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北京磁珠法游离DNA提取试剂盒现货价格

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  • ¥150 - 2370
  • 百奥莱博
  • 北京
  • WE0204-EST
  • 2025年07月13日
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    • 文献和实验
    • 技术资料
    • 保存条件

      室温(15~30℃)

    • 保质期

      长期

    • 英文名

      MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit

    • 库存

      367

    • 供应商

      北京百奥莱博科技有限公司

    特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

    北京百奥莱博专业生产销*(代"售")北京磁珠法游离DNA提取试剂盒现货价格,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。


    名称:北京磁珠法游离DNA提取试剂盒现货价格
    产地:国产|进口
    英文名:MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit
    规格:96次
    编号:WE0204
      本试剂盒适用于从血浆、血清、羊水、淋巴液、尿液等无细胞体液中简单、高效的纯化回收游离DNA(Free circulating/Cell-free DNA)。在高盐存在时,游离DNA结合于硅基包被的Magbeads表面。漂洗后,高纯度的游离DNA被洗脱于Buffer EB或去离子水中。游离DNA的得率与样品类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。纯化得到的游离DNA质量稳定、可靠,可用于定量PCR以及二代测序建库等下游实验。该试剂盒还可用于病毒DNA的提取。

    试剂盒组成

     
    组份 96次
    Buffer KCL 96ml
    Buffer KCW1(浓缩液) 72ml
    Buffer KCW2(浓缩液) 60ml
    Buffer EB 30ml
    蛋白酶K 2×25mg
    蛋白酶K 储存液 2×1.25ml
    Magbeads PN 4ml


    自备试剂:异丙醇、无水乙醇。

    实验前准备及重要注意事项/strong>:
    1、向蛋白酶K *(代"粉")末中加入指定用量(1.25ml/25mg)的蛋白酶K 储存液使其溶解,-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置,避免反复冻融,以免影响其活性。
    2、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取率低。
    3、第一次使用前应按照试剂瓶标签的说明在Buffer KCW1和Buffer KCW2中加入无水乙醇并做好标记。
    4、Magbeads严禁冰冻、离心。冰冻和离心可能会对Magbeads造成不可逆的损害。
    5、Magbeads在使用前一定要涡旋震荡20秒使其充分混匀。

    操作步骤
    第一次使用前请检查Buffer KCW1和Buffer KCW2中是否已加入无水乙醇。
    1、向1.5ml的离心管中加入20 ul 蛋白酶K ,之后加入300 ul血浆。
    2、向上一步的离心管中加入300 ul Buffer KCL,涡旋震荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃水浴锅中孵育10分钟。
    3、将上一步的离心管从水浴锅中取出,短暂离心后室温放置5分钟。
    4、向上一步的离心管中加入150 ul异丙醇,涡旋震荡混匀后短暂离心。之后向离心管中加入40 ul彻底混匀的Magbeads,涡旋震荡5秒钟后放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡10分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)或连续颠倒混匀10分钟。
    注意:如果样品量较多,可将异丙醇与Magbeads提前按比例混匀,之后同时加入裂解产物中。
    5、将上一步的离心管放于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后彻底弃去溶液(保持离心管固定于磁力架上),期间避免接触Magbeads。
    6、将离心管从磁力架上取下,加入500 ul Buffer KCL后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后弃去溶液。
    注意:如果样品为血清、羊水、淋巴液或尿液,Buffer KCL漂洗步骤可去除。
    7、将离心管从磁力架上取下,加入750 ul Buffer KCW1后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后弃去溶液,期间避免接触Magbeads。
    8、将离心管从磁力架上取下,加入750 ul Buffer KCW2后涡旋点震20秒或放于25℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡2分钟(震荡过程中确保Magbeads处于悬浮状态)。之后将离心管固定于磁力架上静置1分钟,待Magbeads完全吸附于离心管侧壁后轻轻颠倒磁力架将离心管盖上的杂质洗落后弃去溶液,期间避免接触Magbeads。
    9、重复步骤8。
    10、保持离心管固定于磁力架上,用移液器进一步去除离心管管底和管盖上的溶液,之后室温放置5-10分钟,使乙醇挥发干净。
    注意:如果离心管壁上有液珠,可向离心管中加入800 ul无水乙醇。盖盖后颠倒离心管,之后彻底去除无水乙醇。
    11、将离心管从磁力架上取下,加入30-100 ul Buffer EB或去离子水。涡旋震荡时Magbeads完全悬浮于洗脱液中后将其放入56℃、1500 rpm的恒温混匀仪上震荡洗脱10分钟或放于56℃水浴锅中孵育10分钟,期间每隔3分钟涡旋震荡10秒钟。
    12、将上一步的离心管放置于磁力架上静置2分钟,待Magbeads完全吸附后用移液器将洗脱液转移至新的离心管中-20℃保存备用。

