NF-κB-GFP报告基因质粒价格厂家

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括NF-κB-GFP报告基因质粒价格厂家在内的一系列细胞生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：NF-κB-GFP报告基因质粒价格厂家
编号：SY0153
规格：1μg
英文名：NF-κB GFP Reporter Plasmid
产地：国产|进口
品牌：百奥莱博
NF-κB-GFP报告基因是用于检测NFκB转录活性水平为目的的报告基因。 NF-κB基因在炎症反应、免疫应答和抑制细胞凋亡等方面有着重要的作用。

NF-κB-GFP报告基因主要应用于NF-κB信号通路的研究和基于NF-κB信号通路的药物研究以及癌细胞中NF-KB的调控机制的研究。

pGMNF-ΚB-GFP是我公司改造后的哺乳动物真核表达载体，在其多克隆位点插入了多个NF-κB结合位点，可以高效地检测NF-κB的激活水平。由于载体采用了GFP作为报告基因，更便于后续的检测。同时，对载体中预测出的其它转录因子以外的结合位点进行了适当的突变，增加了质粒的转录因子结合特异性。另外，由于质粒体积减小，使得NF-κB-GFP报告基因更易于转染。

质粒图谱



pGMNF-κB -GFP质粒测序引物
5’-TAGCAAAATAGGCTGTCCC-3’

使用说明
pGMNF-κB -GFP可以采用常规转染方法转染哺乳动物细胞。
TNF-α、IL-1β和LPS等是常见的NF-κB激活剂，可作为NF-κB报告基因的阳性对照。

注意事项
1）本质粒未经我公司允许不得用于任何商业用途，也不得移交给订货人实验室以外的任何人或单位。
2）为了您的健康，实验操作时请穿实验服和带一次性手套。

储存条件：-20℃。

除NF-κB-GFP报告基因质粒价格厂家外，我公司正在打折促销以下产品：
BL0620 肝素-琼脂糖凝胶H.P Heparin Sepharose H.P
PY02-260  半固体琼脂  250克  
*化铵 ABTS diammonium salt 12124-97-9
ARB12266 大鼠多巴胺(DA)Elisa方法检测 Rat dopamine,da ELISA KIT
ARB11292 人*粘蛋白相关的神经受体1(CNR-1)定量分析 Human cadherln-related neuronal receptor1,cnr-1 ELISA KIT
ARB11302 人复合前列腺特异性抗原(CPSA)Elisa分析 Human complex edprostate specific antigen,cpsa ELISA KIT
缩二脲 3-O-Methylglucose 108-19-0
830-81-9 1-Naphth 1 acetate  乙酸－1－奈脂
ARB13238 小鼠维生素B6(VB6)含量测试 Mouse vitamin b6,vb6 ELISA KIT
HC0253 多道可调移液器整支可消毒系列
25322-68-3 PEG12000  聚乙二醇
PY06-013  耶尔森氏菌显色培养基  1000ml，用于耶尔森氏菌快速分离与鉴别
6104-58-1 Coomassie brilliant blue G-250  考马斯亮蓝
BTN101118 水样病毒沉淀剂 Water Sample Virus Precipitation Reagent
BTN80403 RNase-free水 RNase-free Water
ARB13582 兔子皮质酮/肾上腺酮(CORT)含量分析 Rabbit corticosterone,cort ELISA KIT
F030619 FITC标记兔抗鸡IgY抗体 Rabbit Anti-Chicken IgY*FITC
BL1160 酵母质粒提取试剂盒
BL0770 (14.4-97.4)低分子量蛋白marker
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·Alexa Fluor 594标记驴抗鸡IgY(H+L)
编号：SY0741
英文名称：Alexa Fluor 594 AffiniPure Donkey Anti-Chicken IgY (H+L)
规格：100μl
本品是由Alexa Fluor 594标记的驴抗鸡IgY（H+L），使用抗原偶联的琼脂糖微珠从驴抗血清内亲和色谱纯化所得。免疫电泳和/或ELISA法检测显示本品特异性结合完整的鸡IgY分子，也会与其他鸡免疫球蛋白的轻链结合。本品预先与相近物种包括牛、山羊、豚鼠、叙利亚仓鼠、马、人、小鼠、兔、大鼠和绵羊血清蛋白经过亲和吸附处理，ELISA和/或固相免疫吸附检测证实本品与以上物种几乎无交叉反应。但可能会与其他物种免疫球蛋白发生交叉反应。本品不会识别非免疫球蛋白类的血清蛋白。

Alexa Fluor 594的光谱性质类似于Texas Red，Amax（最大激发波长）为591nm，Emax（最大发射波长）为614nm。本品适合做多标实验，广泛应用于多种免疫学实验如免疫细胞化学（ICC），流式细胞术（FC）以及免疫组化（IHC）等。

浓度：0.75mg/ml
缓冲液：0.005M 磷酸*，0.125M *化*, pH 7.6
稳定剂：7.5mg/ml BSA（无IgG，蛋白酶），50% 甘油
荧光素：Alexa Fluor 594, Amax=591, Emax=614
防腐剂：0.025% 叠氮化*
推荐稀释比例：1:50～400（适合多数实验）
储存条件：-20℃，避免反复冻融，有效期一年。

·二甲基腔肠素
编号：SY0242
英文名称：Coelenterazine 2-methyl
规格：1×50μg
本品为粉末形式供应的二甲基腔肠素，系天然腔肠素衍生物，具有无毒、细胞膜通透性等特性，是一种细胞强抗氧化剂，可高效作用于细胞内的活性氧，如单态氧和超氧阴离子。由于氧化应激是细胞凋亡过程的中介环节，因此，二甲基腔肠素可能作为一种研究细胞凋亡的重要工具。另，二甲基腔肠素还可通过化学发光法来检测超氧阴离子和过氧亚硝酸阴离子水平。

