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Multi One Step Cloning Kit
长期
北京百奥莱博科技有限公司
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特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博主要从事生物试剂的生产和销*(代"售"),产品线涵盖北京现货多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒促销在内的分子生物学试剂产品,还包括PCR及荧光定量PCR、核酸提取试剂盒类、样本核酸保护试剂、核酸提取、克隆与转化、蛋白纯化、蛋白检测、免疫组化、细胞凋亡与抗体等。
名称:北京现货多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒促销
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
规格:10T
英文名:Multi One Step Cloning Kit
本产品是一款简单、快速、高效的多片段DNA定向克隆产品,该试剂盒可以将PCR产物定向克隆至任意载体的任意位点。将载体在克隆位点进行线性化,并在插入片段PCR引物5’端引入线性化克隆载体末端序列,使得插入片段PCR产物5’和3’最末端分别带有和线性化克隆载体两末端对应的完全一致的序列 (15 bp~20 bp)。将这种两端带有载体末端序列的PCR产物和线性化克隆载体按一定比例混合,在重组酶Exnase的催化下,仅需反应30 min即可进行转化,完成定向克隆。克隆阳性率可达95%以上。克隆载体酶切产物或PCR产物和插入片段PCR产物可以不进行DNA纯化直接用于重组克隆,极大的简化了实验步骤。
试剂盒中包含有针对多片段重组反应而优化的反应缓冲液和重组酶Exnase。使用该试剂盒,可以一次实现多至5个片段的顺序拼接克隆。Exnase还兼容常规酶切、PCR反应体系。
该试剂盒可用于多片段拼接克隆、全基因合成和DNA定点突变。
产品组份:
5×CE Buffer——————40 μl
Exnase——————20μl
pUC 19 control vector, linearized (50 ng/μl)————5μl
Control insert Mix(0.5 kb, 10 ng/μl; 1 kb, 20 ng/μl; 2 kb, 40 ng/μl)————5μl
实验流程概览
1) 线性化克隆载体制备;
2) 插入片段扩增引物设计;
3) 插入片段PCR扩增;
4) 进行重组反应;
5) 反应产物转化、涂板;
6) 克隆鉴定.
关于北京现货多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒促销的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
·兔抗β-肌动蛋白多克隆抗体
编号:SY0633
英文名称:Rabbit anti-ß-actin pAb
规格:40μl(>40次)
本品为兔抗β-肌动蛋白多克隆抗体,兔抗β-actin多克隆抗体。推荐稀释倍数:WB(1:1000-1:10000),IHC(1:20-1:200),IF(1:10-1:100)
β-肌动蛋白是已知的肌动蛋白六种异构体中的一种,是由375个*基酸组成的细胞骨架蛋白,分子量大小为42kDa左右。广泛分布于细胞浆中,表达量非常丰富。β-actin作为一种管家基因编码表达的蛋白(Housekeeping Protein),在不同物种之间高度保守。因此,在大多数组织和细胞中常被用作内参,即内部参照(Intern Control)。普遍应用于Western Blot实验来校正蛋白质定量、上样过程中存在的误差,确保实验的准确性。
产品类型:兔多抗(Rabbit Polyclonal, pAb)IgG
反应性:人、小鼠、大鼠、斑马鱼、猴
应用:ELISA, IF, WB, IHC
储存缓冲液:含0.02%叠氮*、50%甘油的PBS,pH7.3
免疫原:人 β-actin, (GenBank accession number: BC002409)
纯化:抗原亲和纯化
储存条件:-20℃。
北京现货多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒促销关键词:多片段一步法(快速/无缝)克隆试剂盒,SY0280,Multi One Step Cloning Kit
·零背景TOPO-TA克隆试剂盒
编号:SY0281
英文名称:Zero TOPO-TA Cloning Kit
规格:20T
本试剂盒是利用拓扑异构酶(Topoisomerase)高效快速连接DNA片段的原理进一步研发而成,与传统的T4连接酶相比,具有以下优势:
