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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
低温密封保存
- 保质期:
两年
- 英文名:
详见说明书
- 库存:
99
- 供应商:
江蓝纯
- CAS号:
96-50-4
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文献和实验。将肽先与异硫氰酸苯酯(PTH试剂)在pH8-9条件下作用,肽的NH 2 末端接到异硫氰酸苯酯的C原子上生成苯异硫甲氨酰肽,简称PTC�肽,在强酸作用下,可使靠近PTC基的氨基酸环化,肽键断裂形成苯氨基噻唑啉酮衍生物和一个失去末端氨基酸的肽链。此肽不被破坏,因而又可出现一个新的N-末端。重复以上的步骤,继续与PTH试剂作用,继续分析,苯氨基噻唑啉酮衍生物很容易由有机溶剂抽提出来进行鉴定。但此衍生物很不稳定,在水中可转化为稳定的乙内酰苯硫脲氨基酸(PTH-氨基酸)。这些步骤通常称为
氨酸硫醇。修饰的半胱氨酸残基的N-端肽键可在碱性条件下用三(2-羧乙酸)盐酸膦切下,以形成一个氨基酸端肽以及一系列2-亚氨基噻唑-4-羧肽,然后用MALDI-TOF MS进行测定。在还原状态下,重复以上实验即可确定半胱氨酸残基总数。Watson等用与此相似的检测半胱氨酸和胱氨酸的方法,pmol级的起始物质与NTCB和三羧乙酸膦反应,再用MALDI-TOF MS分析。Denslow等报道了束缚在PVDF膜上的蛋白的切割过程,用NTCB氰基化半胱氨酸残基后切割,再用MALDI-TOF MS测定所得片段
2+。Wu等[15]使用2-硝基-5-硫氰苯甲酸(NTCB)进行化学修饰,测出游离半胱氨酸和胱氨酸基团的数目和位置。在非还原性条件下,此试剂用于选择性地氰基化蛋白中的半胱氨酸硫醇。修饰的半胱氨酸残基的N-端肽键可在碱性条件下用三(2-羧乙酸)盐酸膦切下,以形成一个氨基酸端肽以及一系列2-亚氨基噻唑-4-羧肽,然后用MALDI-TOF MS进行测定。在还原状态下,重复以上实验即可确定半胱氨酸残基总数。Watson等[16]用与此相似的检测半胱氨酸和胱氨酸的方法,pmol级的起始物质与NTCB和三羧乙酸膦
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