XH065型非变性细胞裂解缓冲液厂家现货

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名称：XH065型非变性细胞裂解缓冲液厂家现货
规格：100ml
品牌：百奥莱博
产地：国产|进口
编号：XH065
非变性细胞裂解缓冲液(Nondenaturing Lysis Buffer)内含非离子型去垢剂、盐、和蛋白*(代"磷")酸酶抑制剂，能裂解细胞并在非变性条件下释放胞浆蛋白和可溶性膜蛋白、核蛋白。非变性条件下的裂解蛋白产物最大限度地保留了蛋白的特性和功能，如抗原-抗体结合或酶学活性，因此适宜于进行免疫共沉淀。另外，有些抗体对非变性蛋白具有更高的结合能力或只能识别非变性蛋白的抗原位点，这种情况应该使用非变性裂解。
非变性细胞裂解缓冲液的主要成分为20mM Tris(pH7.5)，150mM NaCl，1% Triton X-100，1% NP-40以及2mM sodiu*(代"m") pyrophosphate，25mM β-glycerophosphate，1mM EDTA，1mM Na3VO4，0.5 ug/ml leupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白的降解，并维持原有的蛋白间相互作用。
非变性蛋白裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的Triton X-100等干扰物质，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。储存条件：-20℃，有效期一年。
注意事项：
为取得最佳的使用效果，尽量避免过多的反复冻融。可以适当分装后使用。裂解样品的所有步骤都需在冰上或4℃进行。
关于裂解液的选择，一方面可以参考我们生产的各种裂解液主要特点、差异，选择合适的裂解液；另一方面也需要通过一些预实验来摸索最佳的适合您实验条件的裂解液。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明：
对于培养细胞样品：
1. 融解非变性蛋白裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
2. 对于贴壁细胞：去除培养液，用PBS、生理盐水或无血清培养液洗一遍(如果血清中的蛋白没有干扰，可以不洗)。按照6孔板每孔加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。用枪吹打数下，使裂解液和细胞充分接触。通常裂解液接触细胞1-2秒后，细胞就会被裂解。
对于悬浮细胞：离心收集细胞，用手指把细胞用力弹散。按照6孔板每孔细胞加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。再用手指轻弹以充分裂解细胞。充分裂解后应没有明显的细胞沉淀。如果细胞量较多，必需分装成50-100万细胞/管，然后再裂解。大团的细胞较难裂解充分，而少量的细胞由于裂解液容易和细胞充分接触，相对比较容易裂解充分。
3. 充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
裂解液用量说明：通常6孔板每孔细胞加入100微升裂解液已经足够，但如果细胞密度非常高可以适当加大裂解液的用量到150微升或200微升。
对于组织样品：
1. 把组织剪切成细小的碎片。
2. 融解非变性蛋白裂解液，混匀。取适当量的裂解液，在使用前数分钟内加入PMSF，使PMSF的最终浓度为1mM。
3. 按照每20毫克组织加入100-200微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)
4. 用玻璃匀浆器匀浆，直至充分裂解。
5. 充分裂解后，10000-14000g离心3-5分钟，取上清，即可进行后续的PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。
6. 如果组织样品本身非常细小，可以适当剪切后直接加入裂解液裂解，通过强烈vortex使样品裂解充分。然后同样离心取上清，用于后续实验。直接裂解的优点是比较方便，不必使用匀浆器，缺点是不如使用匀浆器那样裂解得比较充分。
用于普通的Western、IP或co-IP，我们推荐使用Western及IP细胞裂解液(P1001)，该裂解液已被国内各大研究机构广泛使用，用户普遍反映很好。裂解细胞或组织后，没有非常粘滞的透明状DNA团块形成，不必采用超声处理等就可以非常理想地用于后续操作。 另外该裂解液裂解的产物也适合用于磷酸化蛋白的Western检测。
对于某些特殊蛋白的IP，如果发现Western及IP细胞裂解液(P1001)效果不是非常理想，可以尝试用RIPA裂解液(强、中或弱)或NP-40裂解液。如果发现IP的时候背景很高，即非特异的蛋白也被IP下来，则需要选用裂解强度较高的裂解液，例如RIPA裂解液(强或中)。如果发现目的蛋白无法被IP下来，则说明裂解液的强度过强，可以使用较为温和的裂解液例如RIPA裂解液(弱)或NP-40裂解液。
对于某些难溶解蛋白的Western，如果发现Western及IP细胞裂解液(P1001)效果不是非常理想，可以尝试使用裂解强度更高的裂解液例如RIPA裂解液(强、中)或SDS裂解液。

