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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
- 库存:
688
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京G250蛋白快速染色试剂品牌是高品质的蛋白质研究产品,由北京百奥莱博供应,用于科研实验,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多G250蛋白快速染色试剂等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:北京G250蛋白快速染色试剂品牌
英文名:ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent
规格:250ml
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
该产品是以考马斯亮蓝G-250染料为基础,应用于SDS-PAGE凝胶的快速蛋白染色试剂。灵敏度高,最低可检测到20ng蛋白。染色过程简单,快速,无需孵育,染色后直接水洗,即可产生清晰背景。
注意事项:
1、若要获得最佳的脱色效果,可多次重复脱色步骤或在去离子水中脱色过夜。
2、将凝胶加入染色液后加热至沸腾,继续在脱色摇床上摇动5分钟,可增强染色效果。
3、本产品可重复使用2-3次,染色效果会随使用次数增加有所减弱。
4、本产品有轻微腐蚀性,请带手套操作。
操作步骤:
1、将电泳后的 PAGE 胶取出放入容器中,加入适量纯水(以充分覆盖PAGE 胶为宜),加热至沸腾后停止,弃去液体。
2、加入适量快速染色液(液面覆盖凝胶即可),加热至沸腾后停止,弃去染色液。
3、加入适量蒸馏水,加热至沸腾后停止,倾去蒸馏水,重复此步骤脱色至背景清晰。
实验图例
使用ShowProtein-G250蛋白快速染色试剂对SDS-PAGE染色后,不同浓度蛋白染色结果
储存条件:-20℃
欲咨询购买北京G250蛋白快速染色试剂品牌,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·HRP标记山羊抗兔IgG(H+L)
编号:WE0394
英文名称:Goat Anti-Rabbit IgG, HRP Conjugated
规格:100μl
本产品为辣根过氧化物酶标记的经亲和纯化的山羊抗体,特异识别兔IgG,检测灵敏度高,本底低,对其他种属IgG无明显交叉反应,可用于Western Blot、ELISA和免疫组化检测。HRP即辣根过氧化物酶,可以催化DAB、TMB等底物显色或催化ECL等化学发光试剂产生化学反应而发光。
免疫原:兔IgG
缓冲液:0.01M PBS,50%甘油,pH7.6
稳定剂:15 mg/ml BSA(不含IgG和蛋白酶)
防腐剂:无(叠氮*是HRP抑制剂,抗体稀释液中请避免使用叠氮*作为防腐剂)
应用范围:
WB(1:2000-10000)
ELISA(1:2000-20000)
IHC(1:100-200)
·Protein A琼脂糖凝胶
编号:WE0271
英文名称:Protein A-Agarose
规格:5ml
本产品可从血清,腹水,细胞培养上清和细胞抽提物中分离和纯化多种哺乳动物丌同亚型的抗体或包含抗体 Fc片段的基因工程重组蛋白。具有高IgG结合特异性,高流速,低Protein A-Agarose脱落等特点。
注意事项:
1、凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温后装柱,避免产生气泡影响柱效。
2、装柱时尽可能维持凝胶长径比为5:3-2:1,长径比过大将导致洗脱峰拖尾,洗脱体积增大;长径比过小将导致样品与填料接触时间短,吸附不充分,填料吸附蛋白量小。
3、若上样液中抗体浓度过高,应使用平衡缓冲液稀释至1-2 mg/ml,抗体浓度过高影响柱效。
4、可以采用降低上样时的流速来增加样品与填料接触时间从而提高纯化抗体量。
5、凝胶用低pH缓冲液洗脱时间应尽可能短,洗脱后用中性缓冲液尽快中和至pH中性,以延长亲和介质的使用寿命。
6、洗脱后,应立刻用如中和缓冲液将收集到的抗体溶液中和到中性(pH7.4左右),以利于维持抗体的生物活性,避免抗体失活。
7、填料使用后应用0.1 M柠檬酸*缓冲液(pH3.0)做再生处理,长期采用极端的洗脱条件将缩短亲和介质的使用寿命。
使用方法:
I 缓冲液的准备
1、平衡缓冲液:纯化不同动物和不同亚型抗体时所用平衡缓冲液是不同的,部分参照如下。
| 抗体 | 平衡缓冲液成分 |
| 人IgG1、人IgG2、小鼠IgG2a、小鼠IgG2b | 20 mM PBS,300 mM NaCl,pH7.4-8.5 |
| 人IgG3、人IgG4、小鼠IgG1、大鼠IgG3 | 50 mM Tris-Cl,3 M NaCl,pH7.8-8.5 |
2、洗脱缓冲液:0.1 M柠檬酸*缓冲液,pH4.0。
3、再生缓冲液:1 M NaCl。
4、中和缓冲液:1 M Tris-Cl,pH9.0。
注意:
1)以上缓冲液使用前均需0.45μM滤膜过滤。
2)为提高抗体和介质的吸附力。可适当提高平衡缓冲液中的盐浓度和ph值。
II 样本制备
1、样品用平衡缓冲液稀释5-10倍。
2、细胞培养液中大量的血清蛋白会对亲和层析造成一定的干扰,去血清处理或稀释样品将提高纯化抗体收率。
注意:样品在上柱前需0.45μM微孔滤膜过滤。
III 操作步骤
1、将Protein A-Agarose填料混匀后加入层析柱,室温静置10分钟,待凝胶与溶液分层后,把底部的出液口打开,让乙醇通过重力作用缓慢流出。
2、向装填后的柱中加入3-5个柱床体积的超纯水将乙醇冲洗干净,用平衡缓冲液流洗5-10个柱床体积平衡柱子。
3、将样品上柱,上样流速60 cm/h。
4、平衡缓冲液再洗5-10个柱床体积,直至基线平稳。
5、洗脱缓冲液洗脱,收集洗脱峰,用中和缓冲液将洗脱收集样品中和到中性。
