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- 技术资料
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4℃
- 保质期:
长期
- 英文名:
Bovine Transferrin, HOLO
- 库存:
371
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
牛饱和铁转铁蛋白北京厂家的品牌:百奥莱博,是优质的蛋白质研究产品,用于科研目的生化试验项目,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多牛饱和铁转铁蛋白等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。
名称:牛饱和铁转铁蛋白北京厂家
英文名:Bovine Transferrin, HOLO
规格:100mg
品牌:百奥莱博
饱和铁转铁蛋白(holo transferrin)持续地释放铁离子,并形成脱铁转铁蛋白(apo transferrin)。研究表明,饱和铁形态的转铁蛋白对于促进细胞生长是最有效的形态。对于杂交瘤,黏连细胞和悬浮细胞系,在细胞培养过程中,应保持培养基中转铁蛋白浓度在0.5-100μg/ml。针对不同的细胞系,需要选择最合适的浓度。
Bovine Transferrin(牛转铁蛋白)是一种广泛使用的生物可利用铁来源,细胞和组织培养中重要的促生长营养物。采用新西兰来源的牛血浆,利用亲和色谱层析技术制备而得,保证了产品的高纯度、蛋白完整性、无辛酸残留及提取过程无热或溶剂引起的变性效应,符合ISO质量体系,确保了高质素的产品安全标准。
Bovine Transferrin(牛转铁蛋白)以高纯度、热处理、冻干粉状态提供,并有脱铁(apo)或饱和铁(holo)两种形式。
转铁蛋白冻干粉需要保存在冷藏状态下,使用之前再溶解。一般用PBS或者纯水在室温下将转铁蛋白冻干粉溶解成储液,浓度为2 mg/ml,然后用无菌滤膜进行过滤,滤液可在无菌条件下4℃保存5-10天。
英文别名:Serum transferrin; beta-1-Metal-combining protein; Siderophilin
来源:牛血浆
含铁量:不少于1000 ppm
分子量:约76,000-81,000
外观:浅红色冻干粉
纯度:≥95%(w/w总蛋白)
溶解性:溶于水(10 mg/ml),在20-25℃完全溶解约20min
储存条件:4℃
欲咨询购买牛饱和铁转铁蛋白北京厂家,请致电北京百奥莱博科技有限公司,为您提供最全面周到的产品服务,除此之外,我公司正在促销以下产品:
·高保真DNA聚合酶
编号:SY0057
英文名称:Pfu DNA Polymerase
规格:100U
Pfu DNA Polymerase 是基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代超保真DNA聚合酶,具有极高的扩增效率和广泛的模板适应性,可用于几乎所有PCR反应。其行进性 (processivity)得到了大幅度提升,即使是非常复杂的模板,也能准确快速的完成反应。其错配率是普通Taq酶的1/53,是Pfu酶的1/6;
与上一代Pfu DNA Polymerase相比,Pfu中添加了独特的延伸因子、特异性促进因子以及平台期解抑制因子,使其长片段扩增能力、扩增特异性性以及扩增产量方面得到了大幅度提升:1)使用λDNA、质粒等简单模板,Pfu 可以有效扩增长达40 kb的片段;2)使用基因组DNA等复杂模板,Pfu可以有效扩增长达20 kb的片段;3)使用cDNA模板,Pfu可以有效扩增长达10 kb的片段。此外,Pfu对PCR抑制剂具有良好的抵抗能力,可用于细菌、真菌、植物组织、动物组织或全血样品的直接PCR。II Pfu中添加了在常温下能够抑制其5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的两种单克隆抗体,可进行高特异性的热启动PCR。
该酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性,扩增产物为平端。
产品组份:
Pfu DNA Polymerase(1 U/μl):100 μl
2×PCR buffer:1.25 ml×2
dNTP Mix(10 mM each):100 μl
10×Loading buffer:1.25ml
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测:10 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,加入2U本品,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测1:50 μl PCR体系中加入1U本品,以100 ng人基因组DNA为模板扩增30个循环,1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的8.2 kb条带。
