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- Ybscience
- 中国/上海
- YB80206-50
- 2025年07月16日
企业认证
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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
低温运输，-20℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
Two-Tube RT PCR Kit
- 库存：
大量
- 供应商：
上海钰博生物科技有限公司
- 规格：
50次/盒
本试剂盒是整合cDNA第一链合成试剂和即用型PCR试剂而得的RT-PCR试剂盒。cDNA第一链合成反应和PCR反应分别在两个离心管中进行。其操作流程图如下：
两管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq)-Two-Tube RT PCR Kit本试剂盒具有下列特点：
1. cDNA第一链合成试剂盒具有灵敏度高、使用范围广、使用Random Primer、Oligo dT Primer和基因专一引物等优点。
2. PCR试剂盒具有即用、简单等优点，PCR产物可以直接上样电泳。
3. 两管式操作，RT和PCR在不同试管中进行，本试剂盒可以进行10次逆转录反应，100次PCR反应，便于单独优化反应条件。
4. 收率高，最长可扩增5 Kbp以上的RNA。
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文献和实验合酶活性相互竞争RNA模板与DNA引物或cDNA延伸链间形成的杂合链，并降解RNA：DNA复合物中的RNA链。被RNaseH活性所降解的RNA模板不能再作为合成cDNA的有效底物，降低了cDNA合成的产量和长度。因此消除或大大降低逆转录酶的RNaseH活性将会大有裨益。SuperScriptⅡ逆转录酶，RNaseH- 的MMLV逆转录酶及ThermoScript逆转录酶，RNaseH- 的 AMV，比MMLV和AMV得到更多量和更多全长的cDNA（图3）。RT-PCR灵敏度会受cDNA合成量的影响
量，除非你能准确知道来自多少细胞，但是细胞还有死的呢。2、以电泳为基础的半定量RT-PCR本身是不可信的，作为实验的粗筛是可以的，但不能作为最终结果的，不过我的可以（苦胆吐出).3、半定量RT-PCR应该在两管中进行，除非内参基因和目的基因表达相同，长度一致，目的扩增区域的GC含量相似，或者实在穷的要省PCR管和Taq酶。 解释一下：1、同一管中不是不可以，因为它有条件现同的优点，只要目的基因的扩增量和选择的不同循环数的内参照基因的最终扩增产量大致相同就很好，很拗口吧。但是一管中的竞争抑制实在是大问题
PCR 克隆 主要有TA克隆 法, 限制性酶切与连接法，杂交法和近期开发出来的特异性重组法等。 但因为TA克隆 法操作最简单，快速和高效的原因，成为Taq聚合酶PCR 产物的最佳克隆 方法。TA克隆 法由Invitrogen发明，并拥有全球TA Cloning商标的专利权。 TA克隆 方法（Original TA Cloning Kit
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