6、立即用5-10个柱床体积平衡缓冲液平衡柱子到中性。
7、再生缓冲液流洗3-5个柱床体积。先后用纯水、20%乙醇分别流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
注意:收集洗脱峰时可以分阶段收集到多个管中,最后根据测定结果重新调整收集方式。
8、本产品使用10次以上后先用20%乙醇洗5个柱床体积,再用70%乙醇洗脱5-10个柱床体积,再用20%乙醇流洗3-5个柱床体积。柱子置于2~8℃保存。
储存条件:2~8℃,避免冷冻
北京G250蛋白快速染色试剂品牌关键词:G250蛋白快速染色试剂,ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent ,WE0290
·RNA酶抑制剂
编号:WE0223
英文名称:Rnasin
规格:30μl(1200U)
本品为从人胎盘中提取得到,分子量约50 KDa的广谱型RNase抑制剂。RNasin能够特异地与RNase以非共价键结合形成复合体从而使RNase失活,而不抑制RNase H、S1核酸酶、SP6、T7或T3 RNA 聚合酶、AMV或M-MLV反转录酶、Taq DNA聚合酶、RNaseT1等酶的活性,不影响后续的反转录及翻译过程。广泛的应用于RNA方面的研究,如RT-PCR,cDNA合成,mRNA的保护,体外转录和体外翻译,制备RNase-Free的抗体,原位杂交和mRNA定位等。
储存缓冲液:HEPES-KOH(pH7.6)20 mM, KCl 50 mM, DTT 8mM , Glycerol 50%。
活性定义:1个活性单位(U)指抑制50%5ng RNAse A中的苷2",3"-环磷酸发生水解所用的酶量。
主要用途:cDNA合成、体外翻译、体外转录、RNA 扩增、RNA纯化和储存。
纯度:
1、300 U的Rnasin和1μg的λ DNA-Hind Ⅲ分解物在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
2、300 U的 Rnasin 和1μg的超螺旋pBR322 DNA在37℃下反应1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
3、100 U的Rnasin 和1μg的16 S,23S rRNA在37℃下反应1小时,RNA的电泳谱带不发生变化。
4、SDS-PAGE:在分子量50 KDa处是单一带。
注意事项:
1、本产品避免反复冻融,长期储存请与-70℃存放。
2、建议使用终浓度为1 U/μl。
储存条件:-20℃
北京G250蛋白快速染色试剂品牌关键词:G250蛋白快速染色试剂,ShowProtein-G250 Protein Stain Reagent ,WE0290
67-68-5 DMSO二甲基亚砜(细胞培养级)
ARB14114 牛谷胱甘肽-过氧化物酶(GSH-PX)酶标法分析
BL1289 8%多聚甲醛
CYB168017 小鼠血清 100ml/瓶
PY02-378 检定培养基 250克
14306-25-3 Phytic acid sodiu*(代"m") salt hydrate 植酸*
ARB11356 人类似RIKEN cDNA 4931408D14 基因 Elisa方法检测 Human similar to riken cdna 4931408d14 gene ELISA KIT
甲基红 Fmoc-D-Leu-OH 493-52-7
D-半乳糖醛酸 TES 91510-62-2
ARB11629 人粒细胞趋化蛋白-2(GCP-2/CXCL6)含量检测 Human granulocyte chemotactic protein-2,gcp-2 ELISA KIT
F030501 FITC标记小鼠抗乙肝核心抗原抗体 Monoclonal Mouse Anti-HBcAg*FITC
ARB10576 人成骨生长肽(OGP)含量测试 Human osteogenic growth Peptide,ogp ELISA KIT
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文献和实验P0014A SDS-PAGE电泳液 1L 26.00元 P0015 SDS-PAGE蛋白上样缓冲液(5X) 2ml 26.00元 P0017 考马斯亮蓝快速染色液 250ml 136.00元 P0068 彩色预染蛋白质分子量标准 200微升 368.00元 三、转膜 膜,有硝酸纤维素膜和PVDF膜两种,推荐PVDF膜,做的多就买成卷的,大约2500左右一卷,30cm*3000cm,做得少就买一张一张的15cm*15cm大约80元一张。膜的孔径分22um和40多um的,孔径校,蛋白
烯酰胺的浓度和交联度,相对分子质量低于10 000的染色和脱色过程中未使用甲醇小分子肽即使用较高浓度的聚丙烯酰胺也不能完全分离。我们通过比较发现,采用分离胶0.165 T, 6 %C (含或不含脲) 的梯度胶电泳,即可把标准品的6 条带显示得非常清楚,上样量小,重复性好。固定、染,且在电泳后通过加热快速染色避免了凝胶的膨胀变形, 而且甲醇会使SDS-蛋白复合体中的SDS 游离出来而导致一些小分子多肽的扩散、丢失。在含SDS 缓冲液的样品中, 小分子多肽的浓缩是较困难的,因为小分子多肽SDS 形成的复合
:D-半乳糖(上海试剂二厂);盐酸苄胺(上海试剂厂);硫代巴比妥酸(TBA,美国Sigma公司);四乙二氧基丙烷(瑞士Fluka公司);L-羟脯氨酸(中科院上海生化所);DTNB(德国Feinbiochemica公司);超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒(南京建成生物科技公司);考马斯亮蓝G250(瑞士Fluka公司);其余试剂均为市售分析纯。 二、实验方法 1.动物分组、给药及处理 :动物随机分为
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