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- GIBCO原装
- 16250-086
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- 2025年07月11日
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大量
- 供应商：
上海研谨生物科技有限公司
- 英文名：
16250-086
- 规格：
500ml
血清货号：[16250-086]
血清品牌：{GIBCO原装}
胎牛血清的保存应该注意以下几点：
1.需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂.
2.热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分complement灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化.
3.瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀，小心勿造成气泡,使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.
4.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.
5.血清中的沉淀物 絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm, 5分钟去除,也可不用处理. 显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会显著增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.
6.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破会而影响血清质量.
介绍胎牛血清的几类级别，为各位在购买血清提供指导，提高实验质量。
一、特级类胎牛血清-ZUI高级别的，专用于干细胞的胎牛血清
1、Hyclone 北美特级胎牛血清SH30070.03
目前，性能ZUI好的血清，实验室反馈不错的，那就是Hyclone SH30070.03的特级胎牛血清， Hyclone的“头牌”。
这款血清--Hyclone特级胎牛血清Defined FBS，货号：SH30070，是世界上唯一经过40纳米过滤的顶级胎牛血清，极佳的促细胞生长作用及产品稳定性。内毒素含量小于10EU/ml，血红蛋白含量小于10mg/dl。此血清可以广泛用于各种细胞培养，包含任何干细胞系的培养。
2、Gibco北美特级胎牛血清16000-044
invitrogen公司在美国原装生产的特级胎牛血清，货号：16000-044，是100nm过滤3次，内毒素和血红蛋白含量都可以与Hyclone的SH30070.03相媲美。也可以用于培养大部分的干细胞系。
二、优等类胎牛血清
1、Hyclone加拿大优等胎牛血清SH30396
性价比ZUI高的是Hyclone加拿大优等胎牛血清Characterizend FBS，货号：SH30396，血清采自加拿大，由Hyclone公司总部的员工采集加工，采集方法，加工过程，检定标准与美国原产优等胎牛血清完全一致，市场价格低于美国原产的。经过3次100nm过滤，内毒素含量小于25EU/ml，血红蛋白含量小于25mg/dl。此血清，在2005年以前，是很多实验室选择血清的shou选，价格适中，质量过硬，应用细胞非常广泛。
2、Hyclone澳大利亚优等胎牛血清SH30084
基本与加拿大的优等血清是一样的，级别也非常相似，各种级别都有。
3、Gibco澳大利亚胎牛血清10099-141与Hyclone澳大利亚胎牛血清差不多，这一级别的血清，也能用于干细胞培养，可是，不象特级胎牛血清那么优秀。
三、普通进口胎牛血清 Hyclone南美胎牛血清SV30087 ，目前市场上用的ZUI多的Hyclone血清是南美胎牛血清FBS SV30087 ，此血清采自南美，在国内 兰州 过滤并测试检验，经三次100纳米过滤，根据中国商标法的规定标贴中文标签，内毒素含量小于等于10EU/ml,血红蛋白含量小于等于20mg/d。此血清广泛用于各种肿瘤细胞的培养，还没有资料记载能够用于干细胞，也听说有少数人用于干细胞培养的，不过，因为本身血红素比较高，所以，ZUI好不要用于干细胞。
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文献和实验水浴30分钟灭 活。 3）血清的制备： a. 超低IgG胎牛血清：通过亲和层析工艺去除胎牛血清中的γ球蛋白，使FBS γ球蛋白含量减到最低，一般IgG≤5ug/ml，生物学活性不变。 b. 血清透析：用12000～14000分子量的透析膜在0.15M NaCl中透析直到使葡萄糖含量＜0.5mg/ml（用葡萄糖氧 化酶／过氧化酶方法测定）。 c. γ－射线照射：已经证明γ－射线照射可以有效灭活血清中可能污染的病毒、支原体。照射剂量为30～45KG。
细胞层：一般选用小鼠腹腔巨噬细胞。 与免疫小鼠相同品系的小鼠，常用BALB/C小鼠，6～10周 ↓ 拉颈 处死，浸泡在75%酒精内，3～5min ↓ 用无菌剪刀剪开皮肤，暴露腹膜 ↓ 用无菌注射器注入5～6ml预冷的培养液（严禁刺破肠管） ↓ 反复冲洗，吸出冲洗液 ↓ 冲洗液放入10ml离心管，1200rpm/分离5～6min ↓ 用20%小牛血清（NCS）或胎牛血清（FCS）的培养液混悬，调整细胞数至1×105/ml ↓ 加入96
二醇的（PEG）浓度。轻轻弹击离心管底，使细胞沉淀略微松动。 ②60s内加入37℃预温的1ml 45%PEG（分子量1500）溶液，边加边轻微摇动，37℃水浴作用90s。 ③加37℃预温的不完全培养液以终止PEG作用，每隔2min分别加入1ml、2ml、3ml、4ml、5ml和6ml。 ④800rpm离心10min。 ⑤弃上清，用含20%胎牛血清的HAT选择培养液重悬。 ⑥根据所用96孔培养板的数量，补加完全培养液至200μl/每孔的用量。 ⑦将上述融合后的悬浮细胞加到已有饲养
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