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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃ to -80℃
- 保质期:
12个月
- 英文名:
Human GFRA3 / GFR-alpha-3 Protein (His Tag)
- 库存:
99
- 供应商:
北京义翘神州科技股份有限公司
- 规格:
100 µg/1 mg
| 规格: | 100 µg | 产品价格: | ¥4520.0 |
|---|---|---|---|
| 规格: | 1 mg | 产品价格: | ¥29480.0 |
蛋白名称:Human GFRA3 / GFR-alpha-3 Protein (His Tag)
蛋白构建:A DNA sequence encoding the human GFRa3 (NP_001487.2) (Met 1-Trp 382) was expressed, fused with the a C-terminal polyhistidine tag.
表达宿主:HEK293 Cells
蛋白纯度:> 90 % as determined by SDS-PAGE
蛋白活性:0
蛋白内毒素:< 1.0 EU per μg of the protein as determined by the LAL method
预测N端:Asp 32
蛋白分子量:The recombinant human GFRa3 consists of 362 amino acids and predicts a molecular mass of 40.8 kDa. As a result of glycosylation, the apparent molecular mass of rhGFRa3 is approximately 50 kDa in SDS-PAGE under reducing conditions.
蛋白NP号:NP_001487.2
蛋白氨基酸序列:Met1-Trp382
蛋白标签:C-His
蛋白保存条件:Store it under sterile conditions at -20℃ to -80℃. It is recommended that the protein be aliquoted for optimal storage. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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文献和实验His 标签蛋白纯化效果不理想,宝宝心里苦呀。今天,小编来跟大家一起找找原因。 纯化所得组分中没有收集到重组的His标签蛋白。该问题主要可以分为以下两个方面: 1、His标签蛋白没有结合到填料上就流穿了 原因一 超声的功率不对。超声功率过高,容易导致蛋白炭化;功率过低,蛋白释放不出来。 建议 改变超声功率,同时可以在超声前加入溶菌酶。 原因二 结合缓冲液条件不合适。 建议 检查结合缓冲液中是否有影响结合的因素,如:金属离子螯合剂、强还原剂、过高的咪唑浓度。同时,优化缓冲液的pH、盐
行 HIS 标签的捕获。 2、HIS标签蛋白结合了,但是洗脱不充分 原因一 洗脱条件太温和。 建议 增加咪唑的浓度或选择咪唑线性梯度洗脱,或者通过降低 pH 寻找最佳洗脱条件。需要注意的是,pH 低于 3.5 容易导致镍离子脱落。 原因二 蛋白柱上沉淀。 建议 1 降低蛋白浓度。可以减少上样量,或者采用咪唑线性而非步级梯度洗脱,增加蛋白稀释度。 建议 2 试用去污剂或者改变 NaCl 的浓度,或者使用变性剂 (4-6M 盐酸胍或 4-8M 尿素) 在变性条件下洗脱。 原因三 非特异性的疏水或者其他相互
。 2. 亲和层析:rHuIFN-α2a粗提物用pH7.2,0.15mol/L PBS 透析过夜,上样于经pH7.2,0.15mol/L PBS平衡的亲和层析柱,流速0.5ml/分,然后用大量PBS流洗至流出液OD280≤0.02,再用pH2.4,0.1mol/L甘氨酸-HC1洗脱,洗脱液立即转至pH7.2,0.15mol/LPBS中透析过夜,测定蛋白浓度、纯度和活性。 三、保存方法 1. 亲和柱的再生:先后用10个柱床体积、含0.5mol/L
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