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文献和实验Nature 解读:David R. Liu 等通过体内碱基编辑实现治疗小鼠Hutchinson-Gilford早衰综合征
和 15 倍。 图片来源:NatureABE 怎样递送到小鼠体内,效果怎么样?由于 HGPS 导致全身不同的组织均受早熟症的影响,研究者为了将 ABE 输送到全身,构建了腺病毒(AAV)递送系统。在体内实验中,为了比较注射途径和时间对体内编辑的影响,研究者对 P3(3 日龄)小鼠(n=4)和 P14(2 周龄)小鼠(n=5)进行了眶后注射,并对 P14 小鼠(n=5)进行了腹腔注射。在 6 周时,P14 眶后注射在主动脉和骨骼中的编辑效率最高。三种注射途径对心脏组织(不包括主动脉)的编辑效率相似
-like (N-terminal RNase H fold) domain and the HNH(McrA-like) domain, each responsible for cleavage of one strand ofthe duplex DNA molecule. Therefore, there are two different versionsof Cas9 that can be used for genome modifi cation, the wildtype Cas
手把手教你利用 CRISPR-Cas9 系统精准敲除靶标基因
一、CRISPR-Cas 系统简介图 1 CRISPR-Cas9 系统介绍CRISPR-Cas9 系统是一种被广泛运用的基因组编辑工具,它来源于细菌的适应性免疫系统。CRISPR-Cas9 系统包括:Cas9 酶和一个向导 RNA。 向导 RNA 作用是引导 cas9 到基因组的特异性位点上切割。如图 1 所示。目前为止,CRISPR-Cas9 系统主要有两方面应用: 基因敲除和基因敲入。基因敲除时, 一旦 DNA 的双链断裂反应(DSB)被 Cas9 切割诱导发生, 细胞会启动 NHEJ
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