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Taq DNA聚合酶
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一年
Taq DNA Polymerase
大量
上海沪震实业有限公司
500 U盒
Taq DNA聚合酶产品及特点:
本产品是Thermus aquaticus (水生栖热菌)的DNA聚合酶基因在E. coli 中表达而得,具有以双链DNA为模板的5→3聚合酶活性和5→3外切酶活性。Taq DNA聚合酶长为832个氨基酸,分子量为 94 Kd。该酶可以广泛用于PCR、RT-PCR和加尾反应等。其特点如下:
1. 具耐热DNA聚合活性。该酶在90℃以上几乎无DNA合成,在75~80℃时延伸率约150个核苷酸/秒,70℃时为60个核苷酸/秒,55℃时为24个核苷酸/秒。在65-68℃并有Mn2+存在时还具有逆转录活性。
2. 热稳定。在PCR混合物中95℃保温40 分钟仍可保持50%的活性。
3. Mg2+离子依赖性。MgCl2浓度在2.0 mM时该酶催化活性最高。
4. 本酶无3→5外切活性,不具3→5校对功能,碱基错配机率为2.1×10-4。
Taq DNA聚合酶质控标准
1. 功能检测,以λ DNA为模板,特定引物扩增2-20 Kb PCR片段。
2. 核酸内切酶活性检测(切刻酶活力),在50 μL反应缓冲液中,将20单位的酶和1 μ g ΦX174 RFⅠ型DNA于 72℃ 或37℃条件下共育4小时,<5%的DNA转变为RFⅡ型。
3. 核酸外切酶活性,在50 μ L反应缓冲液中,将20单位的酶和1 μ g λ DNA/HindⅢ消化产物于72℃ 或37℃条件下共育4小时,没有观察到明显带型变化。
4. 核酸酶活性检测:在50 μL反应缓冲液中,将1 μg λ DNA与20单位的酶于72℃保温16小时,无明显DNA降解发生。Taq DNA聚合酶实验数据
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