北京GLI3-Luc报告基因质粒厂家价格

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京GLI3-Luc报告基因质粒厂家价格，我公司供应的细胞生物学试剂品类齐全，且具有优势价格，欢迎新老客户垂询订购。

名称：北京GLI3-Luc报告基因质粒厂家价格
英文名：GLI3 Luciferase Reporter Plasmid
品牌：百奥莱博
规格：1μg
编号：SY0144
GLI3报告基因是用于检测GLI3转录活性水平为目的的报告基因。GLI3可以抑制dHand 和 Gremlin来调控手指的发育，它的突变会引起肢端胼胝体综合征，Greig端部多发性并指综合征，Pallister-Hall综合征等相关疾病。

GLI3报告基因主要检测细胞sonic hedgehog信号通路中GLI3的转录活性、药物研究以及基因过表达和RNAi的表型分析等。

pGMGLI3-Lu是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多GLI3结合位点，可以高灵敏度地检测GLI3的激活水平。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得GLI3报告基因质粒更易于转染。

质粒图谱



使用说明
pGMGLI3-Lu可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。用荧光素酶检测试剂盒或双荧光素酶检测试剂盒进行检测。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

欲咨询购买北京GLI3-Luc报告基因质粒厂家价格，请致电北京百奥莱博科技有限公司，为您提供最全面周到的产品服务，除此之外，我公司正在促销以下产品：

·Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯
编号：SY0600
英文名称：Cy3 NHS Ester
规格：1mg
Cyanine 3（Cy3），是花青素荧光素染料家族的成员之一，是化学合成的聚甲炔染料。目前Cyanine系列染料以两种异构体的形式供货，一种是非磺化花青素（non-sulfonated cyanines），一种是磺化花青素（sulfonated cyanine）。两者的光谱性质几乎一致，因此大部分应用可相互替换，比如，都可用于标记DNA或蛋白等生物分子。两者的主要区别在于：磺化染料是水溶性的，在水相的标记反应体系内不需要使用有机共溶剂，并且降低染料在水中聚集的可能性，增强标记效率。

本Cyanine 3（Cy3）是以磺化染料的形式供货，易溶于水，Ex=555 nm，Em=565 nm，具有明亮荧光，光稳定性强，pH非敏感性等优点，适用于标记多肽、蛋白以及核酸等生物分子，以通过后续荧光成像以及其他荧光生物学方法分析目的蛋白。

本Cy3 NHS ester，即含N-羟基琥珀酰亚胺（N-Hydroxysuccinimide）活化基团的Cy3，可直接与生化分子上的*基（-NH2）反应形成稳定的酰胺键，主要是伯胺。

英文别名：Cyanine 3, monosuccinimidyl ester
分子量：829.03
外观：紫色固体
Ex/Em：555nm/565nm
溶解性：溶于DMSO，DMF，水
储存条件：-20℃，有效期12个月
结构式




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·RIPA裂解液(弱)
编号：SY0315
英文名称：RIPA lysis buffer (Weak)
规格：100ml
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer)，其本意是Radio Immunoprecipitation Assay，是一种传统的细胞组织快速裂解液，对动物细胞胞膜、胞浆、胞核成分均有裂解作用。根据其裂解液的强度不同，大致可以分为强、中、弱三类。

本品为较为温和的裂解液（即RIPA裂解液（弱）），含有sodiu*(代"m") orthovanadate，sodiu*(代"m") fluoride，EDTA，leupeptin等多种抑制剂，可以有效抑制蛋白降解。裂解得到的蛋白样品可用于常规的Western、IP等实验。

注意事项

1）需自备PMSF。
2）裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
3） 用RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定其蛋白浓度（SY0298）。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。
4）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期12个月。

使用说明：

(一) 细胞样品

1）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2）贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入150-250μl 裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。
3）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入150μl裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到200μl或250μl。

（二）组织样品：

1）把组织剪切成细小的碎片。
2）融解RIPA裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3）按照每20mg组织加入150-250μl裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4）用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5）充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western和免疫沉淀等操作。
6）如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得充分。
【注】：RIPA裂解液的裂解产物中经常会出现一小团透明胶状物，属正常现象。该透明胶状物为含有基因组DNA等的复合物。在不检测和基因组DNA结合特别紧密的蛋白的情况下，可以直接离心取上清用于后续实验；如果需要检测和基因组结合特别紧密的蛋白，则可以通过超声处理打碎打散该透明胶状物，随后离心取上清用于后续实验。如果检测一些常见的转录因子，例如NF-kappaB、p53等时，通常不必进行超声处理，就可以检测到这些转录因子。


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·线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒(流式分析)
编号：SY0583
英文名称：Mitochondrial Permeability Transition Pore Assay Kit ( flow cytometry)
规格：100T
线粒体膜通透性转换孔，又称线粒体巨型通道（magachannel），是存在于线粒体内外膜之间的非选择性高导电性通道，由多种蛋白质复合组成。线粒体通透性转换孔 (mPTP)可能参与了细胞死亡过程中线粒体成分的释放。

正常的细胞线粒体内膜可维持正常的线粒体电位梯度以保证细胞呼吸作用及能量供应，随着Ca2+的摄入和释放，一种低电导渗透性转换孔在张开和闭合中来回切换。当细胞发生凋亡时和病理性死亡时，线粒体膜电位转换孔渗透性发生改变，Ca2+的过载，线粒体谷胱甘肽的氧化，活性氧水平的升高，包括后继细胞色素C的释放，线粒体膜电位下降等都会导致线粒体渗透性转换孔的激活。

线粒体膜通透性转换孔检测试剂盒（流式分析）检测方法是一种相对于仅基于线粒体膜电位分析更直接的检测线粒体通透性转换孔开放的检测方法。其原理是：首先通过被动运输加载Calcein AM，后者是一种对活细胞进行荧光标记的细胞染色试剂，能够轻易穿透活细胞膜，被细胞内的酯酶剪切形成膜非渗透性的极性分子 Calcein，从而被滞留在细胞内，使胞质包括线粒体发出强绿色荧光。加入CoCl2后，来自胞质的荧光被CoCl2淬灭，仅留下线粒体内的荧光。作为对照，可将细胞加载Calcein AM和CoCl2的同时，对其用离子霉素处理，从而使细胞加载更多的Ca2+，引起线粒体通透性转换孔的激活从而使线粒体荧光淬灭。

本试剂盒以1ml标记体系计算，可供100次检测。检测最大激发波长494nm，最大发射波长517nm。

产品组份：
Calcein AM———————5×50µg
DMSO——————————250µl
CoCl2(80mM)——————1.2ml
Ionomycin(100µM)————750µl
Cell Stain Buffer———2×250ml

储存条件：-20℃避光干燥，避免反复冻融，有效期至少6个月

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