1)快速,仅需1-5分钟即可完成连接反应。
2)高效,无自连现象,阳性克隆率接近100%,无需设置蓝白斑筛选;
3)操作简单,从连接到涂板仅需15-20min。操作过程省去冰浴、热激和1h复苏等。
4)可连接长达10kb目的产物。
产品用途
A尾PCR产物的快速克隆。克隆后PCR产物的快速测序【使用M13F/M13R引物】。
pESI-T vector (30ng/μl)——————20μl
1kb control insert(40ng/μl)——————5μl
10×Enhancer——————20μl
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期12个月。
·3:1琼脂糖
编号:SY0255
英文名称:NuSieve3:1Agarose
规格:5g
琼脂糖(Agarose)是纯化的线性半乳聚糖亲水胶体,提取自琼脂或者含琼脂的海藻,结构上是一种线性聚合物,由β-D-吡喃半乳糖(1-4)连接3,6-脱水α-L-吡喃半乳糖基构成。作为一种凝胶试剂,常用于通过凝胶电泳或者印迹法(如Northern或Southern)来进行日常核酸分析,也适用于蛋白应用,如辐射状免疫扩散(RID)实验。
本品为NuSieve3:1 琼脂糖,与常规琼脂糖相比,对PCR产物,小片段DNA(1000bp以下)具有很高的分辨率。此外,还具有如下特点:
1)易溶解,胶液更清澈,可以配制高达5%的凝胶;
2)很低的背景;
3)品质稳定。
琼脂糖的基本参数,包括:
1)硫*(代"酸")盐含量(sulfate content)——纯度指标,因为硫*(代"酸")根是存在琼脂糖内的主要离子基团;
2)凝胶强度(gel strength)——施加于凝胶使之断裂的外力;
3)胶凝点(Gel point)——水溶性琼脂糖溶液冷却后形成凝胶时的温度。液体向凝胶转化的过程中,琼脂糖溶液具有滞后性,因此,胶凝点不等同于胶熔点。
4)电渗(EEO)——液体穿透凝胶的一种电动运动。琼脂糖凝胶内的阴离子基团吸附在基质上不会发生迁移,但是解离的阳离子就会朝负极迁移,从而产生电渗。由于生物聚合物的电泳迁移通常是朝负极运动,则EEO产生的内部对流会干扰分离效率。
产品性质:
外观:白色粉末
凝胶强度:≥650g/cm2(1.5% gel)
凝胶温度:≤36℃(1.5% gel)
融胶温度:≤80℃(1.5% gel)
电渗值:≤0.10
外观:无色清澈胶液
硫*(代"酸")盐:≤0.10%
水分:≤10%
灰分:≤0.5%
使用方法
1)配制适量电泳及制胶用的缓冲液(根据电泳需要,配制合适浓度的电泳及制胶缓冲液),倒入合适三角瓶中。【注意】:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须是相同的。
2)根据制胶量及凝胶浓度,加入准确称量的琼脂糖粉(总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量)。
3)在微波炉中加热溶解琼脂糖,设置中火加热至沸腾,保持胶液沸腾约 30s,戴上防热手套,移开三角锥瓶,小心摇动三角锥瓶,重悬未溶解颗粒,再次用高火加热1分钟(或加热直至琼脂糖完全溶解)。请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,使琼脂糖胶液充分均匀。
【注意】:必须保证琼脂糖充分完全溶解,此时琼脂糖胶液清澈,否则,会造成电泳图像模糊不清。加热时如胶液剧烈沸腾发泡,停止加热。微波炉中加热时间不宜过长。
4)使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入*化乙锭(EB)溶液使其终浓度为0.5µg/ml,并充分混匀。
【注意】:*化乙锭是一种致癌物质。使用含有*化乙锭的溶液时,请戴用手套。建议使用我司提供的EB无毒替代品(YeaRed 核酸染料,Cat# 10202),使用时仅需用制胶缓冲液稀释至1×工作液即可。
5)将琼脂糖溶液倒入制胶模具中,在适当位置处插上梳子。凝胶厚度一般在3-5mm之间。
6)在室温下使胶凝固(大约30min-1h),然后放置于电泳槽中进行电泳。
【注意】:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存,一般可保存 2~5天。
琼脂糖浓度与DNA分离范围
线性DNA片段大小(bp) | 10-100bp | 100-500bp | 500-1000bp |
琼脂糖浓度(%),1×TAE Buffer | 6.0 | 4.0 | 3.0 |
琼脂糖浓度(%),1×TBE Buffer | 5.0 | 3.0 | 2.0 |
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