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克必隆常态转化液
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低温运输,-20℃保存
一年
Tranzol
大量
上海沪震实业有限公司
20次盒
克必隆常态转化液产品及特点
克必隆常态转化液是最新推出的具有自主知识产权的革命性产品,它能使各种常态的E.coli 细胞直接用于快速转化实验,使广大用户不再因为简单的转化实验而再为感受态细胞的制备,保存和运输等繁琐的事情而操心,大大地缩短了基因克隆实验的时间,提高使用者的工作效率。
1. 不需专门制备感受态细胞,直接使用常态的细胞进行质粒转化,随用随配,十分方便。常态细胞包括新鲜培养的菌液,新鲜的或4℃放置数月的培养基菌落,甘油菌种保存液等。
2. 适用菌种和质粒广泛,用过的E.coli 菌种包括K12系的DH5α和Tg1,B系的BL21(DE3)。用过的质粒有pGEM,pET和克必隆系列等。
3. 转化效率适中,使用10 ng质粒转化一般能得到上万个转化子)效率在105到106 CFU/μg质粒之间),使用3-5 μL连接液转化一般能得几千个转化子,足够筛选重组子使用(但不适合构建文库)。
4. 单管快速操作,整个操作可以在一个1.5 mL塑料离心管中进行,最短可以在三十分钟内完成,不需要过夜细菌培养,热休克处理甚至恒温摇床,极其适用于自动化的大规模克隆筛选工作。
5. 稳定性好,本可以在-20℃条件下长期保存而不用担心转化效率的降低,而感受态细胞在同样条件下会迅速失去活性。
克必隆常态转化液使用及效果
将数个E.coli 菌落(或50 μ L甘油菌种液,100 μ L新鲜培养液)转入装有1 mL液体培养基的1.5 mL塑料离心管中,37℃水浴1小时,室温10000 g离心1分钟后去尽上清,加入转化液和1-10 μ L连接反应液,轻柔混匀,-20℃放置致凝,冰浴5分钟,加入1 mL 液体培养基,37℃水浴1小时,取0.1-0.3 mL涂于含相关抗菌素的固体培养基上,37℃过夜培养后即得转化菌落。
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