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上海研谨生物
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3×100ml
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文献和实验免疫组化主要步骤 1. 洗载玻片:将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸 附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上,置于37°C温箱中,将多聚赖氨酸涂布于玻片的表面,由于Lys带正电,而大多数的组织带负电荷,从而产生吸附作用。2.包埋组织:先在铁模具中加入一些液态石蜡,先稍微冷却,然后再将待包埋的组织置于石蜡之中
后使用。8)胰酶溶液:0.25% Trypsin9)乙醇:95% 乙醇(AR)10)其他耗材:载玻片、无纺布等。二、染色体标本制备1)载玻片清洗:将载玻片逐片放入超声波清洗器内超声 30 min,然后用自来水将载玻片进行彻底冲洗,烘干。逐片放入次强酸清洗液中浸泡约 24 h。取出后用自来水彻底冲洗,然后用纯水彻底冲净,然后放入 95% 乙醇内保存备用(需密封)。使用前可用无纺布将载玻片擦干,置于- 20℃ 预冷备用。2)细胞培养:细胞正常培养,观察细胞生长状态,接种至 6 孔培养板,待其生长至对数
化到相似的浓度水平。最后,剩余的 cDNA 分子在 PCR 反应中被扩增以生成可测序的文库(图 2)。 图2 | 使用双链特异性核酸酶 (DSN) 处理酶法去除丰富的序列。 DSN 处理应用广泛,特别是用于注释的测序流程,DSN处理被普遍使用。它可用于从特征较少的物种中获取转录组信息,这些物种无法使用使特定探针进行靶向去除高丰度转录本的方法,以及不具有 poly(A) 尾而无法通过 poly(A) 选择富集 mRNA 的物种(3) . 因此,一些 RNA-Seq 试剂盒及常用的去除方法
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