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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 库存:
5×10⁵cells/T25
- 供应商:
沪震实业
- 肿瘤类型:
否
- 细胞类型:
原代细胞
- 品系:
原代细胞
- 组织来源:
椎间盘
- 相关疾病:
否
- 物种来源:
兔
- 免疫类型:
否
- 细胞形态:
电询
- 是否是肿瘤细胞:
不是
- 器官来源:
兔
- 运输方式:
干冰
- 年限:
5-10年
- 生长状态:
良好
- 规格:
5×10⁵cells/T25
| 原代细胞 | 细胞株 |
| 生长较快(5-7天铺满单层) | 较快 |
| 高 | 低 |
| 高 | 低 |
| 有限 | 较多 |
| 饱满且旋涡状排列 | 单薄且多颗粒物质 |
| 阳性反应强 | 阳性反应弱 |
| 细胞生长稳定良好 | 易发生形态生理变化 |
1.产品名称:兔椎间盘髓核细胞
2.组织来源:椎间盘组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
兔椎间盘髓核细胞4.细胞简介:
兔椎间盘髓核细胞分离椎间盘组织;椎间盘是位于脊柱两椎体之间,分为中央部的髓核,富于弹性的胶状物质;周围部的纤维环,由多层纤维软骨环按同心圆排列。上下有软骨板,是透明软骨复盖于椎体上,下面骺环中间的骨面。上下的软骨板与纤维环一起将髓核密封起来。纤维环由胶原纤维束的纤维软骨构成,位于髓核的四周。纤维环的纤维束相互斜行交叉重叠,使纤维环成为坚实的组织,能承受较大的弯曲和扭转负荷。髓核,是乳白色半透明胶状体,富于弹性,为椎间盘结构的一部分,位于两软骨板与纤维环之间。由纵横交错的纤维网状结构即软骨细胞和蛋白多糖黏液样基质构成的弹性胶冻物质。婴幼儿时期的髓核含水量为80%-90%,即使到了老年,其含水量也在70%上下。髓核在出生时体积大而松散,位于椎间盘的中央,至成年时位置移至椎间盘的中后部;在成年以前构成髓核的主要物质是大量蛋白多糖复合体、胶原纤维和纤维软骨,随着年龄的增长,髓核中的蛋白多糖解聚增多,水分逐渐减少,胶原增粗并逐渐被纤维软骨所替代。
本公司生产的兔椎间盘髓核细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法并结合软骨细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经Ⅱ型胶原蛋白免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
兔椎间盘髓核细胞5.培养基信息:
DMEM-F12、FBS、软骨细胞生长添加剂、Insulin、Transferrin、Selenium Solution、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用HZbscience兔椎间盘髓核细胞专用完全培养基作为体外培养兔椎间盘髓核细胞的培养基。
二、细胞培养状态
发货时发送细胞电子版照片
三、使用方法
在HZbscience技术部标准操作流程下,人肾动脉内皮细胞可传3-5代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和HZbscience技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问题得到解决。
5. 该细胞只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
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文献和实验丁香园网友clellwei的观点为:原代椎间盘细胞培养其实并不太难,但培养时间相对较长,所以容易出问题。1、选材很关键选用胎儿椎间盘进行原代培养相对容易一些,可利用反复传代的方法来制作退变模型。直接选择人退变椎间盘进行培养时(一般选择手术摘除的椎间盘),患者的年龄及间盘的退变情况必须充分考虑在内。若年龄偏大,间盘退变很严重,培养的难度相应增大。20-50岁之间的患者都可采用。如果实验需要进行纤维环和髓核细胞的分别培养,在取回间盘时需仔细分离。2、操作需仔细原代培养的过程并不太复杂,从取回间盘
家兔椎间盘(intervertebral disc )细胞的体外培养方法
酶(collagenase) 200U/ml 0.4%台盼兰、0.25胰蛋白酶Method 1 组织块法1、取材:空气栓塞法处死家兔后,在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM培养基(含双抗)。迅速带回到无菌超净台上。(注意事项:椎间盘位于相邻两个椎体之间,取材过程较为繁琐,要求动作迅速,争取在家兔死后半小时内完成,否则,该组织对缺氧耐受性差导致培养失败)。2、剪切:在超净台上,进一步将周围组织分离,用Hank’s液冲洗数遍,直到冲洗液透明为止。眼科剪刀将组织修剪为1~2cm3大小的小组织块,Hank’s
实验25 兔的皮肤、骨骼系统 一、目的 通过对兔骨骼的观察,了解哺乳动物骨骼系统的基本组成;认识总结哺乳类骨骼系统适应于陆生的进步性特征。 二、内容 (一)整架及零散骨骼观察(头骨结构,可对比猫的头骨进行观察)。 (二)兔的皮肤切片观察。 三、实验材料和用具 兔的整架骨骼标本及零散骨骼标本。猫的骨骼标本。哺乳动物不同类型代表动物头骨及附肢骨的示范标本。
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