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- 详细信息
- 技术资料
- 保存条件:
室温(15~30℃)
- 保质期:
长期
- 英文名:
Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit
- 库存:
624
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买
产地:国产|进口
英文名:Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit
编号:WE0188
规格:4×96次
本试剂盒适用于从新鲜或冷冻全血(带有抗凝血剂,如柠檬酸盐、EDTA或肝素等)、血浆、血清、血沉棕黄层、骨髓、无细胞体液等样本中的总DNA,包括基因组DNA,线粒体DNA及病毒DNA。本试剂盒广泛的应用于临床样品的检测,可以同时处理96个样品,采用96孔吸附板可以特异性吸附结合DNA,经过纯化的DNA产量高、质量好,最大限度去除蛋白、色素、脂类及其他抑制性杂质污染,可直接用于PCR、Real-Time PCR、酶切和Southern Blot等实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer RCL | 2×500ml |
| Buffer GR | 2×50ml |
| Buffer GL | 2×50ml |
| Buffer GW1(浓缩液) | 2×52ml |
| Buffer GW2(浓缩液) | 2×50ml |
| Buffer GE | 60ml |
| 蛋白酶K | 90 mg |
| 蛋白酶K 储存液 | 2×5ml |
| 吸附板及收集板 | 4套 |
| 收集板 | 4块 |
| 封板膜 | 16张 |
保存条件:Buffer RCL 2~8℃,其他组分室温(15~30℃)。
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、向蛋白酶K 中加入9ml 蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量也下降。
3、第一次使用前应按试剂瓶标签说明先在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
4、使用前请检查Buffer GL是否出现结晶或者沉淀,如有结晶或者沉淀,请将Buffer GL于56℃水浴重新溶解。
5、实验前配制Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液,每200μl Buffer GL中加入20μl蛋白酶K ,该溶液最好现用现配,在使用前配制时间最多不超过1小时。
6、使用排枪时注意不要打湿96孔板孔口,以防止离心过程中有液体溅出产生交叉污染。
操作步骤:
1、样本处理:
a. 将200μl样本加到收集板中。不足200μl的样本,加Buffer GR补足至200μl。
b. 样本超过200μl,且不超过600μl时,将血液样本加到收集板中,加入样本2倍体积
的Buffer RCL,吹打20次混匀,加盖新的封板膜,3600 rpm(~1200×g)离心10分钟。揭去封板膜,吸弃上清(可留下100μl液体以避免吸到细胞沉淀)。再加入样本2倍体积的Buffer RCL,吹打10-20次混匀,加盖新的封板膜,3600 rpm离心10分钟。揭去封板膜,吸弃上清,剩余约200μl液体。
注意:
1)在收集板上做好标记,以方便后续实验对样品的辨识。
2)如果样品为鸟类的血液,建议样品用量少于10μl。
2、配制Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液:按照200μl Buffer GL中加入20μl的蛋白酶K 的比例配制,混匀。
3、向每孔中加入220μl Buffer GL与蛋白酶K 的混合溶液,吹打20次,混匀。加盖新的封板膜,短暂离心,使管壁和管盖上的液体集中到管底。
4、56℃孵育10分钟。
注意:孵育10分钟DNA的产量已经达到最大,继续延长孵育时间对DNA产量和纯度没有影响。
5、揭去封板膜,加入200μl无水乙醇,吹打20次,混匀。短暂离心,使管壁和管盖上的液体集中到管底。
6、将步骤5所得溶液全部加入到已装入收集板的吸附板中,若一次不能加完溶液,可分多次转入。3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液,将吸附板重新放回收集板中。
7、向吸附板每孔加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否加入无水乙醇),3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液,将吸附板重新放回收集板中。
8、向吸附板每孔加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否加入无水乙醇),3600 rpm离心5分钟。倒掉收集板中的废液,将吸附板重新放回收集板中。
9、3600 rpm离心10分钟,倒掉收集板中废液。将吸附板置于室温数分钟以彻底晾干。
注意:这一步的目的是将吸附板中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
10、将吸附板置于一个新收集板中,向吸附板每孔中间部位悬空加入80-200μl Buffer GE或灭菌水,室温放置2-5分钟,3600 rpm离心10分钟,收集DNA溶液,加盖新的封板膜。-20℃保存DNA。
注意:
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感,可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响,若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)离心之前室温孵育5分钟可以增加产量。
3)因为保存在水中的DNA会受到酸性水解作用的影响,如需长期保存,推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。
储存条件:室温(15~30℃)。
血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买极具性价比,此外,我公司正火爆促销以下产品:
·Western Blot封闭液Ⅰ(BSA)
编号:WE0306
英文名称:BSA Blocking Buffer
规格:500ml
