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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
二年
- 目录编号:
WE0121
- 库存:
227
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
Taq Antibody
- 抗体名:
Taq酶抗体
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京Taq酶抗体价格是高品质的一抗产品,由北京百奥莱博供应,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多Taq酶抗体等一抗产品请联系我司咨询订购。
名称:北京Taq酶抗体价格
产地:国产|进口
英文名:Taq Antibody
规格:500U|2500U
编号:WE0121
本品是抗Taq酶鼠单克隆抗体,适用于Hot Start PCR。Taq Antibody与Taq酶结合后能抑制DNA聚合酶活性,进而能够在低温条件下有效抑制引物的非特异性退火及引物二聚体引起的非特异性扩增。Taq Antibody在PCR反应最初的DNA变性步骤中变性,DNA聚合酶活性恢复,达到热启动效果。因此无需对Taq酶抗体进行特殊失活处理。
产品特点;
1、在37℃,可抑制>95%的聚合酶活性。
2、可提高PCR反应的特异性和灵敏性,包括复杂的人基因组DNA或cDNA模板,低拷贝的模板,多重PCR等。
3、PCR反应速度快于普通化学修饰的聚合酶。
活性定义:Taq Antibody与Taq DNA Polymerase混合,25℃孵育15 min后,将在37℃,30 min条件下抑制97%以上的1 U的Taq DNA Polymerase活性的Taq Antibody量定义为1U。
使用方法:
将Taq DNA Polymerase和Taq Antibody等体积混合,20-25℃下放置15 min冰上待用。
注意:通过实验,我们建议Taq Antibody和 Taq DNA Polymerase混合的分子数之比为13:1较为合适,实际操作中由于引物、目的产物或Taq DNA Polymerase不同,可以摸索一系列的比例以得到最合适的结果。
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增300 bp的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 |
| 10×PCR Buffer | 5μl |
| dNTP Mix,10μM each | 1μl |
| Forward Primer,10μM | 1μl |
| Reverse Primer,10μM | 1μl |
| Template DNA | 4μl |
| Taq酶和抗体的混合液 | 0.36μl |
| ddH2O | up to 50μl |
2、PCR反应条件,可以按照各种PCR用DNA Polymerase的常规PCR反应条件进行PCR反应。
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2 min | |
| 变性 | 94℃ | 30 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 30 s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2 min |
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
北京Taq酶抗体价格极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·组织蛋白抽提试剂盒
编号:WE0260
英文名称:Tissue Protein Extraction Kit
规格:25次|100次
本试剂盒应用于组织样本的总蛋白提取。提取蛋白之前可根据具体实验需要加入蛋白酶抑制剂、盐、还原剂、螯合剂等成分。使用该提取液提取的组织蛋白,可进行蛋白活性分析、免疫检测、蛋白纯化等下游操作,并可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。试剂盒中带有蛋白酶抑制剂混合物,可有效避免蛋白提取过程中蛋白的降解。
试剂盒组成:
| 组份 | 25次 | 100次 |
| Tissue Protein Extraction Reagent | 25ml | 100ml |
| Protease Inhibitor Cocktail | 250μl | 1ml |
保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:室温
注意事项:
1、本产品适用于提取心肌、骨骼肌、肾脏、前列腺、皮肤、结肠、肝脏等软组织。
2、为防止蛋白降解,所有的操作尽量在冰上进行。
3、使用本产品提取蛋白后,可采用BCA、Bradford、Lowry法进行蛋白定量。
4、为了获得实验最佳效果,请根据实验调整最佳使用量。
使用方法:
1、请在实验前取出Tissue Protein Extraction Reagent进行预冷。
2、取适量Tissue Protein Extraction Reagent,抽提蛋白2-3分钟按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail,即1×工作液。
3、1 g组织加入10ml 1×工作液匀浆处理(抽提试剂的使用量可根据组织不同而调整)。若需要浓缩的蛋白提取物,可适当减少组织蛋白抽提试剂使用量。
4、冰上孵育20分钟(冰上放置时间可根据组织不同而调整)。
5、10000×g 离心15-20分钟。
6、转移上清至新管中,进行下一步的蛋白含量测定、纯化及分析。
储存条件:-20℃
北京Taq酶抗体价格关键词:WE0121,抗体,Taq酶抗体
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·实时荧光定量PCR的预混体系(探针法)
编号:WE0144
英文名称:BaldStar TaqMan Mixture
规格:1ml|5ml
本品是专用于探针法(TaqMan,Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系,浓度为2×,包含BaldStar Taq DNA Polymerase、PCR Buffer、dNTPs和Mg2+,操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后cDNA靶序列检测,如基因表达分析,拷贝数分析,SNP基因型分析等,适用于不同类型探针法荧光定量。本品含有的BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶,在常温下没有聚合酶活性,有效避免了在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增,酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的PCR缓冲体系与热启动酶的组合,显著提高了PCR的扩增效率,荧光信号更强,灵敏度更高,可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围,对目的基因定量更准确。适用于无需ROX作为校正染料的所有荧光定量PCR仪。
ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差,一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同,因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0144):
Roche LightCycler 480,Roche LightCyler 96,Bio-rad iCyler iQ,iQ5,CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0145):
ABI Prism7500/7500 Fast,QuantStudio® 3 System,QuantStudio® 5 System,QuantStudio® 6 Flex System,QuantStudio® 7 Flex System,ViiA 7 system,Stratagene Mx3000/Mx3005P,Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0146):
ABI Prism7000/7300/7700/7900,Eppendorf,ABI Step One/Step One Plus等。
产品组成:
| 组份 | WE0144-5ml | WE0145-5ml | WE0146-5ml |
| 2×BaldStar TaqMan Mixture | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
| 50×Low ROX | - | 200μl | - |
| 50×High ROX | - | - | 200μl |
| ddH2O | 5×1ml | 5×1ml | 5×1ml |
注意事项:
1.使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2.避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃,避光。如果在短期内需要频繁使用,可在2~8℃保存。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系:
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×BaldStar Taq Man Mixture | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Probe,10μM | 1μl | 0.2μM |
| Template DNA | 2μl | |
| 50×Low ROX or High ROX(可选) | 1μl | 1× |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果,可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度,与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关,实际使用时请参照仪器说明书,或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照,因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同,根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。
2、PCR反应程序:
注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!
两步法PCR:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 35-40个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min |
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序,若因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试进行三步法PCR扩增,退火温度请以 56℃-64℃的范围作为设定参考。
储存条件:-20℃,避免反复冻融
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文献和实验【鸡毛蒜皮】之巧用PCR—重组质粒的快速高通量筛选近几年,随着国内更多的公司掌握了Taq酶的制备技术,市场竞争进入白热化,Taq酶的价格一路猛跌,有的公司甚至推出跳楼价—1毛钱一单位。且不说具体哪个公司的质量好,单单从价格上就已经让人感觉到了类似北京冬天的大白菜和夏天的西红柿的味道。从另外一个方面来看,限制型内切酶的价格却多年不变,我们曾经一度以价格优势占领大片国内市场并把内切酶普及到更多实验室的华美公司近几年渐渐从人们的视线中淡出,而近两年崛起的大连Takara的东西质量不错,在价格上接
方法:1. DNA模板的质量问题a. 模板提取不完整,其中不含你的目的基因,或目的基因含量太低。这个情况下应该使用较为新鲜的样本以及较为温和的提取方法来降低DNA模板因在提取过程中损伤情况。b. 模板里面残留某种试剂成份,可能抑制Taq聚合酶的活性,如果是这种情况,可以用试剂盒把模板再纯化一下,或将模板做个梯度稀释以确定最佳的模板量。2. DNA聚合酶的影响a. Taq酶具有较高的错误率,导致产物3’端出现错配碱基,DNA合成提前结束。这时应该使用一些错配率更低的耐热聚合酶,如klentaq、pfu、rTth
黄璐琦 王敏 周长征* 李念华** 何希荣 杨滨 (中国中医研究院中药研究所生药室,北京 100700;*北京中医药大学中药学院 药用植物教研室,北京 100029;**中国科学院植物研究所,北京 100044) 摘要 以细辛类药材的鉴别为例,对RAPD方法在药材鉴别中所存在的问题探讨,结果表明药材DNA模板浓度,降解程度及药材的产地均对PAPD产物有不同程度的影响,从而提出选择适宜的药材DNA模板浓度,筛选合适的引物采用对照组聚类分析等方法来消除上述因素
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