    储存条件:室温(15~30℃)

    欲了解更多北京磁珠法游离DNA提取试剂盒现货价格的品牌、产地、价格及说明书等产品信息,请致电北京百奥莱博科技有限公司,我们将竭诚为您服务,另外,以下产品正在火爆促销:

    ·HRP标记抗V5标签单克隆抗体
    编号:WE0334
    英文名称:HRP Conjugated Anti V5-Tag Mouse Monoclonal Antibody
    规格:20μl|100μl
    本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗V5标签鼠单克隆抗体,可用于检测V5-Tag(GKPIPNPLLGLDST)融合蛋白。本产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。

    抗体类型:鼠IgG
    免疫原:人工合成多肽
    标记物:HRP
    应用范围:WB(1:500-3000)、ELISA(1:1000-20000)

    ·RNA样本保存液
    编号:WE0404
    英文名称:RNAstore
    规格:100ml|500ml
    本产品是一种新型的RNA稳定试剂,可迅速渗入组织保护RNA。其迅速的保护作用确保了下游基因表达分析结果的准确性。该试剂保护后的样本可长期保存,即使是多次反复冻融RNA也不会降解。经保护的RNA在37℃下可保存2天,18-25℃下可保存7天,2~8℃下可保存4周,-20℃或-80℃条件下可长期保存。经该产品保存的组织可用于所有关于RNA的后续实验,包括总RNA的提取,micro RNA的提取,mRNA的提取等。

    ·His标签蛋白纯化试剂盒(可溶性蛋白)
    编号:WE0267
    英文名称:His-Tagged Protein Purification Kit(Soluble Protein)
    规格:5ml
      本试剂盒包含Ni-Agarose填料、亲和柱空柱以及可溶性His融合蛋白纯化所需的全部试剂(细菌裂解液、蛋白酶抑制剂混合物、结合缓冲液和洗脱缓冲液组分),使用方便。该镍柱纯化系统对6×His-tag蛋白具有显著特异吸附能力,能够高效一步纯化带有6个组*酸亲和标签的蛋白。该系统具有4个Ni2+螯合位点,较只有3个螯合位点的Ni-IDA结合Ni2+更为牢固,有效防止纯化过程中Ni2+脱落且增强对His标签蛋白的结合能力,提高纯化效率。较高的基团密度,大大提高了蛋白载量。该系统在天然或变性条件下,对来源于各种表达系统(如杆状病毒,哺乳细胞,酵母以及细菌)中的His标签蛋白,均有很好的纯化效果。本产品已螯合镍离子,可直接用可溶性蛋白的纯化,使用方便,快捷。

    镍柱参数:
    支持物:CL-6B琼脂糖凝胶
    载量:20-30 mg His标签蛋白/ml填料
    粒径:50-160μM

    试剂盒组成
    组份 5ml
    Ni-Agarose Resin 5ml
    Bacterial Protein Extraction Reagent 65ml
    1 M Tris-HCl(pH7.9) 15ml
    1 M Imidazole 65ml
    3 M NaCl 120ml
    Protease Inhibitor Cocktail 700μl
    吸附柱(12ml) 一套

    保存条件:Protease Inhibitor Cocktail,-20℃;Ni-Agarose Resin,2~8℃,避免冷冻;其它组分,2~8℃

    注意事项
    1、在纯化之前采用电泳检测蛋白的可溶性,本试剂盒只适合于可溶性蛋白的纯化,如需纯化包涵体蛋白,请选择我公司的包涵体蛋白纯化试剂盒,货号为WE0266。
    2、缓冲液中不建议使用 β-巯基乙醇、DTT和EDTA。
    3、整个纯化过程中切忌凝胶脱水变干。
    4、为提高纯化效率,首先确定Binding Buffer和Elution Buffer中咪唑的最佳使用浓度。必要时可以使用线性或梯度浓度的咪唑浓度,Binding Buffer的范围为0-10 mM,洗脱缓冲液的范围为10-500 mM来进行。并通过SDS-PAGE或Western Blotting来检测目的蛋白的纯度。
    5、请使用高纯度的试剂配制缓冲液,并通过0.22μM或者0.45μM过滤器过滤。为避免柱子被堵塞,建议将裂解液进行离心,或者使用0.22μM或者0.45μM过滤器过滤。
    6、柱再生时,保证每步洗完后都要用足够的去离子水冲洗至中性。

