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- Ybscience
- 中国/上海
- hz70604-401
- 2025年07月12日
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- 详细信息
- 询价记录
- 文献和实验
- 技术资料
- 保存条件：
常温运输，4℃保存
- 保质期：
一年
- 英文名：
PAGE miRNABACK
- 库存：
大量
- 供应商：
上海沪震生物科技有限公司
- 规格：
40次/盒
聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE）是目前分离200 nt以下的小片段RNA，尤其是 20 nt左右的microRNA（miRNA）分子的主要方法，但是目前市场上用于从聚丙 烯酰胺凝胶中回收miRNA片段的产品还很少，为此开发了本产品。它具有下 列特点:
1. 可以回收15-200 nt的各种长度的RNA，包括100nt以下的miRNA片段。
2. 溶液A中含有RNA助沉剂RNADOWN，miRNA回收率最高达到90%左右。
3. 一站式，即开即用，操作简单，用户不需要自备任何试剂。
4. 扩容性好，可小规模操作，也可以大规模操作。
5. 试剂盒含固相RNase清除剂，可清除工作环境中RNase的污染。
miRNA PAGE胶回收试剂盒-PAGE miRNABACK使用及效果
将切下的含小RNA片段的PAGE胶条放入1.5 mL RNase-free 塑料离心管中，- 20℃或更低温度冷冻10-30分钟后用微型离心管专用研磨杵捣碎，加入相当于胶重 量2-3倍的溶液A，在摇床上4℃摇晃3-5小时，13000-15000 g 4℃离心10分钟， 取上清，再用0.2 mL溶液A洗涤捣碎的PAGE胶，离心后合并上清，加入2倍体积的 溶液B，13000-15000 g 4℃离心10分钟，用1 mL溶液C洗涤一次后离心所得沉淀 即为回收的RNA片段，溶解在适量RNase-free水中待用。
DNA Marker Ⅱ（条带100.300.500.700.900.1200） 500T
DNA Marker Ⅲ（条带300.500.800.1500.2000.3000.5000） 50T
DNA Marker Ⅲ（条带300.500.800.1500.2000.3000.5000） 500T
DNA Marker Ⅳ（条带500.1000.1500.3000.5000.8000） 50T
DNA Marker Ⅳ（条带500.1000.1500.3000.5000.8000） 500T
DNA Marker Ⅴ（条带200.400.700.1000.1500.2000） 50T
DNA Marker Ⅴ（条带200.400.700.1000.1500.2000） 500T
DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000) 50T
DNA MarkerⅥ(条带250.1000.2500.5000.7000.10000) 500T
DNA Marker Ⅶ（条带300.500.1000.1500.2000.2500） 50T
DNA Marker Ⅶ（条带300.500.1000.1500.2000.2500） 500T
50bp DNA Marker（条带50.100.150.200.250.300.250.400） 50T
50bp DNA Marker（条带50.100.150.200.250.300.250.400） 500T
50bp Plus（条带50.100.150.200.250.300.350.400.500.600.1000） 50T
50bp Plus（条带50.100.150.200.250.300.350.400.500.600.1000） 500T
100bp DNA Marker（100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500） 50T
100bp DNA Marker（100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500） 500T
100bp Plus（100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500.2000.3000.5000） 50T
100bp Plus（100.200.300.400.500.600.700.800.900.1000.1500.2000.3000.5000） 500T
200bp（条带200.400.600.800.1000.1200.1400.1600.1800.2000.3000） 50T
200bp（条带200.400.600.800.1000.1200.1400.1600.1800.2000.3000） 500T
250bp（条带250.500.750.1000.1500.2000.2500.3000.5000） 50T
250bp（条带250.500.750.1000.1500.2000.2500.3000.5000） 500T
300bp（条带300.600.900.1200.1500.1800.2500.3000.5000） 50T
300bp（条带300.600.900.1200.1500.1800.2500.3000.5000） 500T
500bp（500.1000.1500.2000.2500.3000.3500.5000） 50T
500bp（500.1000.1500.2000.2500.3000.3500.5000） 500T
1kb DNA Marker（条带1000.2000.3000.4000.5000.6000.8000.10000） 50T
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文献和实验可以采取现在比较常用的TRIzol一步法。不要使用带柱子的RNA提取试剂盒，因为除了专门用于提取miRNA的试剂以外，绝大部分柱子无法捕获20nt左右的miRNA。 2、电泳 （1）配制15%的尿素变性PAGE胶，可以先用预冷的0.5XTBE缓冲液作为电泳缓冲液，60V预跑30min。 （2）将样品与RNA loading buffer按比例混合，70℃预热5min，立即放置冰上。 （3）上样前，用缓冲液冲洗点样孔，防止点样孔中的杂质影响电泳。 （4）点样时，使样品均匀铺在点样孔底部
或northern时，你必须验证分析只检测目的miRNA，而不是其它成员。我们在玉米(Zea)RNA载体背景中加入合成的成熟miRNA(IDT)来验证。 就northern来说，每个miRNA家族成员的合成miRNA在含有8M尿素的15% PAGE胶上进行。优化杂交温度，让LNA探针只与目的miRNA结合，而不与其它成员结合。一旦利用加标策略建立了适当的northern杂交条件，就能应用于实验样品。 3. 原位杂交：我们也利用Exiqon的DIG标记的miRCURY LNA
往往被淘汰掉，因而不适用于Small RNA的分离纯化。有机溶剂抽提能够较好的保留Small RNA，但是后继的沉淀步骤比较费时费力。目前还有另外一些Small RNA分离专用的试剂盒。如MirVana miRNA IsolationKit是采用玻璃纤维滤膜离心柱(glass fiber filter，GFF)，既能够富集10 mer以上的RNA分子，又兼备离心柱快速离心纯化的特点。对于Small RNA测序，我们采用PAGE胶电泳对小RNA进行分离。客户可以选择他们感兴趣的Small RNA长度
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