腔肠素（Coelenterazine）是自然界中资源最丰富的天然荧光素，是绝大多数海洋发光生物（超过75%）的光能贮存分子。腔肠素可作为许多荧光素酶的底物，比如海肾荧光素酶（Rluc），Gaussia分泌型荧光素酶（Gluc），以及包括水母发光蛋白（aequorin）和薮枝螅发光蛋白（Obelia）在内的光蛋白（Photoproteins）。其发光原理是：以腔肠素为底物的荧光素酶在有分子氧的条件下，氧化腔肠素，产生高能量的中间产物，并在此过程中发射蓝色光，峰值发射波长约为450~480nm。与甲虫（或萤火虫）荧光素/荧光素酶系统不同，腔肠素/荧光素酶系统不需要三磷酸腺苷（ATP），因此更便于体内生物荧光的研究。因此，腔肠素常用作基于荧光分析的报告基因检测以及活体动物检测的发光底物。

腔肠素还能在酶非依赖性的氧化体系中自发荧光，细胞和组织内的超氧阴离子和过氧化亚硝基阴离子能够增强该自发光信号，因此其也可用来检测细胞/组织内活性氧（ROS）水平。

腔肠素具有能量转移的特性— —生物发光共振能量转移（Bioluminescence Resonance Energy Transfer，BRET），利用此特性，当与荧光蛋白如GFP的突变体（增强的黄色荧光蛋白，EYFP）联合使用，在底物腔肠素存在的情况下，荧光素酶（如Rluc）催化底物发生蓝光，能量随之转移到EYFP上，发出绿光（~530nm）。这两个蛋白的相互作用可以通过Rluc融合蛋白和EYFP融合蛋白两者间的相互关系来评估，适用于研究蛋白-蛋白之间的相互关系。另外，由于BRET的信号可通过比较绿光和蓝光的量来进行测定，消减了因细胞数、细胞类型和其他实验变量而引起的数据变量，适用于高通量筛选如药物开发。

更为重要的一个功能，水母发光蛋白复合物（Aequorin）由22kDa的水母蛋白（Apoaequorin protein）、分子氧和底物腔肠素组成。只有当*离子（Ca2+）与该复合物结合后，腔肠素才能被氧化生成高能量产物Coelenteramide，同时释放出CO2和蓝色荧光（~466 nm）。正是此Ca2+依赖性的反应过程（见图1），使得腔肠素非常适用于监测活细胞内*离子水平。与常规的荧光*离子指示剂相比，其主要具有以下几个优点：
1）能检测较大范围的*浓度 – 从0.1 μM至 >100μM；
2）样品无自体荧光，背景荧光低于使用荧光*离子指示剂；虽然信号比使用荧光*离子指示剂弱，但是通过成像仪器可以得到更高的信噪比，因此具有更高的灵敏度。
3）水母发光蛋白复合体能够稳定维持在细胞内，使其能够进行数小时至数天的*离子监测。


图1. 腔肠素作为水母发光蛋白辅助因子的Ca2+依赖反应流程

目前商业化的腔肠素应用最普遍的是天然腔肠素（Coelenterazine native），另外还有很多腔肠素衍生物如Coelenterazine h、Coelenterazine 400a、Coelenterazine cp、Coelenterazine f、Coelenterazine hcp、Coelenterazine n等被一一合成。理论上这些腔肠素可用于相同的实验，但是由于其发光波长，细胞膜渗透性，光量子效率上的差异，使得其在相同应用上表现出不同的实验效果。因此非常有必要根据具体实验目的选择最合适的腔肠素底物。

英文别名：Coelenterazine, 2-methyl analog; Methyl Coelenterazine; 2-methyl Coelenterazine
CAS：N/A
分子式：C20H17N3O2
分子量：331.37
溶解性：溶于甲醇或乙醇
外观：黄色粉末
纯度：＞98%（TLC）
结构：


注意事项
1）二甲基腔肠素粉末最好使用惰性气体-氮气或氩气，在密封良好的塑料管中避光保存于-20℃，长期保存于-70℃。管内即使有少量空气进入，也可能造成二甲基腔肠素氧化失活，使量化分析的结果难以在不同试验间进行比较。
2）为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。


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·悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂
编号：SY0606
英文名称：Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent
规格：0.5ml
悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂是一种阳离子脂质体转染试剂，经优化专门用于悬浮细胞的转染，且适用于DNA、RNA和寡核苷酸的转染，对大多数真核细胞具有很高的转染效率。悬浮细胞专用脂质体核酸转染试剂以无菌的液体形式提供。

注意事项
1. 为得到最优的转染效率，请先用无血清培养基（如OPTI-MEMⅠ培养基）稀释 Suspension Cell-Free Liposomal Transfection Reagent，之后与DNA或RNA做混合。
2. 使用高质量的DNA或RNA有助于获得较高的转染效率，务必确保质粒的高纯度和无菌状态，彻底去除质粒提取过程中可能残留的*酚和高盐，因为上述酚类会对细胞造成损失，而高盐分会干扰“-复合物”的形成。质粒中的内毒素也是转染的大敌，务必去除。
3. 转染时培养基中不能添加抗生素。
4. 阳离子脂质体应该在4℃保存，要注意避免多次反复长时间开盖，因为可能会导致脂质体氧化而影响转染效率。
5. 需优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂量以得到最大的转染效率。DNA和的比例，通常推荐是1:2 或者1:3。

储存条件：4℃，有效期一年。

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