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室温,避光,12个月
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大量供应
- 供应商:
上海研谨生物
- 规格:
100ml
产品简介:
苏木素(Hematoxylin)和伊红(Eosin)联合染色简称 HE 染色,是病理学和组织学最常用的一种染色方法。苏木*精为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的主要成分是DNA,在DNA 的双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木**精碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。
改良Lillie-Mayer 苏木素染色液无毒,无氧化膜,细胞核染色质着色深而细微,临床上常替代Harris 苏木素染色液。对细胞核染色很清晰,不着染胞质和纤维成分,属进行性
染色,故染色后可以不用盐酸乙醇分化,染色时间约 5~8min,如果是充分氧化后可染色 3~5min。常用于糖原等特染、酶组化和免疫组化等染色后复染细胞核作对照染色,尤其适用 于经过特殊染色后不能经酸处理时对细胞核的复染。在特殊染色中,常不天青石蓝B液联合染色,使细胞核染色后不被后续的酸性染料所褪色。
染色原理:
1、细胞核染色的原理:
苏木素为碱性天然染料,可使细胞核着色。细胞核内染色质的成分主要是DNA,在DNA双螺旋结构中,两条核苷酸链上的磷酸基向外,使DNA 双螺旋的外侧带负电荷,呈酸性,很容易不带正电荷的苏木素碱性染料以离子键或氢键结合而被染色。苏木素在碱性溶液中呈蓝色,所以细胞核被染成蓝色。
2、细胞浆染色的原理:
伊红是一种化学合成的酸性染料,在一定条件下可使细胞浆着色。细胞浆的主要成分是蛋白质,为两性化合物,细胞浆的染色不染液的 pH 值密切相关。当染色液 pH 值在胞浆蛋白质等电点(4.7~5.0)以下时,胞浆蛋白质以碱式电离,则细胞浆带正电荷,就可 被带负电荷的酸性染料染色。伊红在水中离解成带负电荷的阴离子,不胞浆蛋白质带正电荷的阳离子结合,使细胞浆着色,呈现红色。
3、分化作用:
染色后,用某些特定的溶液将组织过多结合的染色剂脱去,这个过程称为分化作用,所 用的溶液称为分化液。在HE 染色中常用1%盐酸乙醇作为分化液,因酸能破坏苏木素的醌型结构,使组织不色素分离而退色。大多数组织经苏木素染色后,必须用 1%盐酸乙醇分化,使细胞核过多结合的苏木素染料和细胞浆吸附的苏木素染料脱去,再进行伊红染色,才能保证细胞核不细胞浆染色的分明。
4、返蓝作用:
分化之后,苏木素在酸性条件下处于红色离子状态,呈红色;在碱性条件下处于蓝色
离子状态,呈蓝色。组织切片经酸性乙醇分化后呈红色或粉红色,立即用水除去组织切 片上的酸而中止分化,再用弱碱性水使苏木素染上的细胞核呈现蓝色,这个过程称为返蓝作用或蓝化作用。另外用自来水浸洗也可使细胞核返蓝,但所需时间较长。
产品组成:改良 Lillie-Mayer 苏木素染色液 100ml 500ml RT 避 光
自备材料:
1、酸性乙醇分化液2、蓝化液,如稀氨*水、碳酸锂溶液等
3、系列乙醇
4、伊红染色液
5、4%多聚甲*醛
操作步骤(仅供参考):
(一)石蜡切片染色
1、切片脱蜡至水①□二甲苯作用 2 次,每次 5~10min。
②□(可选)无水乙醇作用 2 次,每次 3~5min。
③□95%的乙醇 3~5min
④□90%的乙醇 3~5min
⑥□自来水或蒸馏水冲洗
2、染色
①□改良 Lillie-Mayer 苏木素染色液染色②□自来水或蒸馏水冲洗
③□(可选)盐酸乙醇分化
④□自来水冲洗
⑤□(可选)蓝化液返蓝
⑥□自来水冲洗
⑦□伊红染色液染色
3~5min
1~3min
5~8min 5~10s
2~5s
20~30s
20~40s
30~60s 3~5min
⑧□自来水冲洗 1~5s
2、脱水、透明、封固
①□80%乙醇 10~20s③□95%乙醇作用 2 次,每次 1~2min。
④□无水乙醇作用 2 次,每次 2~3min。
⑤□二甲苯透明 3 次,每次 2~3min。
⑥□中性树脂封片。
10~20s
胞等呈明亮的橙红色。
(二)冰冻切片染色
1、乙谜醚-乙醇混合固定液2、自来水冲洗
5~10s
2~5s
5、(可选)盐酸乙醇分化
6、自来水冲洗
7、(可选)蓝化液返蓝
8、自来水冲洗
9、伊红染色液染色
10、自来水冲洗
11、80%的乙醇
12 、95%的乙醇
13、无水乙醇
14、苯酚二甲苯(1:3)
15、二甲苯透明 3 次,每次 2~5s。
16、中性树脂封片
染色结果:细胞核呈蓝色;细胞质、纤维呈红色。
(三)细胞染色
1、4%多聚*甲*醛固定 10~20min。2、自来水冲洗 2 次,每次 2min。
3、蒸馏水冲洗 2 次,每次 2min。
2~5s
2~5s
2~5s
5~10s
2~5s
1~2s
1~2s
1~2s
2~5s
2~5s
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文献和实验液固定兔颈总动脉,用不同HE染色方法染色,比较不同方法的效果。染色结果是细胞核与细胞浆呈蓝红相映,色泽比较鲜艳。改良Harris法染色效果最好,染色效果受组织病理变化情况影响,有个体差异。 关键词:HE染色;改良Harris法;改良Lillie-Mayer’s法;改良Mayer法; 1 引言 在病理学实验课中,要观察大体标本和镜下标本,为了能更好的掌握实验课中所学的知识和内容,尤其
。将上述物质混合后加热煮沸,边煮边搅拌,约5min。然后用另一容器取30%三氯化铁水溶液25ml,另行加热煮沸后慢慢倒入上述混合液中继续煮沸3min,不断搅拌溶液呈胶体状。去火冷却过滤,将滤纸上的残渣连同滤纸放在60℃恒温箱中烤干。残渣呈深蓝色细颗粒状粉末,再溶于400ml的70%乙醇液中。然后加浓盐酸4ml和苯酚5g放置至成熟后使用。 (3)丽春红染色S染色液 0.5%丽春红S水溶液15ml,苦味酸饱和水溶液85ml。 (4)Gomori氨性银改良液 取5%硝酸银水溶液5ml,滴加浓氨水由棕
期内,是否潮解。 (3)Ehrlich苏木素液: 苏木精2g;无水乙醇100ml;甘油100ml;冰乙酸10ml;钾明矾2-3g;蒸馏水100ml 先将苏木精溶于无水乙醇,加甘油和冰乙酸待用。然后把钾明矾溶于蒸馏水,再注入待用的苏木精液,用玻棒搅匀,轻盖瓶口(可用棉花),置于日光下,经常开启瓶口并摇匀,约二个月后,颜色变褐色即可使用。 (4)Mayer改良苏木素液: 苏木精2g;无水乙醇40ml;硫酸铝钾100g;蒸馏水600ml;碘酸钠0.4g;冰醋酸20
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