- ¥1300
- Ybscience
- 中国/上海
- YB100922-50
- 2025年07月15日
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- 保存条件：
常温运输和保存，
- 保质期：
一年
- 英文名：
Bisulfite DNA Modification K
- 库存：
大量
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 规格：
50次/盒
产品及特点：
亚硫酸氢盐使DNA样品中的非甲基化的胞嘧啶C发生脱氨基反应变成尿嘧啶U，而甲基化的胞嘧啶不能发生脱氨基反应，碱基不发生转变。发生了C到U转化的DNA样品就可以用于后续的甲基化PCR或其他方法检测出来。亚硫酸氢盐修饰的分子机制如下：
本产品是经典亚硫酸氢盐修饰和本公司专门开发的柱式单链DNA回收产品的结合，具有下列特点：
1． 即开即用，免去单独购买和制备试剂的繁琐。
2． 反应专一，可高效转化非甲基化C成U，转化率达99%。
3． 专门的柱式单链DNA回收技术，使最终回收效率高达50%。
4． 每次处理量在500 pg-5 μg之间（最适处理量在2 μg），尤其适用于微量样品及石蜡切片样品。
5． 与多种后续反应兼容，如WGA （全基因组扩增）、PCR扩增、限制性内切酶消化、测序和微阵列分析等。
亚硫酸氢盐DNA修饰试剂盒-Bisulfite DNA Modification K使用及效果
将5 μL预配溶液A加入到45 μL的DNA溶液中，37℃放置15分钟，立即加入500 μL溶液B，轻柔颠倒混匀。55℃避光保温8-16小时后冰浴10分钟。加入1 mL通用溶胶液，颠倒混匀后上柱，12,000 rpm离心半分钟，加入0.7 mL通用洗柱液，12,000 rpm离心半分钟。加入50 μL溶液A稀释液，室温放置2分钟离心半分钟。37℃放置15分钟。加入0.7 mL通用溶胶液，混匀后上柱，12,000 rpm离心半分钟。加入50 μL DNA洗脱液，室温放置2分钟后离心半分钟，即可以得到亚硫酸氢盐修饰的DNA。100865-50 Tricine-SDS-PAGE阴极电泳液（干粉） 50L 690
100866 通用PAGE胶固定液 询价
90311 三（羟甲基）甲基甘氨酸(Tricine) 询价
100869 蛋白非变性-PAGE浓缩胶缓冲液 询价
100870 蛋白非变性-PAGE分离胶缓冲液 询价
100871 蛋白非变性-PAGE上样液，6× 询价
100872 蛋白非变性-PAGE电泳液（干粉） 询价
分子量标准
70704A 预染蛋白质电泳分子量标准 10次 150
70704B 预染蛋白质电泳分子量标准 10次 250
70103-1 蛋白质电泳及转膜示踪剂 1ml 190
70102A 蛋白质电泳分子量标准 15次 250
70102B 蛋白质电泳分子量标准 20次 150
70102C 蛋白质电泳分子量标准 10次 190
蛋白回收
90402-50 微量蛋白胶回收试剂盒 50次 490
90403-5 中量蛋白胶回收试剂盒 5次 590
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61204-10 一步式PAGE染液 10次 190
80812-250 考马斯亮蓝染液 250ml 190
101003-0.5 纳克级蛋白凝胶荧光染料 0.5ml 490
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Western Blot
70101-125 瞬间可逆蛋白印迹膜染液 125 190
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文献和实验[原创]亚硫酸氢盐修饰DNA步骤<<DNA methylation>>译稿
亚硫酸氢盐修饰DNA步骤 一、内切酶作用体系：（自建立，试过，效果很好） EcoRⅠ TaKaRa 消化DNA 37℃ 3h ddH2O 11ul H溶液 2ul EcoRⅠ 1ul DNA 6ul 37℃ 孵育 3h 二、亚硫酸氢盐修饰过程：（翻译稿） 1. 用适合的内切酶消化大分子量的DNA（避免目的基因被切割），或者通过把DNA悬于蛋白酶k/SDS缓冲液，通过26 gauge needle 5次，37℃孵育30min（降低DNA大小，利于充分变性） 2. 加2.2
的后果是不仅没有RNA，连DNA也被消化了。两者均于-20℃保存。验证提取DNA的纯度的方法有二：1、紫外分光光度计计算OD比值；2、1%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。第二种方法优于第一种方法，这种方法完全可以明确所提基因组DNA的纯度，并根据Marker的上样量估计其浓度，以用于下一步的修饰。第二部分 亚硫酸氢钠修饰基因组DNA如不特别指出，所用双蒸水（ddH2O）均经高压蒸汽灭菌。1、将约2μgDNA于1.5mlEP管中使用ddH2O稀释至50μl；2、加5.5ul新鲜配制的3M NaOH
。否则可能的后果是不仅没有RNA，连DNA也被消化了。两者均于-20℃保存。验证提取DNA的纯度的方法有二：1、紫外分光光度计计算OD比值；2、1%-1.5%的琼脂糖凝胶电泳。第二种方法优于第一种方法，这种方法完全可以明确所提基因组DNA的纯度，并根据Marker的上样量估计其浓度，以用于下一步的修饰。第二部分 亚硫酸氢钠修饰基因组DNA如不特别指出，所用双蒸水（ddH2O）均经高压蒸汽灭菌。1、将约2ugDNA于1.5mlEP管中使用ddH2O稀释至50μl；2、加5.5ul新鲜配制的3M NaOH
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