功能检测2:50 μl PCR体系中加入1U本品,以10 ng λDNA为模板扩增30个循环,1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的15 kb条带。
1 推荐反应体系及反应程序
1.1 反应体系配制:
a. 所Pfu DNA Polymerase 是基于Pfu DNA Polymerase改造而成的新一代超保真DNA聚合酶,具有极高的扩增效率和广泛的模板适应性,可用于几乎所有PCR反应。其行进性 (processivity)得到了大幅度提升,即使是非常复杂的模板,也能准确快速的完成反应。其错配率是普通Taq酶的1/53,是Pfu酶的1/6;
与上一代Pfu DNA Polymerase相比,Pfu中添加了独特的延伸因子、特异性促进因子以及平台期解抑制因子,使其长片段扩增能力、扩增特异性性以及扩增产量方面得到了大幅度提升:1)使用λDNA、质粒等简单模板,Pfu 可以有效扩增长达40 kb的片段;2)使用基因组DNA等复杂模板,Pfu可以有效扩增长达20 kb的片段;3)使用cDNA模板,Pfu可以有效扩增长达10 kb的片段。此外,Pfu对PCR抑制剂具有良好的抵抗能力,可用于细菌、真菌、植物组织、动物组织或全血样品的直接PCR。II Pfu中添加了在常温下能够抑制其5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性的两种单克隆抗体,可进行高特异性的热启动PCR。
该酶具有5’→3’聚合酶活性和3’→5’外切酶活性,扩增产物为平端。
产品组份:
Pfu DNA Polymerase(1 U/μl):100 μl
PCR buffer:1.25 ml×2
dNTP Mix(10 mM each):100 μl
10×Loading buffer:1.25ml
活性定义:用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃30分钟内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。
质量控制
核酸外切酶残留检测:10 U本品和0.6 μg λ-Hind Ⅲ在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
核酸内切酶残留检测:10 U本品和0.6 μg Supercoiled pBR322 DNA在74 ºC下孵育1小时,DNA的电泳谱带不发生变化。
大肠杆菌残留DNA检测: 50 μl体系中,加入2U本品,以ddH2O为模板,扩增E.coil 16s rDNA基因。35个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。
功能检测1:50 μl PCR体系中加入1U本品,以100 ng人基因组DNA为模板扩增30个循环,1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的8.2 kb条带。
功能检测2:50 μl PCR体系中加入1U本品,以10 ng λDNA为模板扩增30个循环,1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,观察到单一的15 kb条带。
1 推荐反应体系及反应程序
1.1 反应体系配制:
a. 所有操作请在冰上进行,各组分解冻后请充分摇匀。为了防止II Pfu DNA Polymerase的校对活性降解引物,请将聚合酶最后加入反应体系中。各组分使用完毕后及时放回-20℃。、
| ddH2O | to 50 μl |
| 2×PCR buffer a | 25 μl |
| dNTP Mix(10 mM each)b | 1 μl |
| 模板DNAc | optional |
| 引物1(10 μM) | 2 μl |
| 引物2(10 μM) | 2 μl |
| Pfu DNA Polymerase(1 U/μl)d | 1 μl |
【注】:a. 2×II PCR buffer中已含有Mg2+,终浓度为2mM。
b. 请勿使用dUTP和带有尿嘧啶的引物或模板。
c. 不同模板最佳反应浓度有所不同,下表为50 μl反应体系推荐模板使用量:
| 基因组DNA | 50 ng~400 ng |
| 质粒或病毒DNA | 10 pg~30 ng |
| cDNA | 1~5 μl(不超过PCR反应总体积的1/10) |
d. 推荐的酶的终浓度为1U/50 μl反应。然而,根据扩增子的长度和复杂程度不同,可将酶的使用量在0.5-2U/50 μl反应之间进行优化。II Pfu DNA Polymerase具有较强的校对活性,因此,如扩增产物需要进行TA克隆,加A之前必须进行DNA纯化。