    使用方法

    I 缓冲液的准备
    可溶性蛋白纯化缓冲液配方:



     
    组份 Tris-HCl(pH7.9) Imidazole NaCl
    Soluble Binding Buffer 20 mM 10 mM 0.5 M
    Soluble Elution Buffer 20 mM 500 mM 0.5 M


    II 组装层析柱
    1、将Ni-Agarose Resin填料混匀后加入层析柱,室温静置10分钟,待凝胶与溶液分层后,把底部的出液口打开,让乙醇通过重力作用缓慢流出。
    注意:
    1)填料的上层是乙醇保护层,将填料和乙醇一起混匀,以每ml填料纯化20-30mg His标签蛋白计算,取需要的填料与乙醇的混合液加入层析柱。
    2)如果乙醇不流出,可以给柱子一个外力,例如用大拇指对柱口轻轻按压一下,迫使乙醇流出。
    3)本实验都是通过重力作用使溶液流出。
    2、向装填好的柱中加入5倍柱体积的去离子水将乙醇冲洗干净后,再用10倍柱体积的Binding Buffer平衡柱子,平衡结束后即可上样。
    注意:柱体积指的是填料的体积。

    III 可溶性蛋白的纯化
    1、收集菌体后,每100 mg菌体(湿重)加入1-5ml细菌裂解液(每1ml 细菌抽提试剂中已加入10μl 蛋白酶抑制剂混合物),超声裂解菌体。
    注意:
    1)当提取物粘度高或提取蛋白为包涵体时,建议加入DNase I和Lysozyme。每1ml 细菌抽提试剂中加入1μl DNase I(1000U/ml),2μl Lysozyme(50 mg/ml),DNase I和Lysozyme可单独从我公司购买,货号:Lysozyme(#WE0214)、 DNase I(#WE0213A),如使用其它公司产品,请按照相应说明书操作。
    2)超声过程中保持菌液处于冰浴中,超声条件依赖于所使用的超声仪功率,探头种类,容器的大小形状,需实验中自己摸索,应避免连续超声导致的大量产热,可分成短时间,多次超声,通过一定的间隔时间避免溶液过热。最终菌液变清即可。
    2、10000 rpm,4℃离心3分钟,收集上清中的可溶性蛋白。
    3、用Binding Buffer将菌体裂解液等倍稀释后负载上柱,流速为10倍柱体积/小时,收集流穿液。
    注意:
    1)本试剂盒中附带有一块筛板,使用时先将筛板加至填料的上层,该筛板可用于杂质较多的蛋白的过滤,防止过多的杂蛋白堵塞柱子的作用。再将处理好的样品负载上柱,但是筛板放入柱子后就不易取出。
    2)通过控制加入的菌体裂解液的速度来控制流速。
    4、使用15倍柱体积的Soluble Binding Buffer冲洗柱子,洗去杂蛋白。
    5、使用适量Soluble Elution Buffer洗脱,收集洗脱峰。
    注意:洗脱峰可以分管收集,每1ml收集1管,并采用蛋白监测仪监测,收集洗脱峰。
    6、洗脱后,依次使用10倍柱体积的去离子水洗涤柱子,再用3倍柱体积的20%乙醇平衡(乙醇要将填料浸没),封柱后2~8℃保存。
    注意:如果是分段梯度洗脱,最大洗脱缓冲液中咪唑浓度未达到500 mM时,则使用浓度为500 mM的咪唑进行洗脱10倍柱体积后,再进行第6步的操作。

