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- 保存条件:
低温运输,-20℃保存
- 保质期:
一年
- 英文名:
dNTP Analogs Error-Prone PCR Kit
- 库存:
大量
- 供应商:
上海沪震生物科技有限公司
- 规格:
15 次/盒
产品及特点
dPTP和8-oxo-dGTP是两种dNTP类似物,其分子结构图如下。PCR过程中,在Taq DNA聚合酶的作用下,dPTP和8-oxo-dGTP可以随机掺入到PCR产物中而引起突变。8-oxo-dGTP引起的突变率(A→C;T→G)可以达2%;dPTP引起的总突变率(A→G;T→C;G→A;C→T)最高可达19%。dPTP和8-oxo-dGTP引起的突变率和PCR循环数的关系图如下:
核苷酸类似物法易错PCR试剂盒-dNTP Analogs Error-Prone PCR Kit本产品即是基于dPTP、8-oxo-dGTP的易错PCR试剂盒,其具有下列特点:
1. 即开即用,用户只需要提供样品DNA模板和引物,无需单独准备各成分。
2. 经过两轮PCR扩增。
3. 总突变率可以高达20%。
4. 本产品只适用于科研,不能用于临床诊断。
使用及效果
取自备的DNA模板、引物添加至25 μLPCR Mix 3.0中,分别添加2.5 μLdPTP和8-oxo-dGTP,补水至50 μL。PCR仪上进行第一轮PCR扩增。扩增结束后,取适当体积第一轮PCR反应液作为模版,相同PCR参数条件下(不加dPTP、8-oxodGTP),进行第二轮PCR扩增(20-30循环)。
RNAclean RNA清洁纯化试剂盒 50T
PLANTaid 植物RNA 助提剂 10 ml
PLANTaid 植物RNA 助提剂 30ml
RNAfixer 无液氮RNA样品储存液 50 ml
RNAfixer 无液氮RNA样品储存液 100 ml
RNaseAway 高效固体表面RNase清除剂 100ml
RNaseAway 高效固体表面RNase清除剂 200ml
RNAsafe 高效液体RNase灭活剂 1 ml
RNAsafe 高效液体RNase灭活剂 5 ml
Acryl Carrier 核酸助沉剂 1 ml
Acryl Carrier 核酸助沉剂 5 ml
Glycogen 核酸助沉剂 0.35 ml
Glycogen 核酸助沉剂 0.7 ml
RNAlong RNA长期保存液 1 ml
RNAlong RNA长期保存液 2 ml
DNAeraser基因组DNA污染清除剂 50ml
Taq DNA Polymerase(2.5u/ul) 250U
Taq DNA Polymerase(2.5u/ul) 500U
Taq DNA Polymerase(2.5u/ul) 1000u
Taq Plus DNA Polymerase(2.5u/ul) 250U
Taq Plus DNA Polymerase(2.5u/ul) 500U
Pfu DNA Polymerase(2.5u/ul) 250U
Pfu DNA Polymerase(2.5u/ul) 500U
long taq DNA Polymerase(2.5u/ul) 250U
冷抑制热启动HotStart?Taq?DNA Polymerase 250U
冷抑制热启动HotStart?Taq?DNA Polymerase 500U
冷抑制热启动HotStart?Taq?DNA Polymerase 2500U
10x JumpStart Buffer 热启动缓冲液(不含酶) 1 ml
10x JumpStart Buffer 热启动缓冲液(不含酶) 5 ml
2 x SYBR Green qPCR Mix (荧光定量PCR) 50 次x 50μl反应体系
2 x SYBR Green qPCR Mix (荧光定量PCR) 200 次x 50μl反应体系
2×Taq PCR MasterMix(含染料) 1ml
2×Taq PCR MasterMix(含染料) 5×1ml
2×Taq PCR MasterMix(不含染料) 1ml
2×Taq PCR MasterMix(不含染料) 5×1ml
2×Taq Plus PCR MasterMix(含染料) 0.5ml
2×Taq Plus PCR MasterMix(含染料) 5×1ml
2×Taq Plus PCR MasterMix(不含染料) 0.5ml
2×Taq Plus PCR MasterMix(不含染料) 5×1ml
2×Pfu PCR MasterMix(含染料) 0.5ml
2×Pfu PCR MasterMix(含染料) 5×1ml
2×Pfu PCR MasterMix(不含染料) 0.5ml
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文献和实验Molecular Biology of PCR is not well understood. We know what happens in a descriptive sense,but not the physical chemistry/thermodynamics. The rules for choosing PCR primers are a rough combination of educated guesses and old fashioned trial-and-error
,这样可以节约反转录的试剂,cDNA可以多次使用,可用于检测稀有基因是否表达、从极少量细胞中定量检测特定mRNA的表达水平。 3)特异性引物: 最特异的反转录方法是用含目标RNA的互补序列的寡核苷酸作为引物,若PCR反应用二种特异性引物,第一条链的合成可由与mRNA3'端最靠近的配对引物起始。用此类引物仅产生所需要的cDNA,导致更为特异的PCR扩增。 做 Real Time PCR时,用于SYBR Green I/Eva Green 法时的一对引物与一般PCR
。由于Poly(A+)RNA仅占总RNA 的1-4%,故此种引物合成的cDNA比随机六聚体作为引物和得到的cDNA在数量和复杂性方面均要小。 3)特异性引物:用含目标RNA 的互补序列的寡核苷酸作为引物,若PCR 反应用二种特异性引物,第一条链的合成可由与mRNA 3’端最靠近的配对引物起始。用此类引物仅产生所需要的cDNA,导致更为特异的PCR扩增。缺点是只能用于单一基因的PCR实验。 二、引物设计 引物设计有3 条基本原则:首先引物与模板的序列要紧密互补
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