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文献和实验.N. Cabili, C. Trapnell, L. Goff, M. Koziol, B. Tazon-Vega, A. Regev, J.L. Rinn, Integrative annotation of human large intergenic noncoding RNAs reveals global properties and specific subclasses, Genes Dev 25(18) (2011) 1915-27. [2] G.D. Yang, X.Z. Lu
近年来,ZFN、TALEN、CRISPR/Cas9等基因组编辑技术可谓是层出不穷,尤其是CRISPR/Cas9,一出现便在全球范围内掀起一股热潮。同时,各大公司也开发出一系列相应的产品,其中一种至关重要的就是基因敲除阳性克隆筛选的试剂。 目前用的比较多的有CEL I酶,CEL I是植物来源的一种特异性识别碱基错配的酶,活性高,不会产生假阳性。而且CEL I酶是目前生物界发现的唯一能准确切割异源双链DNA中存在错配位点的酶,在遗传学研究和应用领域中扮演重要的角色,多应用在临床诊断领域
Nature子刊:英国科学家利用CRISPR技术构建出一个小鼠全基因组gRNAs文库
and used a lentiviral vector to express these gRNAs in ESCs that constitutively express Cas9. Screening the resulting ESC mutant libraries for resistance to either Clostridium septicum alpha-toxin or 6-thioguanine identified 27 known and 4 previously
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