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文献和实验某基因的序列如下,我设计了一对引物,5 TCGGTTTTCACTGGTTCTCATCC 3 3 T CGCACTCCTTTCTCTCGCAATG 5 想扩增的目的片断是3629-4799 (1170 bp,)不知道能否,请大侠们帮忙看一下, 3601 ttttttaatt tcaggatatg gagcttcttc ggttttcact ggttctcatc cagtcctggc 3661 tgaccccagt gcaataccta agcaaggtgt ttacaaacaa
关于<非变性/native-PAGE及相关的蛋白回收>帖子总结.
1. 一般Native-PAGE方法 非变性电泳 非变性胶蛋白电泳 求助:Native-PAGE方法 Native-PAGE Protocol 2. Native PAGE 分离碱性蛋白 求助:碱性小肽非变性电泳 非变性电泳的高手请进! 3. 回收目的蛋白 [url=http://www.dxy.cn/bbs/thread/962034 ]如何从凝胶中提取蛋白,谢谢[/url] 求助:关于从电泳凝胶中如何萃取蛋白质? 水平
关于论坛中所有Native PAGE/非变性电泳及蛋白回收的经典总结
菌体加4×上样缓冲液煮沸, 12.5% SDS PAGE 分析。 大量表达时, 于1 L 4×YT培养基中摇至A600=0.5~2.0时, 加IPTG(终浓度0.5 mmol/L)诱导1~4 h。 超声破菌, 12 000 g离心除去细菌碎片后, 裂菌上清液用GST亲和树脂纯化(参照BD Biosciences Clontech 使用手册p1-15), 纯化融合蛋白质GST-S600经凝血酶切, 酶切条件为: 1×PBS, 室温反应16 h。 酶切后样品经制备型PAGE电泳分离, 用KCl染色
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