WE0353型抗β-Actin单克隆抗体(植物)批发

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名称：WE0353型抗β-Actin单克隆抗体(植物)批发
产地：国产|进口
编号：WE0353
规格：100μl
英文名：Anti β-Actin Mouse Monoclonal Antibody
Actin是细胞骨架的主要成分， 广泛表达于真核细胞。 目前发现Actin至少存在6种异构体形式。 Actin已经在各种物种的细胞中发现，并且在在免疫原性及物理特征上都比较相似，具有高度保守性，在细胞中的表达相对稳定，因此它常被用于校正系统的内参。本抗体经常作为各种模式生物如拟南芥，水稻等的内参。

抗体类型：鼠单克隆抗体IgG1
克隆号：6D1
免疫原：全长Actin蛋白
应用范围：WB(1：500-5000)、ELISA(需摸索最佳稀释度)
应用种属：拟南芥，水稻，斑马鱼，果蝇，秀丽线虫，酿酒酵母

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·口腔拭子基因组DNA提取试剂盒
编号：WE0179
英文名称：Swab Genomic DNA Extraction Kit
规格：50次|200次
  本试剂盒提供一种简单快速分离纯化口腔拭子样本总DNA的方法。该试剂盒采用可特异性结合DNA的硅基质膜和独特的缓冲系统，高效专一吸附DNA，每个拭子可得到0.5-3.5μg基因组DNA，提取的DNA片段大、纯度高、质量稳定可靠。适用于酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。

试剂盒组成：

 

组份	50次	200次
Buffer GR	25ml	120ml
Buffer GL	25ml	120ml
Buffer GW1(浓缩液)	13ml	52ml
Buffer GW2(浓缩液)	15ml	75ml
Buffer GE	15ml	60ml
蛋白酶K	25mg	90mg
蛋白酶K 储存液	1.25ml	5ml
吸附柱DS及收集管	50套	200套
离心管(1.5ml)	50个	200个

产品特点：
1、采用硅基质膜原理，简单、快速从口腔拭子中提取基因组DNA。
2、提取的基因组DNA片段大、纯度高。
3、单个拭子样本得率达到0.5-3.5μg。

自备试剂：无水乙醇。

实验前准备及重要注意事项/strong>：
1、向蛋白酶K 中加入指定用量(1.25ml/5ml)的蛋白酶K 储存液使其溶解，-20℃保存。配制好的蛋白酶K 勿长时间室温放置，避免反复冻融，以免影响其活性。
2、第一次使用前应按照试剂瓶标签说明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入无水乙醇。
3、使用前若发现Buffer GL有沉淀，请将Buffer GL于56℃水浴溶解。
4、全部离心步骤可在室温下进行。
5、取样：使用口腔拭子在口腔内壁擦拭6次，晾干2小时保存，为确保样本不被食物或饮料污染，取样前30分钟内请勿进食和饮水。

操作步骤：

1．将口腔拭子的棉签用剪刀从杆上剪下，置于2ml的离心管(自备)中，加入400μl Buffer GR。
注意：如需无RNA污染的基因组DNA，可加入4μl浓度为100 mg/ml 的RNase A溶液(货号：WE0225S)，震荡混匀。
2．加入20μl 蛋白酶K 和 400μl Buffer GL，立即涡旋震荡15秒，充分混匀。
注意：加入Buffer GL后立即充分混匀；不可将蛋白酶K 直接加入Buffer GL中使用。
3．56℃放置10分钟，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
4．加入400μl无水乙醇，涡旋震荡充分混匀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。
注意：加入无水乙醇后可能会产生白色沉淀，不会影响后续实验。
5．将上步所得溶液和沉淀分两次加入到已装入收集管的吸附柱中，一次最多不超过700μl 。12000rpm(～～13400×g)离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
6．向吸附柱中加入500μl Buffer GW1(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
7．向吸附柱中加入500μl Buffer GW2(使用前检查是否已加入无水乙醇)，12000rpm离心3分钟，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
注意：如需进一步提高DNA纯度，可重复步骤7。
8．12000rpm离心1分钟，倒掉收集管中的废液。将吸附柱置于室温数分钟，以彻底晾干。
注意：这一步的目的是将吸附柱中残余的乙醇去除，乙醇的残留会影响后续的酶促反应(酶切、PCR等)。
9．将吸附柱置于一个新的1.5ml离心管中，向吸附柱的中间部位悬空加入50μl Buffer GE或灭菌水，室温放置2-5分钟，12000rpm离心1分钟，收集DNA溶液，-20℃保存。
注意：
1)如果下游实验对pH值或EDTA敏感，可以用灭菌水洗脱。洗脱液的pH值对洗脱效率有很大影响，若用水做洗脱液应保证其pH值在7.0-8.5(可以用NaOH将水的pH值调到此范围)，pH值低于7.0时洗脱效率不高。
2)若需长期保存，推荐用Buffer GE洗脱并于-20℃保存。

