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- 详细信息
- 文献和实验
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- 库存:
大量
- 供应商:
上海研谨生物科技有限公司
- 英文名:
16010-159
- 规格:
500ml
血清货号:[16010-159]
血清品牌:{GIBCO原装}
胎牛血清的保存应该注意以下几点:
1.需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.
2.热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分complement灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.
3.瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀,小心勿造成气泡,使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.
4.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.
5.血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.
6.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.
介绍胎牛血清的几类级别,为各位在购买血清提供指导,提高实验质量。
一、特级类胎牛血清-ZUI高级别的,专用于干细胞的胎牛血清
1、Hyclone 北美特级胎牛血清SH30070.03
目前,性能ZUI好的血清,实验室反馈不错的,那就是Hyclone SH30070.03的特级胎牛血清, Hyclone的“头牌”。
这款血清--Hyclone特级胎牛血清Defined FBS,货号:SH30070,是世界上唯一经过40纳米过滤的顶级胎牛血清,极佳的促细胞生长作用及产品稳定性。内毒素含量小于10EU/ml,血红蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以广泛用于各种细胞培养,包含任何干细胞系的培养。
2、Gibco北美特级胎牛血清16000-044
invitrogen公司在美国原装生产的特级胎牛血清,货号:16000-044,是100nm过滤3次,内毒素和血红蛋白含量都可以与Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培养大部分的干细胞系。
二、优等类胎牛血清
1、Hyclone加拿大优等胎牛血清SH30396
性价比ZUI高的是Hyclone加拿大优等胎牛血清Characterizend FBS,货号:SH30396,血清采自加拿大,由Hyclone公司总部的员工采集加工,采集方法,加工过程,检定标准与美国原产优等胎牛血清完全一致,市场价格低于美国原产的。经过3次100nm过滤,内毒素含量小于25EU/ml,血红蛋白含量小于25mg/dl。此血清,在2005年以前,是很多实验室选择血清的shou选,价格适中,质量过硬,应用细胞非常广泛。
2、Hyclone澳大利亚优等胎牛血清SH30084
基本与加拿大的优等血清是一样的,级别也非常相似,各种级别都有。
3、Gibco澳大利亚胎牛血清10099-141与Hyclone澳大利亚胎牛血清差不多,这一级别的血清,也能用于干细胞培养,可是,不象特级胎牛血清那么优秀。
三、普通进口胎牛血清 Hyclone南美胎牛血清SV30087 ,目前市场上用的ZUI多的Hyclone血清是南美胎牛血清FBS SV30087 ,此血清采自南美,在国内 兰州 过滤并测试检验,经三次100纳米过滤,根据中国商标法的规定标贴中文标签,内毒素含量小于等于10EU/ml,血红蛋白含量小于等于20mg/d。此血清广泛用于各种肿瘤细胞的培养,还没有资料记载能够用于干细胞,也听说有少数人用于干细胞培养的,不过,因为本身血红素比较高,所以,ZUI好不要用于干细胞。
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文献和实验一、摘要 目的:建立兔膀胱平滑肌细胞的分离、培养和鉴定的方法。方法:成年新西兰白兔两只(正常及梗阻各一只),采用酶法分离技术获得膀胱平滑肌细胞后于10%小牛血清的DMEM中培养,观察细胞形态和扩增情况,用爬片染色、电镜、蛋白质α-肌动蛋白(α-actin)鉴定细胞类型。结果:倒置显微镜下观察均呈“谷和峰”样结构、细胞爬片HE染色及电镜检查均证实为平滑肌细胞。免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应。从细胞爬片HE染色和免疫组化染色检测α-actin呈阳性反应中我们发现该方法所的膀胱平滑
的质量不如GIBCO(同类血清)。国产的杭州四季青和甘肃民海(中美和资)不错。有些细胞(如:sf9,293还有其他一些元代细胞),用Gibco的比其他两种好很多,会大大加速试验进度。对于其他一些细胞(如:vero,MDCK,pk)四季青,Hyclone的小牛血清足矣!另外,Gibco的还要看产地。 2、问:最近要订一瓶胎牛血清,实验室之前都在用小牛血清,没有买过胎牛血清。请问哪个公司的好一些?问过试剂公司,有两种:一种是PAA的(分普通级和优级),一种是Hyclone的(只有普通级,而且是新西兰产
细菌 的培养基检测,又没有污染。一般而言,此小黑点不会影响细胞的生长。 二、血清质量的决定因素: 1、关于牛种: 血清质量与牛种没有必然的联系,但有其先天条件。 首先,澳大利亚、新西兰的牛源之所以被国际公认为最好,原因是这些国家的牛源是“无污染”的,“无污染”的实际含义是:病毒等外源因子污染较少。至于美国,由于其国内出现了疯牛病,其形象由此受到挑战。这种血清安全性的观念在发达国家认知度较高,而在我国还不够重视。其次,牛所能获得的营养对血清质量有影响。在我国
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