Western Blot 实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,通常在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。本产品以BSA为基础,配合其他有效成份,可快速高效地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭,操作方便快捷。另外,本产品特别添加了蛋白稳定剂,可保证每次实验封闭效果稳定可靠。
注意事项:
1、每次使用时,必须保证封闭液将印迹膜完全浸没,以免影响封闭效果。
2、本产品含有防腐剂,操作时请佩戴手套进行防护。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、本产品无需稀释,开盖即用。
2、目的蛋白转移完毕后,将印迹膜放入容器中,加入适量BSA Blocking Buffer(以完全覆盖印迹膜为宜)。
3、室温孵育30分钟至2小时,必要时可2~8℃孵育过夜。
4、封闭结束后弃去BSA Blocking Buffer,进行Western Blot后续操作。
储存条件:室温
血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买关键词:血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板),Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit,WE0188
·高纯质粒中提试剂盒
编号:WE0163
英文名称:PlaPure Midi Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒提供一种简单、快捷、高效的提取质粒的方法,在碱裂解法裂解细胞的基础上,采用独特的硅基质膜吸附技术和试剂配方,通过离心吸附柱在高盐状态下高效专一的结合溶液中的质粒DNA,经过两步洗涤,一步洗脱,最大限度的去除蛋白质、基因组、RNA和其他杂质。得到的质粒DNA可直接用于细胞转染、PCR、酶切、测序、连接等生物学实验。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 |
| Buffer P1 | 30ml |
| Buffer P2 | 30ml |
| Buffer N3 | 40ml |
| Buffer PB | 10ml |
| Buffer PW(浓缩液) | 10ml |
| Buffer EB | 10ml |
| RNase A(10 mg/ml) | 600μl |
| 吸附柱DL及收集管 | 50套 |
自备试剂:无水乙醇。
实验前准备及重要注意事项/strong>:
1、所有组分可在干燥、室温(15~30℃)环境稳定保存1年,更长时间保存可置于2~8℃,加入RNase A的Buffer P1 置于2~8℃可稳定保存6个月。
2、第一次使用前,将RNase A溶液全部加入到Buffer P1中,混匀,置于2–8℃保存,使用前需在室温中放置一段时间,恢复至室温后使用。
3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer PW中加入无水乙醇。
4、使用前若发现Buffer P2、Buffer N3、Buffer PB有沉淀,可在37℃水浴几分钟,即可恢复澄清(请勿剧烈晃动Buffer P2)。
5、注意不要直接接触Buffer P2 和Buffer N3,使用后应立即盖紧盖子。
6、提取质粒的量和纯度与细菌培养浓度、菌株种类、质粒大小、质粒拷贝数等因素有关。
7、所有离心步骤均可在室温下进行。
操作步骤:
1、取5-15ml过夜培养的菌液加入离心管(自备)中,13000rpm(~~~16200×g)离心1分钟收集菌体沉淀,尽量吸弃上清。
注意:质粒拷贝数较低或>10 kb时,可以使用更多菌液通过二次离心将菌体沉淀收集到同一个离心管中,同时后续所加试剂Buffer P1、P2及N3的量需加倍。所加试剂的量必须能够充分裂解菌体,菌体过多、裂解不充分都会降低质粒的提取效率。
2、向留有菌体沉淀的离心管中加入500μl Buffer P1(请先检查是否已加入RNase A),使用移液器或涡旋振荡器充分混匀,悬浮菌体沉淀。
注意:如果菌块未彻底混匀,将会影响裂解效果,导致提取量和纯度偏低。
3、向离心管中加入500μl Buffer P2,温和地上下颠倒混匀6-8次,使菌体充分裂解,室温放置3-5分钟。此时溶液应变得清亮粘稠。。
注意:温和混匀,不要剧烈震荡,以免打断基因组DNA,造成提取的质粒中混有基因组DNA片段。并且此步骤所用时间应不超过5分钟,避免质粒受到破坏。
4、向离心管中加入700μl Buffer N3,立即上下颠倒混匀6-8次,此时出现白色絮状沉淀,室温放置5分钟。13000rpm离心10分钟。
注意:Buffer N3 加入后应立即混匀,避免产生局部沉淀。
5、将步骤4中所得的上清液转移到已装入收集管的吸附柱DL中,13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
注意:吸附柱的最大容积为750μl,如果样品体积大于750μl可分批加入。
6、向吸附柱中加入150μl Buffer PB,13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液,将吸附柱重新放回收集管中。
7、向吸附柱中加入750μl Buffer PW(请先检查是否已加入无水乙醇),13000rpm离心1分钟,倒掉收集管中的废液。
8、将吸附柱重新放回收集管中,13000rpm离心1分钟。
注意:这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除,乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9、将吸附柱置于一个新的离心管(自备)中,向吸附膜中间部位加入100-200μl Buffer EB,室温放置2-5分钟,13000rpm离心2分钟,将质粒溶液收集到离心管中。-20℃保存质粒。
注意:
1)为了增加质粒的回收效率,可将得到的溶液重新加入到吸附柱中,室温放置2-5分钟,13000rpm离心2分钟。将质粒溶液收集到离心管中。
2)洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若用水做洗脱液,应保证其pH值在7.0-8.5范围内(可以用NaOH将水的pH值调到此范围),pH值低于7.0会降低洗脱效率。
