北京现货一步法快速WB试剂盒(兔源一抗)促销

特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域，致力于为客户提供包括北京现货一步法快速WB试剂盒(兔源一抗)促销在内的一系列分子生物学试剂产品，并提供一系列相关的技术服务。

名称：北京现货一步法快速WB试剂盒(兔源一抗)促销
产地：国产|进口
英文名：One Step Western Kit HRP(Rabbit)
品牌：百奥莱博
  本试剂盒是百奥莱博最新研发的Western Blot检测试剂盒，能够在1小时左右得到高质量的Western Blot结果，且操作简便、检测灵敏度高、背景低、不需再加入二抗、系统稳定性强。常规的Western Blot间接法检测过程(封闭、一抗结合和二抗结合)需要较长的时间，实验流程复杂且需要多步条件优化。胶上的蛋白转移到载体膜上后，使用试剂盒中的封闭液孵育5 min，再用抗体反应液处理后的一抗孵育载体膜，经洗涤三次(每次5 min)后，即可进行发光或显色检测。本试剂盒针对目的蛋白一抗为兔来源的实验系统使用。

组份	50次
Blocking Buffer	500ml
Antibody Pretreat Solution(HRP/Rabbit)	5×1ml
Dilution Buffer	500ml
Wash Buffer(10×)	500ml

注意事项：
1、客户需自己准备兔来源的一抗。
2、使用Blocking Buffer封闭液、Antibody Pretreat Solution(HRP/Rabbit)抗体反应液(兔)、Wash Buffer(10×)漂洗液之前请充分混匀。
3、漂洗液如在2～8℃保存时出现沉淀，请恢复到室温，把沉淀溶解后正常使用，1×漂洗液可在室温保存一个月。
4、建议转膜完成后用丽春红等试剂染色，并把膜上多余部分剪去以增加试剂的使用效率。
5、一抗和抗体反应液HRP(兔)需要通过预实验来确定最佳的稀释用量。
6、抗体反应液HRP(兔)、抗体稀释液和抗体用量可根据膜的大小按比例放大或减少。
7、加入一抗的抗体稀释液可以回收重复使用一次。特异性及亲和力低的抗体不建议重复使用。回收后抗体如在1-2天内使用放置在2～8℃，长期保存请在-20℃冻存，避免多次反复冻融。
8、如果存在较高背景的情况，请调整抗体的用量，并增加洗膜次数。
9、试剂盒内所有试剂请于2～8℃保存，避免冻融。

操作步骤：
本产品适用于转膜完成后的封闭及抗体孵育步骤，以5cm×8cm 膜为例：

1、漂洗液准备：取10ml Wash Buffer(10×)用蒸馏水稀释至100ml，即为1×Wash Buffer，待用。每次洗膜用8-10ml。
2、封闭：转膜完成后，将膜浸没到10ml Blocking Buffer中，室温封闭5分钟。
3、漂洗：倒掉封闭液，加入8-10ml 1×Wash Buffer，于摇床上用较大速度漂洗1分钟。
4、洗膜的同时可准备抗体孵育液：取Antibody Pretreat Solution(HRP/Rabbit)100μl到离心管中，加入兔源一抗3-10μg，枪头吸打至充分混匀，室温孵育5分钟。加入至10ml Dilution Buffer中，充分混匀。
注意：
1)一抗的用量也可根据抗体的稀释度来进行调整。以抗体的最终稀释度1:1000为例，取100μl抗体反应液HRP(兔)到EP管中，加入10μl一抗，加入到10ml 抗体稀释液中，充分混匀，室温孵育5分钟。
2)如果膜面积较小，可按比例减少抗体、反应液及稀释液的用量。
5、完成步骤3后，倒掉漂洗液，将一抗、Antibody Pretreat Solution(HRP/Rabbit)及Dilution Buffer混合而成的抗体孵育液加到膜上(确保孵育液完全浸没膜表面)，在摇床上以60 rpm左右的速度室温孵育40分钟。
6、弃去(回收)抗体孵育液，用配制的1×Wash Buffer漂洗3-5次，每次3分钟。
7、进行后续检测。建议采用ECL或者DAB法进行检测。

