结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)怎么卖

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名称：结核分枝杆菌基因分型试剂盒(HV-3)怎么卖
产地：国产|进口
规格：50次
英文名：TB Typing Kit(HV-3)
品牌：百奥莱博
  本试剂盒是以分子流行病学最新研究进展为基础，经工艺优化后形成的人型结核分枝杆菌基因分型产品。本产品利用结核分枝杆菌基因组中可变数目串联重复序列(variable-number tandem repeats, VNTR)多态性进行基因型分型区分临床菌株，是研究结核分枝杆菌分子流行病学和监测结核病传播状况的有力工具。与现有其它基于VNTR原理的结核分枝杆菌VNTR分型系统相比，这一分型系统对中国流行的菌株具有更强的分辨能力 ，因此特别适合于中国用户的需求。

  通过对各PCR反应引物序列和预混反应液成份进行精心优化，使得本产品具有很强的抗干扰力。与用户自配试剂相比，本产品显著提升了特异条带信号强度，降低了使用粗制模板(煮沸菌液)时非特异条带的出现率，使实验操作更加简便、快捷的同时，提高了检测成功率。本产品的预混反应液化学稳定性良好，能有效抵抗反复冻融(10次)和较长时间(一周)的室温环境，更好地适应了用户检测工作中的灵活性需求。

  本试剂盒是TB基因分型试剂盒VNTR-9(货号WE0118)的配套产品。对VNTR-9试剂盒鉴定为成簇或相同菌株的样本，如有必要，可使用本产品做更精细的进一步分型鉴定。本产品中的3个高分辨率检测位点VNTR3820，VNTR4120和VNTR3232与VNTR-9中的9个检测位点结合使用可将检测的分辨率指数(Hunter-Gaston index，HGI)提升至0.993 。

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·IHC复染试剂(改良型苏木素)
编号：WE0322
英文名称：Improved-Hematoxylin
规格：10ml
  苏木精是一种碱性染料，它被氧化后生成氧化苏木精即苏木素后，可将细胞核和细胞内核糖体等嗜碱性结构染成蓝紫色，是常用的细胞核复染试剂。本产品是经改良的Mayer’s苏木素，不含酒精，可用于免疫组化DAB或AEC显色后的细胞核复染。其染色强度适中，一般不需要进行分化处理。复染后核着色鲜亮，背景清晰。

注意事项：
1、操作时应佩戴手套。
2、如核染色过深，可用1%盐*(代"酸")酒精分化适当液分化后，再用PBS或去离子水浸泡切 片3-5分钟，使胞核返蓝。
3、为得到最佳实验结果，请根据实验具体需求，调整试剂用量。

操作步骤：
1、免疫组化常规操作完成后，DAB或AEC显色(HRP系统)。
2、显色强度合适时，用自来水冲洗终止显色。
3、甩去样品上的自来水，滴加适量改良型苏木素以覆盖整个组织，复染30秒至3分钟。
4、用自来水完全冲洗掉复染液，PBS或去离子水浸泡切片3-5分钟，使胞核返蓝。
5、脱水、透明、封片。

实验图例：

乳腺癌 CK19 胞浆阳性使用DAB显示试剂盒(WE0323)显色，改良型苏木素(WE0322)复染，结果图

储存条件：室温


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L-丝*酸 Hypoxanthine 56-45-1
ZCXJ02 兔血浆 500ml
ARB11670 人维生素D3(VD3)elisa检测说明书 Human vitamin d3,vd3 ELISA KIT
PY02-173  汉克氏液  100克  
ARB12009 大鼠TH1细胞内细胞因子(TH1)血清中含量检测 
焦磷酸 (R)-(-)-1,2-Propanediol 2466-09-3
BL0313 EB染色液
F020205 山羊抗小鼠IgG3抗体 Goat Anti-Mouse IgG3
BL0910 FITC标记兔抗Avidin抗体
PY02-441  D/E中和琼脂基础  250克  
BL0609 琼脂糖凝胶6B Sepharose 6B
BL1261 核酸纯化柱(RNA专用)
阿糖胞苷 BES 147-94-4
2,9-二甲基-1,10-菲罗啉 Fmoc-Arg(Tos)-OH 484-11-7
BL0883 兔抗狗IgG免疫血清
BTN81204 SDS-PAGE上样液 SDS-PAGE Loading Buffer,
9006-59-1 卵清蛋白 Albumin  Egg
羟基脲 AgDDTC 127-07-1
硫*(代"酸")铝铵 p-Menthane-1,8-diol monohydrate 7784-26-1
BTN130521 链霉亲和素磁珠 Magnetic beads,Streptavidin
ARB12779 小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶标法分析 Mouse α1-acid glycoprotein,α1-agp ELISA KIT
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·一步法Real-Time RT-qPCR试剂盒
编号：WE0137
英文名称：SuperSYBR One Step RT-qPCR Kit
规格：100次
  本试剂盒是一步法Real-Time RT-qPCR专用试剂盒。所含的SYBR Green I荧光染料可以与所有的双链DNA相结合，使该产品可以用于多种不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。使用本产品进行Real Time RT-qPCR反应，逆转录和定量PCR在同一反应体系中进行，反应过程中无需添加试剂，无需打开管盖，避免了污染的同时提高了实验效率。全新高效逆转录酶RNase H活性缺失，减少了逆转录反应中RNA的降解。该酶逆转录效率高，可对少量 RNA模板进行良好的逆转录反应。与RNA亲合性高，能通读GC含量高，二级结构复杂的RNA模板。全新高效热启动酶，在常温下酶的活性被封闭，从而有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，极大提高了荧光定量PCR反应的精确性。所包含的缓冲系统使以上两种酶同时发挥最大功效，提高效率。本产品灵敏度高，特异性高，线性范围广，对目的基因定量更准确。

ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。

不需要ROX校正的仪器:(WE0137)
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器：(WE0138)
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器：(WE0139)
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

试剂盒组成：

 

组份	WE0137-100次	WE0138-100次	WE0139-100次
2×SuperSYBR One Step Buffer	1.4ml	1.4ml	1.4ml
SuperSYBR One Step EnzymeMix	50μl	50μl	50μl
50×Low ROX	-	50μl	-
50×High ROX	-	-	50μl
RNase-Free Water	1.5ml	1.5ml	1.5ml

注意事项：
1、本试剂盒中的各试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、本产品以RNA为模板进行一步法RT-PCR实验，在操作过程中应避免RNase污染，建议在专门的区域进行RNA操作，使用专门的仪器和耗材，操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套，实验相关耗材应用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并高压灭菌30分钟后使用。
3、SuperSYBR One Step RT-qPCR Buffer中含有SYBR Green I 荧光染料，保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
4、本试剂盒中的各试剂应避免反复冻融，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。
5、本试剂盒必须使用特异性引物，引物的选择可根据具体实验来选择，引物设计的好坏直接影响到RT-PCR反应的结果，设计引物时需考虑GC含量，引物长度，引物位置，PCR产物的二级结构等因素，建议采用专业的引物设计软件进行设计。
6、本品不能用于探针法荧光定量PCR。

操作步骤：
1、将RNA模板、引物、2×SuperSYBR One Step Buffer、SuperSYBR One Step EnzymeMix和RNase-Free Water溶解并置于冰上备用。
2、PCR反应体系
 

试剂	25μl反应体系	终浓度
2×SuperSYBR One Step Buffer	12.5μl	1×
Forward Primer，10μM	0.5μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	0.5μl	0.2μM
SuperSYBR One Step EnzymeMix	0.5μl
RNA Template	Xμl	10 pg～100ng
50×Low ROX or High ROX(optional)	0.5μl	1×
RNase-Free Water	up to 25μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以终浓度0.1-0.5μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下，可提高引物的浓度；发生非特异性反应时，可降低引物浓度，由此优化反应体系。
2)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50×Low ROX or 50×High ROX。

3、涡旋震荡混匀，短暂离心，将溶液收集到管底。
4、RT-qPCR反应条件(荧光定量PCR为两步法)，本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为例。
 

步骤	温度	时间	循环数
反转录	45℃	10 min
PCR预变性	95℃	5 min
变性	95℃	10 s	30-40个循环
退火/延伸	60℃	45 s
融解曲线分析	95℃	15 s
	60℃	1 min
	95℃	15 s
	60℃	15 s

注意：
1)建议采用两步法PCR反应程序，若提高反应特异性，可提高退火温度，以60-64℃作为设定范围的参考；若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增。
2)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定，本程序是以ABI7500荧光定量PCR仪为参照设定。

RT-qPCR反应条件(荧光定量PCR为三步法)：
 

步骤	温度	时间	循环数
反转录	45℃	10min
PCR预变性	95℃	5min
变性	95℃	15s	30-40 个循环
退火	56℃-64℃	30s
延伸	72℃	30s
融解曲线分析	95℃	15s
	60℃	1min
	95℃	15s
	60℃	15s

注意：
1)三步法PCR扩增时，退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
2)融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定，本程序是以ABI 7500荧光定量PCR仪为参照设定。

储存条件：-20℃，避免反复冻融

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