1.2 一般PCR反应条件设置:
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性a | 95℃ | 30 sec~3 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 25~35循环 |
| 退火b | 56℃~72℃ | 15 sec | |
| 延伸c | 72℃ | 30~60sec/kb | |
| 彻底延伸 | 72℃ | 5 min | 1 |
【注】:a. 推荐大多数模板的预变性温度为95℃,时间为:质粒或病毒DNA,30 sec,基因组/cDNA为3 min;
b.一般来说,退火温度设置为引物Tm值。如引物Tm值≥72℃,可删除退火步骤,直接进行后续的延伸步骤(两步法PCR)。如果需要,可以建立一个温度梯度反应去寻找最适引物模板结合温度。此外,退火温度直接决定扩增特异性。如发现扩增特异性差,可适当提高退火温度,每次+3℃。
c.延长延伸时间有助于提高扩增产量。
1.3 长片段PCR 扩增:
*使用高质量的模板,提高模板使用量;
*使用长引物。
*当推荐程序无法进行扩增时,建议尝试下述Touch Down两步法PC
*Touch Down两步法推荐反应条件设置:
| 循环步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 5 |
| 延伸 | 74℃ | 60 sec/kb | |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 5 |
| 延伸 | 72℃ | 60 sec/kb | |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 5 |
| 延伸 | 70℃ | 60 sec/kb | |
| 变性 | 95℃ | 15 sec | 5 |
| 延伸 | 68℃ | 60 sec/kb | |
| 彻底延伸 | 68℃ | 5 min | 1 |
2. 复杂样品的扩增
Pfu具有卓越的长片段扩增能力、扩增特异性以及扩增产量,对许多PCR抑制剂具有良好的抵抗能力,可用于细菌、真菌、植物组织、动物组织或全血样品的直接PCR。推荐扩增的样品类型:
| 样品类型 | 扩增方式 | 推荐操作方式(50µl体系) |
| 全血 | 直接扩增 | 吸取1-5µl作为扩增模板 |
| 滤纸干血渍 | 直接扩增 | 剪取1-2mm2滤纸作为扩增模板 |
| 培养细胞 | 直接扩增 | 取少量细胞作为扩增模板 |
| 酵母 | 直接扩增 | 挑取单克隆或1µl菌液作为模板 |
| 细菌 | 直接扩增 | 挑取单克隆或1µl菌液作为模板 |
| 霉菌 | 直接扩增 | 挑取少量作为扩增模板 |
| 精液 | 直接扩增 | 吸取少量作为扩增模板 |
| 浮游生物 | 直接扩增 | 挑取少量作为扩增模板 |
| 植物组织 | 直接扩增 | 剪取1-2 mm2 组织作为扩增模板 |
| 小鼠尾巴 | 裂解后吸取裂解液扩增 | 吸取1-5 μl 裂解液作为扩增模板* |
| 食品 | 裂解后吸取裂解液扩增 | 吸取1-5 μl 裂解液作为扩增模板* |
*样品裂解液制备过程:
**Lysis Buffer:20 mM Tris-HCl,100 mM NaCl,1 mM EDTA,0.1% SDS,pH 8.0。(需自备)
引物设计注意事项
1)引物3’端最后一个碱基最好为G或者C;
2)引物3’端最后8个碱基应避免出现连续错配;
3)引物3’端尽量避免发夹结构出现;
4)引物的Tm值调整至55℃-65℃之间。
5)引物额外附加序列,即与模板非配对序列,不应参与引物Tm值计算;
6)引物的GC含量控制在40%-60%之间;
7)正向引物和反向引物Tm值以及GC含量尽可能一致。
牛饱和铁转铁蛋白北京厂家关键词: beta-1-Metal-combining protein,Serum transferrin, Siderophilin,牛饱和铁转铁蛋白
·Cy3标记山羊抗大鼠IgG(H+L)
编号:SY0701
英文名称:Cy3-AffiniPure Goat Anti-Rat IgG (H+L)
规格:100μl
本品是由Cy3标记的山羊抗大鼠IgG(H+L),使用抗原偶联的琼脂糖微珠从山羊抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的大鼠IgG分子,也会与其他大鼠免疫球蛋白的轻链结合。可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应,但不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。
