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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 亚型:
IgG1
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 保质期:
二年
- 目录编号:
WE0336
- 库存:
414
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 抗体英文名:
Anti His-Tag Mouse Monoclonal Antibody
- 抗体名:
抗His标签鼠克隆抗体
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括抗His标签鼠克隆抗体现货供应在内的一系列抗体抗原产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:抗His标签鼠克隆抗体现货供应
英文名:Anti His-Tag Mouse Monoclonal Antibody
编号:WE0336
品牌:百奥莱博
规格:100μl
产地:国产|进口
该抗体可高度特异识别重组蛋白C末端或N末端和内部的六个连续组*酸标签,而不受邻近*基酸组成的影响,可用于检测各种表达载体表达的His-Tag融合蛋白。
抗体类型:鼠单克隆抗体IgG1
免疫原:人工合成(His)6多肽
应用范围:
WB(1:500-5000)
IF/IHC(1:50-200)
ELISA(1:200-20000)
Dot(1:500-5000)
IP(2µg - 5µg)
我公司的抗His标签鼠克隆抗体现货供应,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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抗His标签鼠克隆抗体现货供应关键词:WE0336,抗,抗His标签鼠克隆抗体
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抗His标签鼠克隆抗体现货供应关键词:WE0336,抗,抗His标签鼠克隆抗体
·cDNA第一链合成试剂盒
编号:WE0132
英文名称:BalbScript cDNA Synthesis Kit
规格:100次
本试剂盒是专为两步法RT-PCR第一步实验配制的cDNA第一链合成试剂盒。该试剂盒中使用的BalbScript逆转录酶是M-MLV由来的新型高效逆转录酶,新颖突变位点大幅提升酶的转录活性,cDNA第一链合成的效率和产量更高,可利用pg级的总RNA或mRNA合成cDNA第一链。点突变消除RNase H活性,酶的延伸性能提高,有效改善逆转录酶与RNA模板的亲和力,可获得长至12 kb的cDNA。精心优化的RT Buffer使逆转录酶应用范围更广,对后续的PCR以及定量PCR实验兼容性高。该试剂盒配备所有逆转录试剂,使用简单方便。适用于第一链cDNA的合成和后续的RT-PCR、RT-qPCR,以及全长cDNA文库的构建等。
试剂盒组成:
| 组份 | 100次 |
| BalbScript,200 U/μl | 25μl |
| 5×RT Buffer | 120μl |
| Primer Mix | 60μl |
| dNTP Mix,2.5 mM Each | 120μl |
| DTT,0.1 M | 60μl |
| RNase-Free Water | 1ml |
产品特点
1、高效的逆转录效率:新颖突变位点大幅提升酶活性能,获得更高产量的cDNA。
2、良好的延伸能力:点突变消除RNase H活性,改善逆转录酶与RNA模板的亲和力,可获得长至12 kb的cDNA。
3、灵敏度高:可利用pg级的总RNA或mRNA模板合成cDNA第一链。
4、使用方便:逆转录试剂盒中已配备所有逆转录试剂,仅需准备模板即可轻松完成逆转录。
注意事项:
1、在操作过程中应避免RNase污染,防止RNA降解或实验中的交叉污染,建议在专门的区域进行RNA操作,使用专门的仪器和耗材,操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套。
2、实验尽量使用一次性塑料器皿,若使用玻璃器皿,应使用0.1%DEPC(焦碳酸二乙酯)水溶液在37℃处理12小时,并在120℃下高压灭菌30分钟后使用,或者将玻璃器皿在180℃下干热灭菌60分钟后使用。实验中用到的无菌水应使用0.1%的DEPC处理后进行高压灭菌。
3、本试剂盒中的所有试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。所涉及的酶类使用后应尽快放回-20℃,避免反复冻融。
4、若起始RNA的量小于50ng,建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0223。
操作步骤:
注意:1ng-5μg总RNA可建立20μl反应体系,如果总RNA量大于5μg,请按比例扩大反应体系。
I.逆转录操作步骤:
1、将RNA模板、Primer Mix、dNTP Mix、DTT、RT Buffer、BalbScript和RNase-FreeWater溶解并置于冰上备用。
