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- 保存条件:
2-8℃
- 保质期:
12个月
- 供应商:
凯基生物
- 规格:
10 tests
在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期,细胞膜中 的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为 35~36kD 的 Ca2+依赖性磷脂结合 蛋白,与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合。 因此 Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将 Annexin V 进行荧光素 PE 标记,以标记了的 Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生。
7-AAD(7-amino-actinomycin D)是一种核酸染料,它不能通过正常质膜,随着细胞凋亡、细胞死亡 过程,质膜对 7-AAD 的通透性逐渐增加,结合细胞凋亡中 DNA 的有控降解,在合适波长激发光的激发下可 发出明亮的红色荧光,通过 7-AAD 标记 DNA 的强弱,将细胞分为三群:7-AAD 强为死亡细胞,7-AAD 弱是 凋亡细胞,7-AAD-为正常活力细胞。7-AAD 同 PI 有着相似的荧光特性,但其发射波谱较 PI 窄,对其他检测 通道的干扰更小,在多色荧光分析中是 PI 的最佳替代品,可与 Annexin V-PE 联合使用。
本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。
【技术参数】
实验类型:细胞凋亡检测
检测方法:荧光成像,流式分析
性质说明: 用流式细胞仪检测,激发波长 Ex=488 nm; 发射波长 Em=578 nm,Annexin V-PE 的橙红色荧光建议
使用 FL2 通道检测;激发波长 Ex=546 nm; 发射波长 Em=647 nm,7-AAD 红色荧光建议使用 FL3 通
道检测。
保存条件:2-8℃,保存 12个月,避光
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文献和实验Annexin V是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸PS有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的PS与凋亡早期细胞胞膜结合,将Annexin V标记上荧光染料利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 由于凋亡晚期或坏死细胞膜完整性丧失,细胞核染色液可进入细胞内染色细胞核,搭配Annexin V使用可将处于不同凋亡时期的细胞区分开。 A.悬浮细胞: 按照实验方案进行凋亡诱导,300 g离心5 min,弃上清,收集细胞,用PBS洗涤细胞一次,轻轻重悬浮细胞并计数。 取1~5 ×
示例: Jurkat细胞用1μM喜树碱(Camptothecin) (左)或未加药 (右)处理4h,FITC-Annexin V/PI荧光双染细胞凋亡检测试剂盒染色后,流式细胞仪荧光检测。 Annexin V-FITC单阳性细胞为早期凋亡细胞,Annexin V-FITC和PI染色双阳性的细胞为坏死细胞或者晚期凋亡。PI单染色阳性位裸核细胞。 实测数据可能会因细胞类型、细胞凋亡情况,检测仪器等的不同而存在差异,图中数据仅供参考。 流式检测细胞凋亡的数据分析方法: 1) 选中所有颗粒,将FSC
Q:Annexin V 凋亡检测试剂盒的原理是什么? A:Annexin V 是一种钙离子依赖性磷脂结合蛋白,与磷脂酰丝氨酸 PS 有高度亲和力,可通过细胞外侧暴露的 PS 与凋亡早期细胞胞膜结合,将 Annexin V 标记荧光染料如 FITC 利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡。 碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)或 7-AAD 可与双链 DNA 特异性结合,并产生强烈的荧光,正常情况下无法透过细胞膜。由于凋亡晚期或坏死细胞膜丧失完整性,核染料 PI 或 7-AAD










