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文献和实验] 1.2 Genome Engineeringwith CRISPR- Cas9 System The required components for CRISPR-Cas9 mediated DNA cleavageare the Cas9 protein and its bound RNA component thatguide the Cas9 to target sequence. The RNA component consistsof a RNA duplex formed
PREPARATION OF STOCK SOLUTIONS FOR FISH
-bicyclo-octane (DABCO) in 50 ml Falcon tube -add 30 ml of 100% glycerol -dissolve in WWB of 70°C, solution of 2.3 % DABCO in glycerol -put 9 ml 2.3 % DABCO in glycerol together with 1 ml 0.2 M tris-HCl 0.02 % NaN3 5 µl PI stock (1 mg/ml) -mix
mixture ( 24 ul / each ) 3.3.2.1 10x PCR buffer (含1.5 mM MgCl2 ) 2.5 ul 3.3.2.2 2 nd stage primer mixture 0.5 ul 3.3.2.3 dNTP ( 1.25 mM each ) 1.0 ul 3.3.2.4 MgCl2 ( 25 mM ) 0.5 ul 3.3.2.5 Taq DNA polymerase ( 5U/ul ) 0.1 ul 3.3.2.6 ddH2O 19.4 ul
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