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冷藏
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长期
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252
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北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒优惠由专业试剂供应商北京百奥莱博提供,用于生化研究,本产品质量好,且极具价格优势,深为用户称道,了解更多琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒等DNA纯化产品请联系我司咨询订购。
名称:琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒优惠
编号:XH014
规格:100T/400T
产地:国产|进口
品牌:百奥莱博
原理简介
本试剂盒利用独特的缓冲液,可从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质。
对于切下后不超过150mg的凝胶块,本试剂盒(以100T为例)可用100T。对于更小的凝胶块,本试剂盒使用次数更多。
注意事项
1、电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。
2、如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。
3、切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。
4、回收<200bp DNA片段时,应加大溶胶液的体积(如5倍体积或者更高)。
5、回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越小,回收率越低。
6、如非指明,所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
操作步骤
1.将单一的目的DNA条带从琼脂糖凝胶中切下(尽量切除多余部分)放入干净的离心管中,称取凝胶重量(可以用同一包装中的离心管去皮称量,各离心管间的误差可忽略)。
2.向胶块中加入3倍体积溶胶液(如果凝胶重为0.1g,其体积可视为100µl,则加入300µl溶胶液,如为小片段,可加入5倍体积或者更高体积),50-55℃水浴放置5-10分钟,其间不断温和地上下翻转离心管,以确保胶块充分溶解。
3.玻璃奶混匀。取25ul混匀的玻璃奶加入上面溶解的溶胶液中。混匀。
4.室温放置2-3分钟。期间可翻转混匀1-2次。
5.10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清(70%乙醇洗两次,无水乙醇洗一次)。
6.室温放置10分钟,加入30-50ul TE缓冲液混匀溶解,50-55℃水浴5分钟。离心,取上清转移到一新的离心管中。此为所提质粒。
7.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
除琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒优惠外,我公司正在打折促销以下产品:
·SABC(兔IgG)-POD免疫组化试剂盒
编号:XH110
规格:100T
试剂盒组成:
1, 封闭液(5%BSA):10ml。
2, 3% H2O2:10ml。
3, Bio-羊抗兔IgG:浓缩液100ul。
4, SABC-POD:浓缩液100ul。
5, 稀释液:30ml。
6, 显色液(1ml+1ml):20×DAB显色液A,20×DAB显色液B。
试剂盒保存:如果一段时间不使用,请将所有试剂存放于-20℃,如经常使用,可将封闭液,封闭液和20×DAB显色液B存放于2-8℃以方便使用
试剂盒简介:
本试剂盒适合于一抗为兔IgG的免疫组化实验. DAB显色。
SABC是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的,用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质,同亲和素一样,对生物素有极高的亲和力,亲和素是一个碱性蛋白质(IP=10),经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性,对组织和细胞的非特异吸附很低,基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。SABC即StreptAvidin—Biotin Complex。SABC大约可形成一百个左右的过氧化物酶和五十个左右的链霉亲和素所构成的复合物。大量的酶将保证SABC具有很高的敏感性。
自备试剂:
1.粘片剂多聚赖*酸
2. 0.01 M PBS(pH7.2-7.4)
3. 0.01M柠檬酸*缓冲液
4、苏木素
实验步骤: 微量试剂请离心后使用
以石蜡切片为例
1. 切片常规脱蜡至水(三次二甲*,三次乙醇)。
2. 3%H2O2室温5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3.可选步聚:a、热修复抗原,将切片浸入0.01M 柠檬酸*缓冲液(PH6.0),电炉或微波炉加热至沸腾后断电,间隔5-10分钟后,反复1-2次。冷却后PBS(pH7.2-7.4)洗涤1-2次。b、酶消化,滴加消化液,37℃10分钟, PBS(pH7.2-7.6)洗涤2-3次。c、跳过此步,直接进入下一步。
4. 滴加5%BSA封闭液,室温20分钟。甩去多余液体, 不洗。
5.用稀释液将一抗(如兔抗IL-10)按一定比例稀释(稀释后的一抗4℃可保存一周),也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗,37 ℃ 1小时左右或20℃时2小时左右。也可4℃过夜。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。(一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说,阳性染色强度不够时,可提高一抗浓度和延长孵育时间;背景过高时,可降低一抗浓度和缩短孵育时间。)