    Ⅳ 柱再生
    当填料使用多次后,结合效率会有所下降(表现为流速变慢或填料失去蓝绿色),可以用以下方法再生,提高填料的使用寿命和蛋白质的结合效率。
    1、使用2倍柱体积的6 M盐*(代"酸")胍冲洗后,使用3倍柱体积的去离子水冲洗。
    2、使用1倍柱体积的2% SDS冲洗。
    3、依次使用1倍柱体积的25%、50%、75%和5倍柱体积的100%乙醇冲洗,再依次使用1倍柱体积的75%、50%和25%的乙醇冲洗。
    4、使用1倍柱体积的去离子水冲洗。
    5、使用5倍柱体积含50 mM EDTA缓冲液(PH8.0)冲洗。
    6、使用3倍柱体积去离子水,3倍柱体积20%乙醇冲洗。
    7、2~8℃保存。
    8、再次使用前,需首先使用10倍柱体积去离子水冲洗,然后使用5个柱体积的50 mM NiSO4再生,3个柱体积的Binding Buffer平衡。

    储存条件:-20℃


    北京磁珠法游离DNA提取试剂盒现货价格关键词:WE0204,磁珠法游离DNA提取试剂盒,MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit


    ·水性封片剂
    编号:WE0317
    英文名称:Mounting Solution(Aqueous)
    规格:10ml
      在免疫组化切片染色中,有些显色底物(如AEC,AP-Red)生成的颜色产物以及一些核复染试剂(如核快红)为脂溶性,可溶于有机溶剂。因此,染色和复染过程中若用到此类试剂,就不适合用梯度酒精脱水、二甲*透明、中性树胶封片,而应使用水性封片剂进行封片。本产品适用于AEC、AP-Red染色,以及BCIP/NBT染色(核快红复染)后封片使用。

    注意事项
    1、本封片剂是水溶性的,凝固后再遇水仍可溶解。因此封好的组织片应避免与水接触,否则需要再次凝固或重新封片。
    2、本产品含有防腐剂,操作时应戴手套。

    操作步骤
    1、IHC染色结束后,擦干组织周围水分,加适量(一般约100μl)水性封片剂于组织上,使其覆盖整个组织表面。
    2、将切片放置于干净平整处,使封片剂凝固。封片剂完全凝固时间:室温1小时左右,65ºC 5-10分钟。

    实验图例:

    水性封片剂封片后显微照相效果(400倍放大)

    储存条件:室温


    北京磁珠法游离DNA提取试剂盒现货价格关键词:WE0204,磁珠法游离DNA提取试剂盒,MagDNA Free-Circulating DNA Extraction Kit

    丙*(代"烷")磺酸* Benzil 14533-63-2
    BTN130613 9°Nm DNA聚合酶 9°Nm DNA Polymerase
    单丙*(代"酮")葡萄糖 CBZ-D-Glu 18549-40-1
    ARB14013 绵羊主要组织相容性复合体(MHC)elisa测定使用说明书 Sheep major Histocomp*(代"a")tibility complex,mhc ELISA KIT
    脱落酸 Cinnamyl alcohol 21293-29-8
    甲叉双丙*(代"烯")酰胺 4-Aminoantipyrine 110-26-9
    ARB14255 猪免疫球蛋白A(IgA)尿液中含量检测 
    PY02-032  月桂基硫*(代"酸")盐胰蛋白胨肉汤(LST)  250克  
    ARB10368 人正常T细胞表达和分泌因子(RANTES/CCL5)elisa检测说明书 Human regulated on activation in normal t-cell expressed and secreted,rantes ELISA KIT
    DL-半胱*酸盐*(代"酸")盐一水物 TPN 96998-61-7
    9-*基吖啶盐*(代"酸")盐一水合物 Glycyrrhizic acid ammonium salt 52417-22-8
    BTN120697 青霉素G*盐溶液 Penicillin G Potassium Solution
    67-03-8 VitaminB1  维生素B1
    F030621 FITC标记兔抗山羊IgG抗体 Rabbit Anti-Goat IgG*FITC
    25322-68-3 PEG20000  聚乙二醇
    56-81-5 Glycerol   甘油
    6-甲基香豆素 Thermolysin from Bacillus thermoproteolyticus rokko 92-48-8
    鸟苷 5-Fluorouracil 118-00-3
    ARB10094 人D-乳酸(D-LA)酶联免疫定量检测 
    硫*(代"酸")铬* PNPG 7788-99-0
    L-天冬酰胺 N-Z-S-phenyl-L-cysteine 70-47-3

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