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细胞pH指示荧光探针 BCECF, AM

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  • 2025年11月07日
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      -20度

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      12个月

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    • 供应商

      凯基生物

    • 规格

      1 mg

    BCECF(2‘,7‘-双-(2 -羧基乙基)-5-(6)-羧基荧光素),是钱永健和他的同事在 1982 年提出的最广泛使用的细胞内 pH 值的荧光 指示剂。它具有如下几个优越特性: 7.0 的 pKa 值是理想匹配到正常范围的细胞质的 pH(约 6.8-7.4)。 荧光激发特性是 pH 依赖型,可以进行比率测定 ,可以进行比率测定。 具有最大吸光度的 BCECF 碱形式激发谱非常接近 488nm 氩激发,适合应用于流式细胞仪和共聚焦显微镜 ,适合应用于流式细胞仪和共聚焦显微镜。 BCECF 具有 4~5 个负电荷,pH7~8,有助于在胞内滞留。其 AM 形式的乙酰酯衍生物具有膜透性,可以被动穿过细胞膜。且 BCECF AM 本身不发出荧光,通过胞内酯酶作用后成为 BCECF 发出荧光信号,可以作为细胞活力的判断依据之一。 修饰 AM 乙酸酯集团上的羧酸,使之不带电荷,可以渗透进入细胞膜,一旦进入细胞,其亲脂保护基团可以被酯酶非特异性的脱去,成为带电荷形式,相较于原来的 AM 形式,带电荷形式在胞内可以更久的滞留。 BCECF 也用于灌注组织,细胞间隙,植物细胞,对细菌和酵母进行 pH 测量。BCECF AM 可以用于检测细胞生存能力,细胞毒性,凋亡、粘附和多药耐药性以及趋化性等多种功能性检测。 分子量:821 Molecular formula:C39H35O19 CAS:117464-70-7
    实验类型:细胞 pH 指示荧光探针
    检测方法:流式细胞仪、共聚焦显微镜
    保存条件:-20℃,保存12个月,避光

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    • 共聚焦荧光探针标记方法

      (一)BCECF测定pH值 1. 储存液配制 BCECF-AM溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光保存。 2. 染色步骤 将培养细胞用PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。加入BCECF-AM(终浓度1~5μmol/L),37℃孵育30~60min。PBS(含Ca2+、Mg2+)洗2遍。激光扫描共聚焦显微镜观察。 (二)SNARF-1定量比率测定pH值 1. 储存液配制 SNARF溶于DMSO配成1mmol/L溶液,等份分装后,-20℃避光

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      体的pH则在4.5~6.0之间。根据检测对象pH的不同将荧光探针分为用于偏中性和酸性两类。常用于偏中性pH细胞胞浆pH检测的荧光探针有SNARF类(SNARF-1、SNARF-calcein)、SNAFL类(SNAFL-1、SNAFL-calcein)、BCECF等,这些探针均为疏水性探针,须使用其AM形式。FITC-dextran则适用于pH范围4~6之间,如溶酶体pH的检测,该探针也不能透过质膜,但可通过细胞胞饮作用进入溶酶体,因此应选择分子量稍小的Dextran(葡聚糖)。 5. 细胞

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