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文献和实验设计了 sgRNA 之后怎么办呢？还是这篇文章先讲一下这里的框架首先是实验设计Experimental design1. Target selection for sgRNA--选择靶点详情见：CRISPR-Cas9 基因敲除 sgRNA 设计 https://www.jianshu.com/p/ 8222f449cb442. Approaches for sgRNA construction and delivery.sgRNA 的合成和投递有两种方式：A）PCR；B）单独的 sgRNA
三句话读懂一篇 CNS，酗酒背后的机制，环境-基因互作诱导肿瘤发生，Cas9 时钟...
loci by integrative epigenomics。该工作通过整合 ENCODE、Roadmap 计划，对超过 800 种组织细胞样本进行分析， 绘制了染色质修饰和染色质开放性特征等表观遗传图谱。进一步地，将 210 万个增强子划分为 300 个模块，结合 GWAS 数据对这些增强子在疾病的潜在作用进行探究。 上述工作对深入理解组织器官病变及调控环路机制具有重要意义，为后续实验提供了精准的线路图。 图 9：来源 Nature 10. Cell: 利用 CRISPR-Cas 系统记录生物
技术、TALEN技术和CRISPR/Cas9技术的基因敲除研究。 实验流程1. 基因组DNA的准备：提取野生型和突变型细胞的基因组DNA。Genloci公司专为阳性克隆筛选设计的TNA抽提试剂盒也能帮您的忙，只需500个左右的细胞即可提取全基因组DNA。 2. 杂交DNA的准备：a) PCR引物设计：一般扩增产物长度为300~600 bpb) PCR扩增：获得杂交DNA 3. Cruiser™酶筛选阳性克隆：无需纯化DNA，直接使用PCR产物，混合体系后45℃下反应15~20 min K562
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