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- 详细信息
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件:
-20℃,避免反复冻
- 保质期:
长期
- 英文名:
BesB Taq DNA Polymerase
- 库存:
342
- 供应商:
北京百奥莱博科技有限公司
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
北京百奥莱博专业生产销*(代"售")esB Taq DNA Polymerase优惠价,我公司供应的分子生物学试剂品类齐全,且具有优势价格,欢迎新老客户垂询订购。
名称:esB Taq DNA Polymerase优惠价
编号:WE0103
英文名:BesB Taq DNA Polymerase
规格:500U|2500U
品牌:百奥莱博
Es Taq DNA Polymerase具有5"→3"DNA聚合酶活性和5"→3"外切核酸酶活性。在普通的PCR条件下,与Taq DNA Polymerase相比,具有扩增效率高、错配率低的优良性能,兼具有Taq DNA Polymerase的高扩增效率和Pfu DNA Polymerase的高保真性。使用本品扩增得到的PCR产物3"端附有一个“A”碱基,因此可直接用于T/A克隆。本产品适用于常规的PCR反应和对保真性有要求的基因克隆等反应。
产品组成:
| 组份 | 500 U | 2500U |
| Es Taq DNA Polymerase, 5 U/μl | 100μl | 5×100μl |
| 10×PCR Buffer | 1.8ml | 5×1.8ml |
活性定义:
用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,在74℃,30分钟内,将10 nmol脱氧核苷酸掺入到酸性不溶物质所需的酶量定义为1个活性单位(U)。
质量控制:
1、经过多次柱纯化,SDS-PAGE检测其纯度大于99%;
2、经检测无外源核酸酶活性;
3、PCR方法检测无宿主残余DNA;
4、能有效地扩增人基因组中的单拷贝基因;
5、室温存放一个月,无明显活性改变。
使用方法:
以下举例为以人基因组DNA为模板,扩增1 kb的片段的PCR反应体系和反应条件,实际操作中应根据模板、引物结构和目的片段大小不同进行相应的改进和优化。
1、PCR反应体系
| 试剂 | 50μl反应体系 | 终浓度 |
| 10×PCR Buffer | 5μl | 1× |
| dNTP Mix,10 mM each | 1μl | 200μM each |
| Forward Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Reverse Primer,10μM | 2μl | 0.4μM |
| Template DNA | <0.5μg | <0.5μg/50μl |
| Es Taq DNA Polymerase,5 U/μl | 0.25-0.5μl | 1.25-2.5U/50μl |
| ddH2O | up to 50μl |
注意:引物浓度请以终浓度0.1-1.0μM作为设定范围的参考。扩增效率不高的情况下,可提高引物的浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。
2、PCR反应条件
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 94℃ | 2min | |
| 变性 | 94℃ | 30s | 25-35个循环 |
| 退火 | 55-65℃ | 30s | |
| 延伸 | 72℃ | 30s | |
| 终延伸 | 72℃ | 2min |
注意:
1)一般实验中退火温度比扩增引物的熔解温度Tm低5℃,无法得到理想的扩增效率时,适当降低退火温度;发生非特异性反应时,提高退火温度,由此优化反应条件。
2)延伸时间应根据所扩增片段大小设定,本产品Es Taq DNA Polymerase的扩增效率为2 kb/min。
3)可根据扩增产物的下游应用设定循环数。如果循环次数太少,扩增量不足;如果循环次数太多,错配机率会增加,非特异性背景严重。所以在保证产物得率的前提下应尽量减少循环次数。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
关于esB Taq DNA Polymerase优惠价的更详细说明,请致电我公司咨询,我们将以最饱满的热情为您提供解答,此外,我公司专业供应下列产品:
ARB11021 人尿游离皮质醇(UFC)ELISA代测服务 Human urinary free cortisol,ufc ELISA KIT
β-甘油磷酸二*五水物 Ammonium oxalate monohydrate 13408-09-8
BL1115 Hoechst 33342染色液(即用型)
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esB Taq DNA Polymerase优惠价关键词:BesB Taq DNA Polymerase,WE0103
·miRNA荧光定量检测试剂盒
编号:WE0158
英文名称:miRNA qPCR Assay Kit
规格:125次
本试剂盒采用SYBR Green I嵌合荧光染料法的原理来进行miRNA荧光定量PCR检测。试剂盒包括检测所需的2×miRNA qPCR premix和Reverse primer。
2×miRNA qPCR premix是专门为miRNA定量检测而研发的新一代预混形式的荧光定量PCR检测试剂,所含的荧光染料SYBR Green I可以与所有的双链DNA结合,使该产品可用于不同靶序列的检测而不需合成特异性标记探针。其中的BaldStar Taq DNA polymerase是经化学修饰的高效热启动酶,配合独特的缓冲体系,使反应特异性更好,灵敏度更高,并能在更广的范围内对miRNA进行准确定量。
试剂盒组成:
| 组份 | 125次 |
| 2×miRNA qPCR Mixture(ROX) | 2×750μl |
| Reverse Primer,10μM | 60μl |
| ddH2O | 1.5ml |
备注:本试剂盒须与miRNA cDNA第一链合成试剂盒(WE0157)配套使用。
自备实验材料:qPCR上游引物(Forward primer)。
Forward Primer设计原则
1、遵循引物设计的最普遍原则。
2、以成熟的miRNA序列为基础,将U替换成T,这是最基础和最简单的设计方法。
