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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 免疫原:
重组V5标签
- 亚型:
IgG
- 形态:
液体
- 保存条件:
-20℃冻存,避光
- 克隆性:
多克隆
- 标记物:
HRP
- 保质期:
二年
- 目录编号:
WE0334
- 级别:
单克隆
- 库存:
921
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
- 宿主:
小鼠
- 应用范围:
WB,ELISA
- 浓度:
1mg/ml
- 靶点:
V5
- 抗体英文名:
HRP Conjugated Anti V5-Tag Mouse Monoclonal Antibody
- 抗体名:
HRP标记抗V5标签单克隆单克隆抗体
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京HRP标记抗V5标签单克隆抗体哪里卖是高品质的一抗产品,由北京百奥莱博供应,用于生化科学研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多HRP标记抗V5标签单克隆抗体等一抗产品请联系我司咨询订购。
名称:北京HRP标记抗V5标签单克隆抗体哪里卖
编号:WE0334
品牌:百奥莱博
产地:国产|进口
本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗V5标签鼠单克隆抗体,可用于检测V5-Tag(GKPIPNPLLGLDST)融合蛋白。本产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:鼠IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:500-3000)、ELISA(1:1000-20000)
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·高灵敏度ECL化学发光检测试剂盒
编号:WE0308
英文名称:eECL Western Blot Kit
规格:50ml|250ml
高灵敏度化学发光检测试剂盒是免疫印迹实验中与辣根过氧化物酶(HRP)配套使用的的高灵敏增强型检测试剂盒。该产品基于新一代增强型化学发光底物研制而成,在HRP的催化下产生高强度的信号,能够检测pg级别的抗原。灵敏度高、发光信号强烈持久,可以使用照相技术(X-光胶片曝光)或者其他成像方法(如荧光或化学发光成像仪)进行检测。
试剂盒组成:
| 组成 | 50ml | 250ml |
| eECL-A(Luminol Enhancer) | 25ml | 125ml |
| eECL-B(Peroxide) | 25ml | 125ml |
注意事项:
1、在与膜发生接触过程中,请佩戴手套且使用干净镊子等洁净器材,避免蛋白污染及高背景。
2、避光条件下,配制好的化学发光检测底物工作液可在室温下稳定保存8小时。阳光或其他强光会影响工作液,故应避免强光长时间的照射。正常实验室灯光短时间照射不影响工作液的使用。
3、百奥莱博提供多种蛋白转移用膜、封闭液、一抗、酶标二抗、缓冲液等,详情请查询公司网站。
操作步骤:
1、二抗孵育完毕后,将印迹膜充分洗涤。
2、根据需要量,将eECL-A和eECL-B按照1:1的比例等体积混合,配制为化学发光检测底物工作液(一张8 cm×6 cm的膜大约使用1ml工作液)。
3、弃去洗涤缓冲液,将发光底物工作液滴加在印迹膜上,确保工作液覆盖整张膜,室温孵育3-5分钟。
4、用移液器吸去多余发光底物工作液,将印迹膜置于两层干净的塑料薄膜之间,此过程应小心完成,避免膜与膜之间产生气泡。
5、在暗室内进行X-光胶片曝光,或将膜放置到化学发光成像仪内,按照仪器说明书进行检测。
| 问题 | 可能原因 | 解决方法 |
| 胶片反相(白色条带,黑色背景) | 系统中HRP过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 膜上出现棕色或黄色条带 | ||
| 暗室中看到强烈发光 | ||
| 发光信号持续时间过短 | ||
| 信号较弱或者无信号 | 发光反应系统中HRP 过多,消 耗底物过快,引起信号迅速降低 |
稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 抗原/抗体量不够 | 增加抗原/抗体使用量 | |
| 蛋白转移率低 | 优化转移系统 | |
| 高背景 | 系统中HRP 过量 | 稀释HRP标记物至少10倍以上 |
| 封闭不足 | 优化封闭程序 | |
| 封闭试剂选择不当 | 选择另一种封闭试剂 | |
| 冲洗不充分 | 增加冲洗时间,次数 | |
| 曝光过度 | 减少曝光时间 | |
| 抗原/抗体浓度过高 | 降低抗原/抗体使用浓度 | |
| 蛋白条带为点状 | 蛋白转移失败 | 优化转移过程 |
| 膜未平衡 | 按照说明书处理膜 | |
| 胶片与膜之间有气泡 | 曝光前去除所有气泡 | |
| 出现非特异条带 (高背景、信号维持时间较短) |
系统中HRP过多 | 稀释HRP标记物 |
| 出现非特异条带 (背景干净信号维持时间正常) |
一抗用量过多 | 进一步稀释一抗 |
| SDS 导致非特异结合 | 在实验过程中避免使用SDS |
储存条件:2~8℃,避光保存
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文献和实验表达低,而在其它组织未检测到。在使用Northern Blot技术检测miRNA的时候,对检测灵敏度要求比较高。给大家推荐一种基于多生物素信号放大的高灵敏度miRNA Northern Blot技术:RNA样本经过凝胶电泳分离后,转移至膜上;目标miRNA的表达通过生物素标记探针进行检测;生物素标记探针包含miRNA互补序列和标签序列两个部分,互补序列与miRNA结合,标签序列则与多生物素信号放大分子结合,实现对低丰度miRNA分子的高灵敏度检测。具体实验步骤如下: 1、RNA样品制备 总RNA的提取
增殖及计数分析 02 细胞鉴定和免疫分型 荧光标记的CD抗体(Abs)被广泛用于流式细胞术进行细胞识别和免疫分型,至少有15种人类T细胞亚型被描述出来(例如,CD4+,CD8+等)。Incucyte®利用相同的原理,对标记方法进行改进: 将抗CD抗体结合到同型匹配的带有荧光标签的Fc区域靶向Fab片段,便可通过简单的一步混合来完成标记。在检测中使用一种非干扰性的背景荧光抑制染料,以改善488 nm的荧光信号,保护细胞的同时提供更灵活的分析方案。 03 细胞激活和分化 免疫
酶、α-1抗胰蛋白酶或纤维蛋白原等高度丰富的血清蛋白都会干扰免疫分析。此外,标记检测抗体或示踪剂分析物是免疫分析中的常见做法。标签可以是酶(如碱性磷酸酶(AP)或辣根过氧化物酶(HRP))、荧光染料、放射性同位素、亲和力标签,如生物素,或者DNA(immuno-PCR中采用)。这些标签也会改变标记对象的属性,并带来新的干扰。 亲和力鉴别法消除干扰 以上提到的这些干扰有一个共同点:它们是由中低亲和力结合问题引起的。相反,一个好的抗体与其表位之间的特异性相互作用具有很高的亲和力。然而,即使足够
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