应用实例：


实例一 抗原为293T细胞全裂解液
A：普通WB对照：beta-actin兔多抗 3.3ug 室温孵育40min，洗膜后二抗羊抗兔-HRP(WE0394)1：10000稀释，室温40min，ECL(WE0308)曝光


实例二 抗原为293T细胞全裂解液
C：普通WB对照：PAK1，Epitomics兔单抗1：1000 室温孵育40min，洗膜后二抗羊抗兔-HRP(WE0394)1：10000稀释，室温40min，ECL(WE0308)曝光
D：一步法WB： Epitomics兔单抗1：1000 室温孵育40min，ECL(WE0308)曝光。

常见问题及解决方法：

问题	可能原因	解决方案
信号太弱或者 看不到条带	蛋白上样量太少	进行SDS-PAGE电泳时加大上样量。
	蛋白转膜效率太低	优化转膜时间或者电流，确保转膜时膜与胶之间没有气泡。
	一抗亲和力较低	增加膜在溶液中的孵育时间或者增加抗 体浓度可以增加信号
	一抗亲和力较低	对于低亲和力抗体来说，减少洗膜时间可以增加信号。由每次10 分钟，减少到每次5分钟可以增加信号。
背景偏高	一抗使用过量	减少一抗的使用量。
	一抗有非特异性结合或者 与封闭试剂有交叉反应	使用和二抗来源一致的血清或者无IgG的BSA。
	洗膜时间太短	增加洗涤的步骤可以进一步的降低背景。
	曝光显影时间过长	减少曝光时间。如果信号和背景都高，可以等待一段时间 ，等背景信号减弱后，再进行曝光。
	容器或者试剂被污染	每次洗涤的时候使用清洁的容器。带手套，使用清洁的镊子处理膜。

储存条件：2～8℃保存，避免冷冻

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·无毒RNA酶清除剂
编号：WE0222
英文名称：RNase Removal
规格：100ml
  本产品是一种高效的RNase灭活清洁剂。它含有多种成分，能高效灭活玻璃、塑料表面的 RNase污染，保障工作环境的清洁。本产品效力和速度远远高于常用的DEPC，可在5分钟内将固体表面的多达100μg的RNase彻底灭活。经RNase清除剂清洗过的容器、实验台面、枪头、电泳槽等，可确保不含RNase污染。

产品特点
1、无毒的RNase灭活剂；
2、可代替DEPC，去除固体表面的RNase。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、使用前请检查本产品是否出现沉淀，如有沉淀，请将溶液置于 37℃水浴重新溶解。
2、RNase 清除剂可直接使用，请勿稀释，稀释后会降低灭活效力。
3、操作人员在使用RNase 清除剂过程中要戴手套，避免皮肤直接接触。使用喷洒瓶时请戴口罩并在通风橱等通风环境下 进行，以防对人产生刺激。
4、请勿将RNase 清除剂用在易腐蚀的金属表面。

使用方法：

一、用RNase清除剂处理工作平台
直接将RNase清除剂喷于台面，普通吸水纸擦净，用水冲洗干净后用吸水纸擦净，晾干。

二、用RNase清除剂处理实验仪器
用浸有RNase清除剂吸水纸擦拭仪器表面，用水冲洗干净后用吸水纸擦干。 一些小的仪器部分可直接浸泡在RNase清除剂溶液中，用水冲洗干净后用吸水纸擦干。

三、用RNase清除剂处理玻璃和塑料器皿
将器皿浸泡在RNase清除剂溶液中或将RNase清除剂溶液喷洒在器皿表面，再用蒸馏水冲洗两次，倒立晾干后备用。如处理离心管可直接将RNase清除剂溶液加入离心管中，进行涡旋震荡，离心后去除RNase清除剂溶液，蒸馏水 冲洗两次，晾干后备用。

四、用RNase清除剂处理移液枪
根据生产厂家的使用手册卸下移液枪的前端， 留下接口塞和圈套后将其浸泡在RNase清除剂中，再用水冲洗干净， 晾干，将移液枪按使用手册组装好。

储存条件：室温(15～30℃)

我公司生产供应销*(代"售")的蛋白质研究产品正全系列现货促销，满分期待您的垂询选购北京现货一步法快速WB试剂盒(兔源一抗)促销。