3)质粒拷贝数较低或>10 kb时,Buffer EB在65-70℃水浴预热,适当延长吸附和洗脱的时间,可以增加提取效率。
储存条件:室温(15~30℃)
血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板)哪里买关键词:血液基因组DNA批量提取试剂盒(96孔板),Blood Genomic DNA Batch Extraction Kit,WE0188
·2×Babuddy MasterMix(含染料)
编号:WE0110
英文名称:2×Babuddy MasterMix(With Dye)
规格:1ml|5ml
本品是由Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase、PCRBuffer、Mg2+、dNTPs以及PCR稳定剂和增强剂组成的预混体系,浓度为2×。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase是一种快速、高扩增效率的高保真DNA聚合酶,具有5"-3"DNA聚合酶活性和3"-5"外切核酸酶活性。经过改造的聚合酶其活性区域融合有一段聚合增强结构域,独特的结构极大提升了保真性和延伸速度。Babuddy Super Fidelity DNA Polymerase的保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍,是普通Pfu的6倍。其延伸速率为15-30s/kb,成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷,大大缩短了反应时间。
本品特别适合于在基因克隆实验中扩增长片段DNA,尤其在扩增>10 kb的DNA片段时,优势更加明显,所扩增的片段最长可达20 kb。预配好的PCR混合液使操作更加简单快捷,可最大限度地减少人为误差和污染。
使用本产品扩增得到的PCR产物的3"端不带有“A”碱基,可直接克隆于平末端载体中。如需进行T/A克隆,需在PCR产物末端添加“A”后进行克隆。本产品具有延伸速度快、扩增效率高、保真性强的特点。适用于基因克隆、基因定点突变、SNP等实验。本产品已加入染料(蓝色),反应结束后可直接进行电泳检测,无需再使用上样缓冲液。
产品特点:
1、高保真性:保真性是普通Taq DNA Polymerase的50倍,普通Pfu的6倍。
2、扩增速度快:其延伸速率为15-30sec/kb,成功克服了普通Pfu酶扩增效率低、扩增速度慢的缺陷。
3、特别适合于扩增长片段:扩增的片段长度可长达20kb。
产品组成:
| 组份 | 1ml | 5ml |
| 2×Babuddy MasterMix(With Dye) | 1ml | 5×1ml |
| ddH2O | 1ml | 5×1ml |
注意:2×Babuddy MasterMix含有Babuddy DNA Polymerase,2×PCR Buffer, 3 mM MgCl2和400μM dNTP mix。
使用方法:
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 20μl反应体系 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 2×Babuddy MasterMix | 10μl | 25μl | 1× |
| Forward Primer,10μM | 1μl | 2.5μl | 0.5μM |
| Reverse Primer,10μM | 1μl | 2.5μl | 0.5μM |
| Template DNA | 适量 | 适量 | <250ng |
| ddH2O | up to 20μl | up to 50μl |
a.模板:在50μl PCR反应体系中,DNA模板的建议用量为低复杂度模板(如质粒DNA,λDNA等)1 pg- 10ng,高复杂模板(如基因组DNA)50-250ng。
b.引物:引物浓度请以终浓度0.2-1.0μM作为设定范围的参考,推荐终浓度为0.5μM。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
常规三步法PCR反应:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 98℃ | 30 s-3 min | |
| 变性 | 98℃ | 5-10 s | 25-35 个循环 |
| 退火 | 45-72℃ | 10-30 s | |
| 延伸 | 72℃ | 2-4 kb/min | |
| 终延伸 | 72℃ | 5-10 min |
a.变性:简单模板的预变性温度为98℃,预变性时间为30 s。对于比较复杂的模板,预变性时间可延长至3分钟。
b.退火:使用本产品时,退火温度设定的基本原则是,当引物长度小于或等于20 nt时,退火温度为引物最低的Tm;当引物长度大于20 nt时,退火温度应在最低Tm的基础上以Tm+3℃退火10-30 s。当无法得到理想的扩增效率时,应以最低的Tm值逐步提升至模板延伸温度。对于Tm高的引物可以使用两步法PCR。
c.延伸:本产品中所包含的Babuddy DNA Polymerase的扩增效率为2-4 kb/min,复杂性低的模板可用4 kb/min,复杂性高的基因组DNA模板,延伸时间则应为2 kb/min,对于一些cDNA模板,延伸时间可增加到1.5 kb/min。
d.循环次数:可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以,在保证产物得率的前提下,应尽量减少循环次数。
当引物的退火温度较高时,建议使用两步法进行PCR扩增:
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 98℃ | 30 s-3 min | |
| 变性 | 98℃ | 5-10 s | 25-35 个循环 |
| 延伸 | 72℃ | 2-4 kb/min | |
| 终延伸 | 72℃ | 5-10 min |
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
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风险提示:丁香通仅作为第三方平台,为商家信息发布提供平台空间。用户咨询产品时请注意保护个人信息及财产安全,合理判断,谨慎选购商品,商家和用户对交易行为负责。对于医疗器械类产品,请先查证核实企业经营资质和医疗器械产品注册证情况。
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