6.根据使用量,用稀释液将Bio-羊抗兔IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗兔IgG浓缩液,混匀即成工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加Bio-羊抗兔IgG工作液,20-37℃ 30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗2分钟×3次。
7.根据使用量,用稀释液将SABC-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul SABC-POD浓缩液,混匀即成SABC-POD工作液。此工作液4℃可保存一周).滴加SABC-POD工作液,20-37℃,30分钟。PBS(pH7.2-7.4)洗5分钟×4次。
8.DAB显色:根据用量,用PBS(pH7.2-7.4)配制,按1mlPBS加入50ul 20×DAB显色液A,加入50ul 20×DAB显色液B 。混匀后加至切片。室温显色, 镜下控制反应时间,一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。
9.苏木素轻度复染。脱水,透明,封片。显微镜观察。
对于细胞片,常规固定后,PBS漂洗两次,再用0.5%Txiton X-100室温20分钟,PBS漂洗两次,3%H2O2处理15分钟;PBS漂洗两次,下接上面第4步。
对于冰冻切片,固定后,可用PBS漂洗两次,再接上面第二步。
注意事项:如果染色背景过高,在SABC反应之后,DAB显色之前,用加有0.01—0.02% TWEEN-20的PBST(pH7.2-7.4)洗涤切片4次,PBS洗2次,然后DAB显色。
因为免疫组化指标众多,标本不一,此步骤仅作参考。
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒优惠关键词:百奥莱博,琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,XH014
HC0092 离心管(圆底罗口)
ARB10612 人血红蛋白H(HbH)Elisa分析 Human hemoglobin h,hbh ELISA KIT
ARB14044 猴B病毒(BV)elisa检测操作说明书 Monkey b virus infections ELISA KIT
ARB13582 兔子皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA检测服务 Rabbit corticosterone,cort ELISA KIT
56-89-3 L-Cystine L-胱*酸
6104-58-1 Coomassie brilliant blue G-250 考马斯亮蓝
PY06-013 耶尔森氏菌显色培养基 1000ml,用于耶尔森氏菌快速分离与鉴别
2′-脱氧鸟苷-5′-三磷酸三*盐 Thymol blue 93919-41-6
F020106 兔抗盐*(代"酸")克伦特罗抗体 Rabbit Anti-Clenbuterol
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001010 猪血清 100ml|500ml
羧甲淀粉* T7 RNA Polymerase 9063-38-1
琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒优惠关键词:百奥莱博,琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒,XH014
·动物基因组DNA提取试剂盒
编号:XH010
规格:50T/200T
原理简介
本试剂盒适用于动物组织及培养的细胞样本,用于从中提取基因组DNA。对于尾,骨等可用,但提取效果一般。独特的裂解缓冲液加上蛋白酶K等迅速去掉除DNA外的其他物质,并利用玻璃奶吸附DNA,进一步的去掉其他杂质,提取出来,得到的DNA可用于PCR/Real time-PCR,sequencing,Southern blot,mutant analysis,SNP 等下游应用实验。
注意事项
1.裂解液低温时可能出现析出和沉淀,可以在热水中温浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
2.避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
3.RNaseA经常使用可放2-8度保存,蛋白酶K请放-20度保存。
4.同一样本,如果想大量提取,可以增加样本量,并且每一步试剂加量,但使用次数会成倍减少。
操作步骤
1.取不超过108个细胞),12,000rpm,离心30秒,尽可能的吸净上清。如果是组织,可用液氮研磨或者尽可能的剪碎,取不超过20mg,放入离心管中。
2.加入250ul裂解液,立即震荡混匀,可选做步骤:如需要去除RNA,可以加入10μl RNase A(10mg/ml)溶液,振荡混匀,室温放置5-10分钟。
3.加入10μl蛋白酶K(10mg/ml)溶液,颠倒混匀,65℃放置10-30分钟,期间颠倒3-5次,小心内心管盖受热开启。如30分钟沉淀无法完全消失,请注意第6步处理。
4,在上清中加入三倍体积无水乙醇,充分混匀。
5.12000rpm离心5分钟,吸去上清,核酸在沉淀中。
6.沉淀中加入500ul结合液,65℃水浴1-2分钟,核酸沉淀可溶解(如无法完全溶解,可转移上清到一新的离心管中,弃沉淀)。
6.玻璃奶摇匀。加入50ul摇匀的玻璃奶,混匀,室温放置2分钟,10000转/分钟离心1分钟,去上清;沉淀加入1ml 70%乙醇,振荡混匀,10000转/分钟离心1分钟,去上清,70%乙醇重复洗一次,再用无水乙醇洗一次。去上清,再次离心2分钟,用小吸头吸去上清。
7.室温放置10分钟(如果玻璃奶加量,请适当延长放置时间,此步为去除残余酒精,以免影响下游实验),加入50-100ul TE缓冲液混匀溶解,65℃水浴5分钟。离心,取上清为所提基因组。
8.电泳或者其他方法检测,进入下游实验。
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