储存条件：室温(15～30℃)。



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·BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG酶)
编号：WE0154
英文名称：BaldStar TaqMan Mixture(dUTP+UNG)
规格：1ml|5ml
  本品是专用于探针法(TaqMan，Molecular Beacon等)实时荧光定量PCR的预混体系，浓度为2×，包含 BaldStar Taq DNA polymerase、PCR Buffer、dNTPs(dTTP全部被dUTP所取代)、UNG酶和Mg2+，操作简单方便。主要用于基因组DNA靶序列和RNA反转录后的cDNA靶序列的检测，如基因表达分析，拷贝数分析，SNP基因型分析等。本产品中运用了dUTP-UNG防污染系统，在PCR反应体系配制过程中加入了dUTP，因此就形成了含有dU碱基的扩增产物。而此产物可以在下次进行PCR反应前，由PCR体系中的UNG酶处理消除。这样就有效的去除了PCR产物的残留污染，大大降低了由于扩增产物污染而导致的假阳性。UNG酶在PCR循环中的预变性步骤即可被灭活，因此不会影响新的含dU碱基PCR产物的形成。本品含有的 BaldStar Taq DNA Polymerase是一种经化学修饰的、全新高效热启动酶，在常温下没有聚合酶活性，有效避免在常温条件下由引物和模板非特异性结合或引物二聚体而产生的非特异性扩增，酶的激活须在95℃下孵育10分钟。独特的 PCR缓冲体系与热启动酶的组合，显著提高了PCR的扩增效率，荧光信号更强，灵敏度更高，可以检测单拷贝的模板。使用本产品可以得到更广的线性范围，对目的基因定量更准确。

  ROX染料用于校正定量PCR仪孔与孔之间产生的荧光信号误差，一般用于ABI、Stratagene等公司的Real Time PCR 扩增仪。不同仪器的激发光学系统有所不同，因此ROX染料的浓度必须与相应的荧光定量PCR仪相匹配。
不需要ROX校正的仪器(WE0154)：
Roche LightCycler 480，Roche LightCyler 96，Bio-rad iCyler iQ，iQ5，CFX96等。
需要Low ROX校正的仪器(WE0155)：
ABI Prism7500/7500 Fast，QuantStudio® 3 System，QuantStudio® 5 System，QuantStudio® 6 Flex System，QuantStudio® 7 Flex System，ViiA 7 system，Stratagene Mx3000/Mx3005P，Corbett Rotor Gene 3000等。
需要High ROX校正的仪器(WE0156)：
ABI Prism7000/7300/7700/7900，Eppendorf，ABI Step One/Step One Plus等。

产品组成：

组份	WE0154-5ml	WE0155-5ml	WE0156-5ml
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	5×1ml	5×1ml	5×1ml
50×Low ROX	-	200μl	-
50×High ROX	-	-	200μl
ddH2O	5×1ml	5×1ml	5×1ml

注意事项：
1、使用前请上下颠倒轻轻混匀，尽量避免起泡，并经短暂离心后使用。
2、避免反复冻融本品，反复冻融可能使产品性能下降。本产品长期保存可置于-20℃，避光。如果在短期内需要频繁使用，可在2～8℃保存。


使用方法：
以下举例为常规PCR反应体系和反应条件，实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。

1、PCR反应体系

试剂	50μl反应体系	终浓度
2×BaldStar TaqMan Mixture(UNG)	25μl	1×
Forward Primer，10μM	1μl	0.2μM
Reverse Primer，10μM	1μl	0.2μM
Probe，10μM	1μl	0.2μM
Template DNA	2μl
50×Low ROX or High ROX(可选)	1μl	1×
ddH2O	up to 50μl

注意：
1)通常引物浓度以0.2μM可以得到较好结果，可以在0.1-1.0μM作为设定范围的参考。
2)使用的探针浓度，与使用的荧光定量PCR仪、探针种类、荧光标记物质种类有关，实际使用时请参照仪器说明书，或各荧光探针的具体使用要求进行浓度的调节。
3)通常DNA模板的量以10-100ng基因组DNA或1-10ng cDNA为参照，因不同物种的模板中含有的目的基因拷贝数不同，可对模板进行梯度稀释，以确定最佳的模板使用量。
4)不同仪器的激发光学系统有所不同，根据使用荧光定量的仪器选择加入50× Low ROX or 50×High ROX。

2、PCR反应程序
注意！本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成！

两步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火/延伸	60℃	1 min

注意：
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)建议采用两步法PCR反应程序，若因使用Tm值较低的引物等原因，得不到良好的实验结果时，可尝试进行三步法PCR扩增。

三步法PCR：

步骤	温度	时间	循环数
UNG酶消化	37℃/50℃	2-10 min
预变性	95℃	10 min
变性	95℃	15 s	35-40个循环
退火	55℃-65℃	30s
延伸	72℃	30s

储存条件：-20℃，避免反复冻融


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BTN130514 硅基磁珠 Magnetic beads,Silicic
F040102 鸡卵清蛋白偶联克伦特罗 OVA-CLE
ARB12325 大鼠肝脂酶(HL)酶标法分析 Rat hepatic lipase,hl ELISA KIT
ARB10496 人白介素9(IL-9)elisa测定使用说明书 Human interleukin 9,IL-9 ELISA KIT
ARB10024 人5羟色胺(5-HT)检测服务 Human 5-hydroxytryptamine,5ht ELISA KIT
BTN90313 TBE电泳液,10× TBE Buffer, 10×
BL0949 胶体金标记羊抗人IgG抗体
PY01-041  维生素B12  1克  
13573-16-5 雷氏盐
ARB10613 人血红蛋白β亚基(HB-β)Elisa分析 Human β-subunits of hemoglobin,hb-β ELISA KIT
ARB11497 人脂阿拉伯甘露聚糖(LAM)elisa检测操作说明书 Human lipoarabinomannan,lam ELISA KIT
HC0246 Eppendorf单道可调移液器
BTN100809 SSPE溶液,20× SSPE,20×
ARB10341 人水痘带状疱疹病毒IgG(VZV-IgG)elisa检测说明书 Human varicella zoster virus igg,vzv-igG ELISA KIT
PY06-016  霉菌及酵母菌计数显色培养基  1000ml，用于霉菌和酵母菌快速分离、鉴别与计数
BTN80206 两管式RT-PCR试剂盒(MMLV-Taq) Two-Tube RT PCR Kit
甲基环戊烯醇酮 Phosphoglucose isomerase 765-70-8

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