想要了解更多关于XH065型非变性细胞裂解缓冲液厂家现货的价格、品牌、厂家、说明书、促销信息，请和我们联系。此外我公司还销*(代"售")下面的产品：
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XH065型非变性细胞裂解缓冲液厂家现货关键词：非变性细胞裂解缓冲液,XH065,百奥莱博


·非冻型组织细胞RNA保存液(RNAwait)
编号：XH020
规格：10ml/100ml
非冻型组织细胞RNA保存液（RNAwait）是一种在较高温度下保存动物组织及细胞RNA样品的非冻型无毒溶液，它能迅速渗入细胞内，通过高效抑制RNase的活性而保存RNA的完整性。
此产品有些公司又叫组织RNA保存液，或者RNAlocker。实际功能是相同的。
储存条件：15～25℃，有效期2年。。低温条件下有结晶析出时加热至37℃溶解后使用。
产品特点
1．操作简单，将组织剪薄浸没在RNAWAIT中即可使其RNA不被降解。
2．替代液氮，使样品的保存不需液氮，干冰或-80℃冰箱，尤其适用于临床和野外样品的快速和大规模采集。
3．RNA完整，因RNAwait能迅速抑制组织中RNA酶的活性，故从中提取的RNA的质量跟液氮保存的样品相比不相上下。
4．方便运输，处理过的样品能在25℃保存一周，使样品邮寄和运输变得容易和便宜，有利学术合作和交流。
5．反复冻融，经RNAwait处理的样品可反复冻融20次，其间可对样品进行各种处理而不影响最终提取的RNA的质量。
6．结果准确，RNAwait进入细胞十分快速，基因表达在发生应急改变前就得以锁定，故RNA分析更能反映取样时的真实情况。
7．可比性强，RNAwait能减少大规模样品处理中的误差，增加各次实验数据间的可比性，对大规模基因表达谱的分析尤其有用。
8．兼容性广，处理过的样品可以使用TRIzol 等试剂提取其RNA，样品还可直接用于组织切片，免疫学和流式细胞分析而不影响RNA的质量。
技术指标
37℃ 一天(保存三天的样品RNA有部分降解)
18-25℃ 一周(保存两周的样品RNA有轻微降解)
2-8℃ 一个月
-20℃和-80℃ 长期

操作流程：
1． 根据要保存的各样本的体积，计算出所需RNAwait用量。RNAwait的用量应当是组织体积的10倍（100mg组织约用1ml RNAwait）；离心收集2×107细胞RNAwait的用量是1ml。加入RNAwait的原则是：量宁多勿少。建议在实际操作中不要称量组织，而直接根据目测结果加入RNAwait量，以加快操作和减少污染。例如5mm边长的立方体组织块，体积为125mm3=125µl，故应当加入1．25ml的RNAwait液。
2． 将RNAwait按需要量分装入自备保存管中。
3． 快速将较大的组织切成厚度<0．5 cm的任意片状，较小的组织直接取下，立即完全浸入RNAwait中。组织的厚度一定要<0．5 cm。组织过厚则RNAwait不能有效渗入，组织中间部位的RNA不能受到保护。较大的组织可以切成厚度<0．5 cm的任意片状后保存，较小的组织（如大鼠的肾脏、脾脏，小鼠的大部分器官）则可以直接浸入RNAwait。
4． 将收集管存放于温度适当的地方，存放时间不能超过该温度下的最长存放时间(请看技术指标)，如果要存放在-20℃或-80℃，需先将样品在4℃放置过夜后再转移到最后的温度。注：将样品转移到-20℃或-80℃前，需要弃掉保护液。
注意事项：
1．组织和细胞取材速度要快，在获取后应当尽快浸入RNAwait，以防止RNA降解。
2．冰冻组织不能用RNAwait保存，因为RNAwait不能有效渗入冰冻组织。
3．保存样品的RNA提取：样本从-20℃或-80℃冰箱取出后，复温到室温后，取出组织块，再用于提取RNA。细胞样本则复温后低速离心收集细胞，去除RNAwait，再用于提取RNA。后继的处理（如组织匀浆）可以在室温下进行，不必在液氮中操作，RNA仍能有效得到保护。残留少量RNAwait保存液不影响后继提取RNA的质量。


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N,N-双(2-羟yi基)-2-*基乙磺酸 2-Aminobenzothiazole 10191-18-1
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辛二酸 Fmoc-Thr-OH 505-48-6
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