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冷藏
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长期
- 英文名:
Protein Standard Solution(BSA)
- 库存:
472
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专注于生命科学和生物技术领域,致力于为客户提供包括蛋白标准溶液BSA 蛋白质研究在内的一系列分子生物学试剂产品,并提供一系列相关的技术服务。
名称:蛋白标准溶液BSA 蛋白质研究
品牌:百奥莱博
规格:5ml
编号:WE0274
英文名:Protein Standard Solution(BSA)
我公司的蛋白标准溶液BSA 蛋白质研究,性价比高,货期短,送货上门,欢迎您来电咨询购买,另外,我公司还生产供应销*(代"售")下列产品:
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蛋白标准溶液BSA 蛋白质研究关键词:WE0274,蛋白标准溶液BSA,Protein Standard Solution(BSA)
·细胞核/浆蛋白抽提试剂盒
编号:WE0265
英文名称:Nuclear and Cytoplasmic Extraction Kit
规格:50次
本试剂盒能够简单、快速的提取来源于哺乳动物细胞及组织的细胞核和细胞浆蛋白,所提取蛋白保持生物学活性。本试剂盒首先通过细胞浆蛋白抽提试剂裂解细胞膜,释放细胞浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过细胞核蛋白抽提试剂抽提得到细胞核蛋白。抽提获得的核蛋白及浆蛋白纯度高,有效避免核/浆蛋白的交叉污染,可以用于Western、Gel Shift、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
试剂盒组成:
| 组份 | 50次 | |
| Buffer A | 50ml | |
| Buffer B | 3ml | |
| Buffer C | 25ml | |
| Protease Inhibitor Cocktail | 750μl |
保存条件:Protease Inhibitor Cocktail:-20℃,其它组分:2~8℃
注意事项:
1、如需提取磷酸化蛋白请在抽提试剂中加入磷酸酶抑制剂。
2、所有样品操作请置于冰上进行。
3、可根据具体实验情况调整试剂用量,保证各试剂使用比例为Buffer A:Buffer B:Buffer C=100:5.5:50。
4、可以采用更高的速度来离心。
使用方法:
一、细胞中胞浆、胞核蛋白的提取
1、请在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷
2、收集细胞,计数。离心去上清。
3、1×107细胞中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail),涡旋5秒以充分混匀,冰上孵育20分钟。
注意:各种细胞的特性不同,需要根据不同细胞的特性调整Buffer A的用量,如果蛋白浓度小,按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B,涡旋5秒以充分混匀,冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm(~~13400×g)离心 15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail),涡旋5秒以充分混匀,重悬沉淀,冰上孵育40分钟,每隔10分钟涡旋混匀一次,每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。
二、组织中胞浆、胞核蛋白的提取
1、取材,保存组织。
2、在蛋白抽提前取出抽提试剂Buffer A和Buffer C进行预冷。
3、称组织重量,每100 mg组织中加入1ml Buffer A(按照1:99比例在蛋白抽提前2-3分钟内加入Protease Inhibitor Cocktail),用匀浆器在冰上充分匀浆,放置在冰上孵育20分钟。
注意:各种组织的特性不同,需要根据不同组织调整Buffer A的用量,如果蛋白浓度小,按比例减少Buffer A及后续Buffer B、Buffer C的用量。
4、加入55μl Buffer B,涡旋5秒以充分混匀,放置在冰上孵育 1分钟。
5、4℃ 12000rpm离心 15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞浆蛋白)。
6、向上步所得的沉淀中加入500μl Buffer C(使用前按照1:99比例加入Protease Inhibitor Cocktail),涡旋5秒以充分混匀,重悬沉淀,冰上孵育40分钟,每隔10分钟涡旋混匀一次,每次约15-30秒。
7、4℃ 12000rpm离心15分钟,收集上清(尽量收集干净上清液)至新的离心管中,-20℃保存(此提取液为胞核蛋白)。
储存条件:-20℃
蛋白标准溶液BSA 蛋白质研究关键词:WE0274,蛋白标准溶液BSA,Protein Standard Solution(BSA)
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北京百莱博科技有限公司是蛋白质研究产品的专业生产供应销*(代"售")商,恭候您的咨询选购蛋白标准溶液BSA 蛋白质研究。
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BSA 蛋白标准液、BCA 试剂、PBS。 1) 标准曲线:用 BSA 和 PBS 混合总体积为 20 μL 的溶液做标准曲线,具体操作如下:按照 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 含量稀释 BSA 蛋白标准品,每个浓度(0、4 μL、8 μL、12 μL、16 μL、20 μLBSA,其余用 PBS 补齐至 20 μL)梯度做一个复孔。 2) 样品稀释测蛋白浓度:10 倍稀释法:取 18 μLPBS+2 μL 样品上清(经上步处理的样品 12000 r/min 离心 5 min
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