快速电泳液 |
| WE0391 | 二抗 | AP标记山羊抗兔IgG(H+L) |
| WE0397 | DNA纯化 | 游离DNA样本保存管(5ml,PET) |
| WE0300 | 蛋白质研究 | PVDF膜(0.22μM) |
| WE0126 | 核酸扩增(PCR) | 防污染多重PCR MasterMix(含UNG酶) |
| WE0286 | 蛋白质研究 | SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×) |
| WE0123 | 核酸扩增(PCR) | 高效热启动DNA聚合酶 |
| WE0240 | 基因结构和功能 | 二代测序接头引物试剂盒(Illumina平台 Index Primer13-24) |
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文献和实验2，左条带为使用普通强裂解液提取的蛋白样品，右条带为柱式法提取的蛋白样品，可见使用柱式法法提取的样品胶孔中可明显改善样品滞留、拖带的情况发生。 图 2：同种样品分别使用裂解液法和柱式法进行 WB 样品制备，SDS-PAGE 电泳后考染图 图片来源：英文特 WB 蛋白样品制备过程中出现样品粘稠的情况并不代表样品提取失败，而是样品裂解较为充分的表现，但是如果放任不管则会引发一系列连锁效应，最终导致 WB 实验失败。选择合适的方法进行处理。成功获得高质量的蛋白样品，是 WB 实验成功必不可少
细胞凋亡是一种在基因控制下的细胞主动死亡过程，通常表现为核浓缩，起皱，膜发泡以及 DNA 片段化。WB 是研究细胞凋亡机理的基本方法之一，但是 WB 也不是谁都能做成功的，因为有可能你的第一步就做错了！用 WB 做细胞凋亡研究样品制备是第一步，样品制备方法至关重要否则会得到错误的结果和结论。样品制备，看你是不是这样做的：自配裂解液或者购买 RIPA，加上样品研磨啊研磨，孵育啊孵育，然后离心扔掉沉淀（RIPA 不可溶组分），取上清（RIPA 可溶组分）进行下游实验。对对对！都是这么做啊，扔
。大家目前最常用的方法是利用溶液法进行蛋白提取（如 RIPA 裂解液），但是往往会在蛋白质提取中产生两个不同的组分，即 RIPA 可溶性和 RIPA 不可溶性组分。通常 RIPA 不可溶性组分被我们直接丢弃忽略。但是已经有文章证实许多蛋白质存在于被丢弃的 RIPA 不可溶性组分中[1,2] 。也就是说利用溶液法提取的并非是完整的总蛋白，而仅仅是一些可溶性蛋白。那使用 RIPA 等溶液法提取的不完整总蛋白做实验，到底会不会影响我们磷酸化蛋白检测和定量研究呢？我们来一起讨论下。Brady 等人中
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