3、试剂盒中提供的下游引物的Tm值为63.6℃,设计上游引物的Tm值要尽量保证在63.6℃左右。
4、若按照原则“2”的方式直接设计的引物其Tm值过低,可以在引物的5’端添加几个碱基(最好为G或C碱基);也可以在3’端添加1个或几个A碱基;或者5’端和3’端同时修饰。
5、若按照原则“2”的方式直接设计的引物其Tm值过高,可以在引物的5’或3’端去掉几个碱基。
注意事项:
1、试剂使用前请上下颠倒轻轻混匀,尽量避免起泡,并经短暂离心后使用。
2、miRNA 第一链cDNA 的加入量不要超过Real time PCR 体积10%。
3、对于特殊的检测体系,高含量的cDNA模板易导致非特异性扩增,根据所检测miRNA的丰度适当的稀释cDNA(稀释10倍或者100倍)。
4、本产品中的2×miRNA qPCR Mixture中含有SYBR Green I和ROX染料,保存本产品或配制PCR反应液时应避免强光照射。
5、避免反复冻融本品,反复冻融可能使产品性能下降,本产品长期保存可置于-20℃。如果在短期内需要频繁使用,2×miRNA qPCR Mixture可于2~8℃保存。而Reverse primer仍需置于-20℃保存。
使用方法:
1、室温融化2×miRNA qPCR Mixture和Reverse primer(10μM)。
2、使用时请将2×miRNA qPCR Mixture上下颠倒轻轻均匀混合,避免起泡,并经短暂离心后使用。如果试剂没有混匀,其反应性能会有所下降。
3、将试剂置于冰上,并按下表配制反应体系:
| 试剂 | 体积 | 终浓度 |
| 2×miRNA qPCR Mixture(ROX) | 10μl | 1× |
| Forward primer(10μM) | 0.4μl | 0.2μM |
| Reverse primer(10μM) | 0.4μl | 0.2μM |
| miRNA第一链cDNA | Xμl | — |
| ddH2O | up to 20μl | — |
4、反应程序设置如下:
注意!本产品预变性反应必须在95℃ 10分钟下完成!
| 步骤 | 温度 | 时间 | 循环数 |
| 预变性 | 95℃ | 10 min | |
| 变性 | 95℃ | 15 s | 40-45个循环 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 1 min | |
| 溶解曲线分析 | 根据PCR仪要求设定 | ||
注意:
1)本产品所采用的热启动酶须在预变性95℃、10 min条件下实现酶的活化。
2)退火温度请以60-64℃作为设定范围的参考,发生非特异性反应时,可提高退火温度。
储存条件:-20℃,避免反复冻融。
esB Taq DNA Polymerase优惠价关键词:BesB Taq DNA Polymerase,WE0103
·组织样本RNA样品保存管
编号:WE0401
规格:10支
·HRP标记抗V5标签单克隆抗体
编号:WE0334
英文名称:HRP Conjugated Anti V5-Tag Mouse Monoclonal Antibody
规格:20μl|100μl
本抗体为经辣根过氧化物酶(HRP)直接标记的抗V5标签鼠单克隆抗体,可用于检测V5-Tag(GKPIPNPLLGLDST)融合蛋白。本产品经HRP直接标记,无需使用二抗,可直接用相应酶底物显色或化学发光法检测目的蛋白,减化了实验步骤,避免由二抗交叉反应引起的非特异性条带。
抗体类型:鼠IgG
免疫原:人工合成多肽
标记物:HRP
应用范围:WB(1:500-3000)、ELISA(1:1000-20000)
·一步法Western专用封闭液
编号:WE0296
英文名称:One Step Western Blocking Buffer
规格:100ml
Western Blot实验中,为防止印迹膜与检测系统中的蛋白成分(如抗体IgG等)发生非特异性吸附,导致实验结果不清晰,通常在进行一抗孵育前需预先对印迹膜上的非特异结合位点进行封闭。本产品以奶粉为基础,采用独特配方,专用于百奥莱博一步法WB检测中的封闭步骤,可快速高效地封闭膜上多余的结合部位,减少非特异结合情况的产生,降低背景,适用于各种转印膜的封闭,操作方便快捷。另外,本产品特别添加了蛋白稳定剂,可保证每次实验封闭效果稳定可靠。
注意事项:
1、每次使用时,必须保证封闭液将印迹膜完全浸没,以免影响封闭效果。
2、本产品含有防腐剂,操作时请佩戴手套进行防护。
3、本产品仅用于科研,不能用于人体实验或人体治疗。
操作步骤:
1、本产品无需稀释,开盖即用。
2、目的蛋白转移完毕后,将印迹膜放入容器中,加入适量One Step Western Blocking Buffer。
3、室温孵育5分钟。
4、封闭结束后弃去封闭液,进行一步法Western Blot后续操作。
储存条件:2~8℃
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文献和实验out the E.coli strain carrying the Taq polymerase gene on an LB amp plate and innoculate a 5 ml overnight culture with a single colony.• Innoculate a 1 liter culture of LB-amp with the 5 ml of overnight culture and grow to an A600 of 0.2.Add IPTG to a final
High Specificity PCR Amplification Using AccuPrime Taq DNA Polymerase
Taq DNA Polymerase 0.25 µl 0.5 µl 1 µl Autoclaved distilled water To 10 µl To 25 µl
Dideoxy Sequencing Reactions Using Taq Polymerase
Tuq DNA polymerase is a highly stable polymerase isolated from the thermophilic organism Thermus aquaticus . Because of its unique properties this enzyme has been extensively used for amplification of DNA fragments by the polymerase chain
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