线粒体提取试剂盒优惠促销

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线粒体提取试剂盒优惠促销是高品质的蛋白质研究产品，由北京百奥莱博供应，用于生化研究，本产品质量好，且极具价格优势，深为用户称道，了解更多线粒体提取试剂盒等蛋白质研究产品请联系我司咨询订购。

名称：线粒体提取试剂盒优惠促销
品牌：百奥莱博
编号：XH058
规格：50T/100T
二，说明
线粒体提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织（肝或脑组织）和硬组织（肌肉）以及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。
三，操作步骤
1. 样本处理
a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨组织20次；
b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800 × g 5~10 min离心收集细胞。计数。每次提取需要5 × 107个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨30~40次；
2. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4℃，1000× g 离心5 min；
3. 取上清，加入一新的离心管中，4℃，1000× g 再次离心5 min。
4．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 12,000 × g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底；
5. 在线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000× g 离心5 min；
6．取上清，加入一新的离心管中，4℃， 12,000 × g 离心10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底；
6. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。
四 注意事项：
1. 为保证获得完整的线粒体，第一是全程低温操作。第二是快速。第三，在不破坏亚细胞器的情况下破碎细胞是制备线粒体的最关键环节。与组织块相比，培养细胞特别是贴壁培养细胞在用玻璃匀浆器匀浆时较难破壁，因而要选用小容量玻璃匀浆器、间隙严密的研杵上下研磨培养细胞。
2. 以离心力g计算正确的离心速度，不同的离心机可据此精确计算离心速度。
3. 进行Western Blot和2D-胶电泳，可直接加入上样缓冲液裂解线粒体。
五 储存：四周内使用可4℃储存，长期置-20℃
转速与离心力换算
G＝1.11×(10-5)×R×[rpm]２
G为离心力，一般以ｇ（重力加速度）的倍数来表示；
[rpm] ２即：转速的平方； R为半径，单位为厘米。

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SP葡聚糖凝胶C-25 L-Tyrosine 61840-62-8
PY02-102  胰酪胨大豆肉汤培养基  250克  
2-脱氧-2-*-D-葡萄糖 Diethyl acetamidomalonate 29702-43-0
F030224 HRP标记兔抗牛IgG抗体 Rabbit Anti-Bovine IgG*HRP
B0701 绵羊血清(辐照灭菌) 100ml/200ml/500ml/500ml*20瓶
ARB11638 人淋巴毒素β(LTB)elisa检测操作说明书 Human lymphotoxinβ,ltb ELISA KIT
124-20-9 Spermidie  亚精胺
BL1126 冰冻切片抗原修复液(1×)
ARB10472 人白介素11(IL-11)elisa检测说明书 Human interleukin 11,IL-11 ELISA KIT
BTN60912 非酶RNA清除剂2.0 RNA Erasol 2.0
CYB162043 羊抗马IgG(抗血清) 0.5ml
ARB11413 人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)尿液中含量检测 Human haptoglobin,hpt/hp ELISA KIT
F030808 BIOTIN标记山羊抗小鼠IgG1抗体 Goat Anti-Mouse IgG1*BIOTIN
CYB167080 兔抗小鼠IgG
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BTN121104 增强型天狼猩红染色试剂盒 Enhanced Sirius Red Straining Kit
ARB12181 大鼠白细胞介素17(IL-17)酶联免疫定量检测 Rat interleukin17,IL-17 ELISA KIT
ARB11971 大鼠c-Jun*基末端激酶(JNK)免费代测 Rat c-jun n-terminal kinases,jnk ELISA KIT
ARB11007 人补体片段3c(C3c)ELISA代测服务 Human complement fragment 3c,c3c ELISA KIT
BTN70601 粪便DNAOUT Stool DNAOUT
BL1277 2×蛋白上样缓冲液(含DTT)
SJ0688 300bp
BTN100878 Western印迹膜封膜液 Western Blot Blocking Buffer
ARB13744 兔碱性磷酸酶(ALP)含量检测 Rabbit alkaline phosphatase,alp ELISA KIT
3α羟基类固醇脱*酶 Squalene 9028-56-2
F040103 牛血清白蛋白偶联三聚"青"胺 BSA-MEL
ARB10724 人异质型核糖核蛋白复合物/抗RA33抗体(hnRNP/RA33)Elisa定量检测 Human heterogeneous nuclear ribonucleoprotein compies/anti-ra33-antibody,hnrnp/ra33 ELISA KIT
D-泛醇 Potassium sodiu*(代"m") tartrate tetrahydrate 81-13-0
ARB12880 小鼠丙*酸*基转移酶(ALT)尿液中含量检测 Mouse alanine aminotransferase,alt ELISA KIT
PY02-215  破伤风梭菌培养基基础  250克  
37224-29-6 葡聚糖凝胶G-75 Sephadex G-75 medium
氧化型辅酶Ⅱ Hb 53-59-8
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·SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒
编号：XH110
规格：100T
试剂盒组成:
1， 封闭液（5%BSA）：10ml。
2， 3% H2O2：10ml。
3， Bio-羊抗兔IgG：浓缩液100ul。
4， SABC-POD:浓缩液100ul。
5， 稀释液：30ml。
6， 显色液（1ml+1ml）:20×DAB显色液A,20×DAB显色液B。
试剂盒保存：如果一段时间不使用，请将所有试剂存放于-20℃，如经常使用，可将封闭液，封闭液和20×DAB显色液B存放于2-8℃以方便使用
试剂盒简介：
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验. DAB显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（IP=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂：
1．粘片剂多聚赖*酸
2． 0.01 M PBS（pH7.2-7.4）
3． 0.01M柠檬酸*缓冲液
4、苏木素
实验步骤: 微量试剂请离心后使用
以石蜡切片为例
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*，三次乙醇)。
2. 3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3．可选步聚：a、热修复抗原，将切片浸入0.01M 柠檬酸*缓冲液（PH6.0）,电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS（pH7.2-7.4）洗涤1-2次。b、酶消化，滴加消化液，37℃10分钟， PBS（pH7.2-7.6）洗涤2-3次。c、跳过此步，直接进入下一步。
4． 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
5．用稀释液将一抗（如兔抗IL-10）按一定比例稀释（稀释后的一抗4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗，37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。）
6．根据使用量，用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加Bio-羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗2分钟×3次。
7．根据使用量，用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液，混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃，30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗5分钟×4次。
8．DAB显色:根据用量，用PBS（pH7.2-7.4）配制，按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A，加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间，一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9．苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。

对于细胞片，常规固定后，PBS漂洗两次，再用0.5%Txiton X-100室温20分钟，PBS漂洗两次，3%H2O2处理15分钟；PBS漂洗两次，下接上面第4步。

对于冰冻切片，固定后，可用PBS漂洗两次，再接上面第二步。

注意事项：如果染色背景过高，在SABC反应之后，DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST（pH7.2-7.4）洗涤切片4次，PBS洗2次，然后DAB显色。


因为免疫组化指标众多，标本不一，此步骤仅作参考。

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