Cy3最大激发波长(Amax)为550nm,最大发射波长(Emax)为570nm。本品适合做单标实验,广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学(ICC),流式细胞术(FC)以及免疫组化(IHC)等。要做多标(multiple-labeling)实验,建议使用与相近物种血清蛋白或者免疫球蛋白预先经过亲和吸附处理的二抗。
浓度:0.75mg/ml
缓冲液:0.005M 磷酸*,0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂:7.5mg/ml BSA(无IgG,蛋白酶),50% 甘油
防腐剂:0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例:1:50~400(适合多数实验)
储存条件:-20℃,避免反复冻融,有效期一年。
·AFP1-GFP报告基因质粒
编号:SY0204
英文名称:AFP1 GFP Reporter Plasmid
规格:1μg
AFP1-GFP报告基因是用于检测AFP1转录活性水平为目的的报告基因。
AFP1-GFP报告基因主要应用于Hepatoma Nuclear Factor信号通路、药物研究以及细胞中AFP1的调控机制的研究。
pGMAFP1-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体,在其多克隆位点插入了多个AFP1结合位点,可以高效地检测AFP1的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因,更便于后续的检测。同时,对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变,增加了质粒的转录因子结合特异性。另外,由于质粒体积减小,使得AFP1-GFP报告基因更易于转染。
质粒图谱
pGM AFP1 -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’
使用说明
pGMAFP1-GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
注意事项
1)本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2)为了您的健康,实验操作时请穿实验服和带一次性手套。
储存条件:-20℃。
牛饱和铁转铁蛋白北京厂家关键词: beta-1-Metal-combining protein,Serum transferrin, Siderophilin,牛饱和铁转铁蛋白
ARB12773 小鼠QA淋巴细胞抗原2(QA-2)血清中含量检测 Mouse qa lymphocyte antigen 2 region,qa-2 ELISA KIT
BTN131020 Sephacryl S-400基质 Sephacryl S-400
7647-17-8 *化铯 Cesium choride(CsCl)
ARB13333 犬细小病毒CPV 酶免分析
CYB161032 豚鼠IgG(冻干粉)
BFD026 呋*(代"喃")西林快速检测试剂盒
BTN130620 Poly(U)聚合酶 Poly(U) Polymerase
甲基紫 Ponceau 2R 8004-87-3
N-乙酰-DL-丙*酸 4-MUP 1115-69-1
ARB10901 人抗硬皮病抗体70(SCL70/topoI)检测服务 Human anti-scl70 antibody,scl70/topoiELISA KIT
PY04-036 *啶酮酸(III) 5mg/支×10支 每支添加于225ml缓冲蛋白胨水(BPW)培养基中制成MBP,用于沙门氏菌和李斯特氏菌前增菌培养
ARB13823 豚鼠端粒酶(TE)elisa检测 Guinea pig telomerase,te ELISA KIT
PY01-085B 肝浸粉(牛) 250克|1公斤
ARB11924 人囊虫病抗体(CYT Ab)elisa检测操作说明书 Human cysticercosis antybody,cyt ab ELISA KIT
D-脯*酸 D-Norleucine 344-25-2
ARB12085 大鼠水通道蛋白1(AQP-1)定量分析 Rat aquaporin 1,aqp-1 ELISA KIT
BTN3670 动物DNAOUT Animal DNAOUT
尿苷二磷酸葡糖醛酸 Methylamine hydrochloride 63700-19-6
12650-88-3 Lysozyme 溶菌酶
缬*霉素 Chitin 2001-95-8
BTN130832 通用型MLPA试剂盒 Universal MLPA Kit
草酸酰胺乙酯 L-Sorbose 617-36-7
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