2、根据以下表格配制反应体系,总体积为20μl。
| 试剂 | 20μl反应体系 | 终浓度 |
| dNTP Mix,2.5 mM Each | 4μl | 500μM Each |
| Primer Mix | 2μl | |
| RNA Template | Xμl | 50 pg-5μg |
| 5×RT Buffer | 4μl | 1× |
| DTT,0.1 M | 2μl | 10 mM |
| BalbScript,200 U /μl | 1μl | |
| RNase-Free Water | up to 20μl |
注意:
1)若起始RNA的量小于50ng,则建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0223。
2)Primer Mix由Oligo(dT)和Random Primer配制而成。
3、涡旋震荡混匀,短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
4、cDNA合成反应条件:
1)若下游进行荧光定量PCR检测,42℃孵育15分钟,85℃孵育5分钟。
2)若下游进行普通PCR检测,42℃孵育30-50分钟,85℃孵育5分钟。
注意:对于二级结构复杂或GC含量高的模板,可以提高逆转录温度至50℃,增强逆转录效率。
5、反应结束后,短暂离心,置于冰上冷却。
6、逆转录产物可直接用于PCR反应和荧光定量PCR反应,或置于-20℃长期保存。
II.若逆转录效率低,或RNA模板二级结构复杂、GC含量高时,建议采用以下步骤:
1、将RNA模板、Primer Mix、dNTP Mix、DTT、RT Buffer、BalbScript和RNase-FreeWater溶解并置于冰上备用。
2、根据以下表格配制反应体系,总体积为13μl 。
| 试剂 | 20μl反应体系 | 终浓度 |
| dNTP Mix,2.5 mM Each | 4μl | 500μM Each |
| Primer Mix | 2μl | |
| RNA Template | Xμl | 50 pg-5μg |
| RNase-Free Water | up to 13μl |
3、70℃孵育10分钟,迅速冰浴2分钟。
4、短暂离心,使管壁上的溶液收集到管底。
5、继续向以上反应液中加入以下试剂:
| 试剂 | 20μl反应体系 | 终浓度 |
| 5×RT Buffer | 4μl | 1× |
| DTT,0.1 M | 2μl | 10 mM |
| BalbScript(200 U/μl) | 1μl |
注意:
1)若起始RNA的量小于50ng,则建议加入RNA酶抑制剂(RNasin)。本试剂盒并未提供,如需要可单独向本公司订购,货号:WE0223。
2)Primer Mix由Oligo(dT)和Random primer配制而成。
6、进行cDNA第一链合成:
1)若下游进行荧光定量PCR检测,50℃孵育15分钟,85℃孵育5分钟。
2)若下游进行普通PCR检测,50℃孵育30-50分钟,85℃孵育5分钟。
7、反应结束后,短暂离心,置于冰上冷却。
8、逆转录产物可直接用于PCR反应和荧光定量PCR反应,加入量应小于PCR反应体系的1/10,或置于-20℃长期保存。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
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文献和实验以单克隆抗体为基础的免疫治疗 第1代单抗诞生于1975年,来源于小鼠的B细胞杂交瘤,称为鼠源单抗。但人的免疫系统会识针对此类识别单抗产生人抗鼠抗体,将其清除出体外而限制了它的应用。随后研制了人源化单抗,并于1988年进行了第1次商业性的临床试验。人源化单抗与鼠源单抗相比,具有以下的优点:特异性较强;不易发生过敏反应及免疫复合性疾病;在人体内维持的时间较长;可制备用于人的抗独特型抗体。制备人源化单抗可以采用人―鼠杂交瘤技术、人―人杂交瘤技术、EB病毒转化技术、EB病毒转化
图 1 实验流程与常见问题索引 Q1:染色结果呈阴性,是怎么回事? (1)抗体来源选择错误:本试剂盒二抗为抗兔/鼠,请确保一抗来源的种属为兔源或鼠源。 (2)组织切片本身不存在目的蛋白:可通过 The Human Protein Atlas 数据库或 UniProt数据库查询目的蛋白在细胞或组织中的表达情况。 (3)抗体浓度和质量问题:提高抗体工作浓度或延长孵育时间;确认抗体可进行IHC实验,通过非IHC实验排除抗体质量问题。 (4)脱蜡不完全:可根据切片上是否存在透明颗粒,判断是否存在脱蜡
可);如果一抗是从兔血清里制备的兔源多克隆抗体,则相应的二抗需要选择抗兔的二抗。即根据一抗的物种来源选择相应的抗该物种的二抗。艾美捷能为您提供最全的抗不同种属的原装进口二抗,包括抗小鼠、大鼠、兔、山羊、绵羊、人、豚鼠、猪、马、牛、鸡、鸭等二抗。【一抗的类别亚型】二抗需与一抗的类别或亚类相匹配。这通常是针对单克隆抗体而言。多克隆抗体主要是IgG类免疫球蛋白,因此相应的二抗就是抗IgG抗体。其中单克隆抗体的类别及亚类通常会在产品说明书中都会有描述,如果你的一抗是小鼠IgM,那么相应的二抗就应当是抗小鼠IgM
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